一、清道夫受体结构

Komada等于1990年用配体亲和层析和免疫亲和层析,将牛肺巨噬细胞清道夫受体纯化,并由其部分氨基酸序列(见图6-7)克隆得到Ⅰ型、Ⅱ型清道夫受体cDNA,以后相继将人、兔和小鼠的清道夫受体cDNA克隆成功。该受体C-末端为半胱氨酸的为Ⅰ型,具有短肽结构的为Ⅱ型清道夫受体。以三聚体形式存在,分子量为22kD的膜糖蛋白。N末端在细胞膜内侧,C末端在膜外侧存在,是“inside out”型的受体。该受体的Ⅰ、Ⅱ型均由6个区域部分组成,如图6-8所示。

1.N-端胞浆域 由50个氨基酸残基组成,可能与包涵素结合,类似LDL受体结构。其中央部分是磷酸化部位,摄取配体的最重得要的部位。

2.跨膜域(transmembrane) 由第51~76氨基酸残基构成。为疏水性氨基酸组成的单一结构,“抛描”固定于细胞膜上。

3.间隔域 由第77~150氨基酸残基构成。

4.α-螺旋卷曲螺旋域(α-hericalcoiled-coil)由第151~271共121个氨基酸残基组成。在这段蛋白中,其中含糖基结构域中有7个氨基酸残基组成的一含疏水性氨基酸的高氨酸拉链(leucine-zipper-helix)结构或者称为“七联体”,如图6-9所示,这种结构可以多达23个。

清道夫受体氨基酸序列比较

图6-7 清道夫受体氨基酸序列比较

清道夫受体结构模式图

图6-8 清道夫受体结构模式图

清道夫受体的亮氨酸拉链结构

图1-9 清道夫受体的亮氨酸拉链结构

图中为α-螺旋卷曲螺旋域中的螺旋轮示意图(人与牛)

亮氨酸拉链结构的肽段先叠成右手α-螺旋,每一圈含3.5个氨基酸。尔后这些α-螺旋以疏水氨基酸中心构成的平行的三聚体结构。该结构域内,亮氨酸与异亮氨酸残基出现部分对人则是分别为155~203和240~272氨基酸残位置。

5.胶原蛋白样域 属第273-343个氨基酸残基肽段,这种序列与胶原蛋白非常相似,推测这段肽链为右手胶原蛋白样三联体螺旋。

6.C端侧特异域 属第344~453个氨基酸残基肽段,为羧基末端。该段富含半胱氨酸。清道夫受体的8个Cys有6个在此域范围,所以称为清道夫受体富半胱氨酸域(scavenger receptor cystein rich domain like, srcR域)。半胱氨酸的二硫键交联而成的区域非常紧密,牢固,形成球状,足以经受细胞外环境的变动,属于细胞外区域。

srcR域长约430nm,犹如三朵郁金香的“花苞”,有由间隔域到α-螺旋卷曲螺旋域构成的“花茎”为支撑,这一“花茎”约占总长度的52%或胞外部分的62%。Ⅱ型清道夫受体没有srcR域,代之以6个氨基酸残基,所以是“截短”的清道夫受体。但Ⅱ型清道夫受体比Ⅰ型清道夫受体具有高亲和力结合和介导内移修饰LDL作用。