(一)石蜡切片的IGSS染色

以人肝细胞内HBsAg定位举例说明。

(1)切片常规脱蜡至水。

(2)Lugol's液,5min.

(3)5%硫代硫酸钠水溶液脱碘5min。

(4)用双蒸馏水冲洗干净。

(5)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5min两次。

(6)用0.1%胰蛋白酶消化10min或用3mol/L尿素消化20min。

(7)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5min一次。

(8)1%卵白蛋白封闭15min。

(9)马抗HBsAg抗体1:1000稀释,371~2h 或4℃过夜。

(10)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5min两次。

(11)1%卵白蛋白封闭10min。

(12)1:40,PAG,37℃45min。

(13)0.05mol/l pH7.4 TBS洗5min两次。

(14)双蒸水洗5min,两次。

(15)物理显影见后所述。

(16)双蒸水洗5min,两次。

(17)苏木素衬染。

(18)酒精常规脱水,透明,封固。

结果,光镜下见肝细胞胞浆内有膜或包涵体形分布的阳性黑色状颗粒,背景干净。