(二)竞争法

有报道用况争法检测IL-2水平。用免抗IL-2PcAb包袱板子,同时加入125I标记的IL-2和待测IL-2,根据γ计数cpm值得知待检IL-2对125I-IL-2与PcAb竞争结合的程度,从而推算出待测标本IL-2的含量。这种方法检测IL-2的敏感性可达50pg/ml。

为了增加敏感性,在上述系统中可再连接上生物素,再用链霉亲和素(streptavidin)酶标记物进行放大。此外,还可用化学发光、改进显色底物等措施提高检测方法的敏感性。

表4-23 细胞因子生物学活性与免疫学检测方法的比较

生物学活性法 免疫学检测法
原理 细胞因子特定的 细胞因子与相应抗体
生物学活性 特异性结合反应
结果表示 生物学活性水平 含 量
敏感性 一般较高 一般较低
(与细胞表面高亲和力受体有关) (加放大系统可明显升高)
特异性
(识别类型、亚型) (不能) (不可能)
周 期 较 长
受实验条件影响
培养条件
指示细胞敏感性差异
指示细胞突变 可发生
生物学作用相同因子干扰
样品中特异性或非特异性
抑制物干扰
重复性 较 差 较 好
标准化、大量检测 困 难 容 易