胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3，需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH测定计的探头，因此，一般用精密的pH试纸测定其pH即可。
几种常用的蛋白质标记时胶体金所用的pH值见表5-4。
表5-4 常用几种蛋白质标记时胶体金所用的pH值如下
| 蛋白质 | pH |
| 抗体（γ球蛋白） | 9.0 |
| 亲合层析的IgG | 7.6 |
| 单克隆抗体 | 8.2 |
| F（ab＇）2 | 7.2 |
| SPA(葡萄球菌蛋白) | 6.0 |
| 蓖麻子植物凝血素Ⅰ | 8.0 |
| 蓖麻子植物凝血素Ⅱ | 8.0 |
| 花生凝集素 | 6.3 |
| Helix pomatia lectin | 7.4 |
| 大豆凝集素 | 6.1 |
| Lens Culinaris lectin | 6.9 |
| Lotus Tetragonolobus lectin | 6.3 |
| 荆豆凝集素 | 6.3 |
| Bandeirae simplicifolia lectin | 6.2 |
| 过氧化物酶 | 8.0 |
| 类卵粘蛋白 | 4.8 |
| 血浆铜兰蛋白 | 7.0 |
| α-胎球蛋白 | 6.5 |
| 小牛血清白蛋白 | 6.5 |
| 牛血清白蛋白 | 5.5 |
| 牛血球白蛋白结合肽 | 4.5 |
| 牛血清白蛋白结合胰岛素 | 5.3 |
| 霍乱毒素 | 6.9 |
| 破伤风毒素 | 6.9 |
| DNAase | 6.0 |
| RNAase | 9.0 |
| 低密度脂蛋白 | 5.5 |
| α2-巨球蛋白 | 6.0 |
| 抗生物素蛋白（亲合素） | 10.0 |
| 链霉抗生物素蛋白 | 6.6 |
| 麦胚凝集素 | 9.9 |
