温度变动缓慢，在一定范围内，机体可以本能地进行调节与之适应。但变化过大或过急，机体将产生行为和生理等不良影响，影响实验结果。
一般当哺乳类实验动物，当温度过低时，常致性周期的推迟，而温度超过30℃时，则雄性动物则出现睾丸萎缩，产生精子的能力下降；雌性动物出现性周期的紊乱，泌乳能力下降或拒绝哺乳，妊娠率下降。因此实验环境温度过高或过低，都能导致机体抵抗力下降，使动物易于患病，均可影响实验结果的正确性，甚至造成动物死亡。动物实验时最适宜的环境为21～27℃。
喜马拉雅（Himalaya）兔在20℃环境下饲养时，耳、尾、鼻和四肢尖端生长白毛，而饲养在10℃时，则生长黑毛。一些小啮齿类实验动物，在气温降到一定程度，就进入冬眠，如金黄地鼠，当气温降到4℃时，则开始冬眠。10～28日龄乳鼠分别饲养在3℃、22℃和33℃，可观察到乳鼠的甲状腺、胃上腺、肝脏、肾部皮肤以至尾巴的构造都有明显差异。一些药物的LD50在不同温度条件下，有较大差别（见表11-13）。
表11-13 两种不同温度对药物LD50的影响
| 药 物 | 15.5℃ | 27℃ |
| 苯异丙胺（Amphetamine） | 197.0 | 90.0 |
| 盐酸脱氧麻黄硷（Methedrine） | 111.0 | 33.2 |
| 麻黄硷（Ephedrine） | 477.1 | 565.0 |
各种动物，甚至同种动物不同品系间，其最适宜温度都有差别。室温应保持在各种动物最适宜温度±3℃范围内。一般常用的几种实验动物对20-27℃的温度范围都能适应。灵长类实验动物（尤以南美产的猿猴，如绒猴）和无胸腺裸鼠，要求较高一些的湿度，而家兔、狗和猫要求低一些，兹将文献资料所列多种实验动物的最适温度综合在表11-14中。
表11-14主要实验动物最适温度（℃）
| 动物种 | 国 内 | 英 国 | Lane-Petter氏（1970） | IHVE指南书（1971） | “欧洲”手册（西德1971） | 日 本 |
| 小 鼠 | 15～20 | 20～22 | 22～24 | 21～23 | 22±2 | 22～24 |
| 大 鼠 | 18～22 | 18.3～22 | 22～24 | 21～23 | 22±2 | 23 |
| 豚 鼠 | 15～20 | 17～20 | 18～20 | 17～20 | 22±2 | 21～25 |
| 家 兔 | 15～20 | 15.5 | 18～20 | 16～19 | 18±2 | 23 |
| 猫 | 15～20 | 21～22 | 19以下 | 18～21 | 22±2 | 24 |
| 狗 | 15～20 | 22以下 | 19以下 | 12～18 | 18±2 | 24（幼） |
| 灵长类 | 20～24 | 20～22 | 27（绒） | 22±2 | 24 |
