（一）血清（浆）性激素测定
性激素的分泌虽不似肾上腺皮质激素和生长激素的分泌那样存在明显的昼夜节律，但每日中仍有一定波动。通常清晨高于下午，青春期这种差异更大。为便于比较，一般均在晨8点取血。必须指出，上述时间取样测定的结果，虽能代表取样时的血清浓度，但是并不一定能真实地反映性腺的内分泌功能，特别是女性，更存在着月经周期中不同期的每一天的差异，有时这种天间差异可相当巨大，如排卵日与前后日间。因此为真实地了解性激素内分泌功能，除确定病人的发育阶段、生育期女性取样日处于月经周期的什么阶段外，大多需进行必要的动态功能试验，观察有关性激素的变化，才有利于诊断。目前性激素的检测大多采用免疫化学法，测定包括游离和结合两部分的总浓度，主要性激素的血清正常值参考范围见表12-7。此外，在血清性激素测定结果的评价中，应注意可能存在的干扰因素。甲亢、肝硬化等疾患时，肝脏合成SHBG增多，血清中睾酮、雌二醇总浓度升高，但能发挥作用的游离部分可能并无变化。而甲减、极度营养不良及多种严重疾患时，可减少SHBG合成，产生相反的影响。女性使用避孕药除因其所含的性激素可能干扰下丘脑、垂体的反馈调节外，还可因所含雌激素诱导SHBG的合成，产生影响。
（二）性腺内分泌功能的动态试验
在判断性腺内分泌功能紊乱的有无，特别是病变部位的确定上，性腺内分泌动态功能试验有较大的意义。
⒈GnRH兴奋试验 GnRH为下丘脑释放的一种十肽调节激素，可迅速地促进腺垂体释放贮存的LH及FSH，并刺激LH和FSH的合成。本试验主要检测腺垂体促性腺激素的贮备功能。在抽取静脉血做基础对照后，静脉注射GnRH100μg，注射后20和60min再分别取血测定血清LH和FSH，与基础对照值比较。正常人GnRH刺激后，峰值应在20min出现。LH的变化为：正常男、女性青春期的峰值应为基础水平的3倍以上；正常成人男性峰值约为基础值的8-10倍，而女性成人卵泡中期峰浓度约为基础水平的6倍，黄体中期约为基础值的3倍左右；男性成人峰值约为基础对照值的2.5倍；女性成人卵泡中期峰值约为对照值的2倍，黄体中期约为2.5倍，也以排卵前期增加最显著。若有垂体病变所致性激素功能紊乱者，GnRH兴奋试验反应缺乏或低下；下丘脑病变所致者，反应正常或峰值延迟至60min始出现；单纯性青春期延迟者，虽然基础对照值低，但反应正常。
⒉绒毛膜促性腺素兴奋试验 人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonan-dotropin，hCG）为胎盘分泌的一种糖蛋白激素。其化学结构和生物学效应均类似LH（见第十四章）。本试验即利用其可促进睾丸间质细胞合成及释放睾酮的作用，了解睾丸间质细胞合成及贮存睾酮的功能状况。在第一日晨8点取血作对照后，开始每日肌肉注射hCg 2000IU，每日1次连续4日，分别于第4、5日晨8点再采血，测定对照及hCG刺激后血清睾酮浓度。睾丸内分泌功能正常者，第4日血清睾酮浓度为对照基础值的3倍左右，且第5日比第4日还高。因睾丸本身病变或畸形所致的原发性睾丸功能减退者，无反应或仅有弱反应，而继发性者则大多有正常反应。但本试验禁用于前列腺癌或肥大者。
⒊氯米芬间接兴奋试验 氯米芬（clomifene）又称氯底酚胺，为雌激素受体的部分激动剂，其内在活性很低，但和下丘脑GnRH分泌细胞上的雌激素受体结合后，可阻断雌激素（雌二醇等）对GnRH释放的负反馈调节作用，因此可用了解调节性腺功能的下丘脑-腺垂体轴的功能状况。常与GnRH兴奋试验配合，用作性腺功能减退症的定位诊断。具体方法是育龄女性在月经周期的第6日轴血作基础对照后，开始口服氯米芬50-100mg/d，连服5日，分别在开始服药的第3、5、7日取血。男性则可随时开始。测定服药前、后各血样的血清LH和FSH浓度。下丘脑-腺垂体调节轴功能正常者，男性第7日血清LH及FSH水平应较对照基础值分别升高50％和20％以上。女性开始服用氯米芬的第3日血清LH和FSH水平应较对照基础值分别升高85%和50%以上。性腺功能低下者，若对本试验及GnRH兴奋试验均无反应或仅有弱反应。提示病变发生在垂体水平；若本试验无反应或仅有弱反应，而GnRH兴奋试验反应正常或呈延迟反应，则表明病变在下丘脑水平。
⒋雌激素-孕激素试验本试验原理是通过使用雌激素和孕激素类药物，人工造成近似于月经周期中性激素水平的变化，观察有无月经出现，协助诊断育龄期女性闭经原因。闭经者给予已烯雌酚1mg，每晚1次口服，连服20日，并于开始服用已烯雌酚的第16日起，每日肌注黄体酮1mg1次，连续5日，随后同时停用雌、孕激素药、观察1周内有无月经。有月经，提示闭经是子宫以外的病变所致；无月经，则表明闭经原因是子宫内膜病变，如子宫内膜萎缩等。
