四、无特定病原体动物的培育

1.必须饲养在屏障系统内:培育SPF动物的目的的是为实验提供没有传染病的健康动物,因此SPF动物应饲养于屏障系统(密封的饲养室或超净饲养架)内,实行严格的微生物。应定期、按规定的监测内容和方法来检查有无致病菌(即特定的病原体)的污染。污染的动物依不同情况应降低等级或全部淘汰。一旦发生污染应彻底调查污染的原因。在被污染的屏障系统中工作的人员,往往附有与动物污染的同样微生物,应引起注意。

由于SPF环境中没有致病微生物,所以SPF动物的生产效果比普通动物为好,饲养中一般损失小。但屏障内一旦遭到污染,病原体的传播却更强烈。所以保持屏障系统的完好是非常重要的。

2.必须严格选择原种:SPF动物群的建立,其原种必须来源于无菌动物或悉生动物才能保证。即将悉生动物或无菌动物饲养于屏障系统的饲养室中,使之自然感染特定病原体以外的一般微生物,但应严格防范病原体的污染,并需要定期检查。

当然培育SPF动物,是以卵或子宫内无病原体为前提的。某些病原体可以垂直感染给胎儿,这个问题在培养SPF动物时应充分考虑。即应当严格选择剖腹产母体,该动物应未感染上述病原体,最好通过几代连续剖腹,来培育原种无菌动物,作为培育SPF动物的原种。

3.必须严格掌握SPF的质量标准:SPF动物必须首先排除各种人畜共患的传染病病原体,还应排除影响该种动物生产和实验使用上产生干扰的病原体。SPF动物质量监测标准应参照表6-7执行。当然我们不必完全照抄外国监测标准的内容,在培育SPF动物中,可根据我国具体情况,注意轻重缓急,先排除危害较大的病原体。上海生物制品研究所在这方面有下面几点经验体会。

⑴小鼠的淋巴细胞性脉络膜丛脑膜炎感染问题。虽然本病毒可通过胎盘传递,对人也有一定影响,是应该列入监测内容的,但其感染率极低,似可暂缓进行,宜先着重于呼肠弧类病毒或腺病毒的监测。

⑵有些病毒性病种,如有瘤病毒、胸腺病毒等,国内也未见有关报导,甚至可能国内尚难获得标准毒株,似宜在今后调查研究的基础上,考虑是否有必要列入我们监测标准的内容中。

⑶细菌性疾病中如结核病、李司忒菌病等仅是地区性的或特殊品系的偶发病种,亦不是当前我们需要监测的内容。

⑷我国近来自国外引进鼠种日益增多,可能会发生一些外来疫源。众所周知,自然疫源与地理区域有很大关系。国外引进的鼠种,来自日本的也不少,日本与我国相邻,地理条件较接近,如在欧洲国家中没有列入监测内容的大肠杆菌O115及枸椽酸杆菌,日本学者却很重视这些细菌,并列为监测内容,它又是小鼠易患的肠道传染病之一。在这方面我们应引起足够重视,即要探索自己的鼠群是否存这些病原,同时又要对外来鼠种加以监测。

⑸带有绿脓杆菌的小鼠,一般来说不影响它的生长发育和繁殖性能,亦不出现症状,但使用于抑制免疫机能实验时,可出现菌血症而发病,甚至死亡。该菌广泛存在于自然界,且具固有的抗药性,是较难在鼠群中排除的一种细菌。鼠群中是否存在绿脓杆菌,亦可间接反映管理SPF小鼠水平的一个侧面,所以亦宜列入监测质量内容中。

⑹霉形体种属繁多,在啮齿类动物中,小鼠的自然感染率远较豚鼠、家兔危害性小,但可引起多种症状,特别是侵犯鼠关节炎的霉形体,如伴随继发感染,易与鼠痘症状混淆,因此,亦应注意监测。