二、蛋白多糖的提取

蛋白多糖具有可溶于4mol/L盐酸胍的性质,再经DEAE-纤维素层析除去其他杂质,非蛋白多糖与蛋白多糖用不同浓度尿素可分段层析分开。

1.取动脉血管小心除去血管周围脂肪组织和纤维膜,用冷0.5mol/l PBS pH7.8洗涤,2kr/min离心10min。

2.用匀浆器破碎,加入15倍体积的提取液(0.05mol/L乙酸pH5.8、4.0mol/L盐酸胍、0.1mol/l6-氨基乙酸EDTA、3mol/L苄脒),于4℃缓慢振荡24h,10kr/min离心30min。

3.取上清透析浓缩30倍。

4.将提取液加入已经平衡好的DEAE-纤维素柱上,分别用0.15mol/l NaCl和2mol/LNaCl洗脱,均用280nm波长紫外监测仪连续监测。