六、酶消化液

1．0.1%胰蛋白酶

试剂：胰蛋白酶 　0.1gm

0.1%氯化钙（pH7.8）　100ml

配制方法：先配制0.1%的CaCl2,用0.1mol/L的NaOH将其pH调至7.8，然后加入蛋白酶溶解之。用前将胰蛋白酶消化液在水浴中予热至37℃（载有标本的玻片也在TBS中予热至同样样温度）。该消化液时间约为5～30min。

2．0.4%胃蛋白酶

试剂：胃蛋白酶 　400mg

0.1N HCl 100ml

配制方法：同胰蛋白酶。消化时间在37℃约为30min。

3．0.06% Pronase

试剂：Pronase　0.06g

0.05mol/L TB(pH7.5) 　100ml

配制方法：同前。

在免疫细胞化学染色中，有时经Formalin过度固定的标本，常会产生过量的醛基，遮盖抗原，影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化，可起到暴露抗原部分的作用。消化时间应根据不同组织而异，总之，在保持组织形态不被破坏的前提下，宜尽量延长消化时间。以上三种酶消化液中，以第一种最为常用。