一、亮度法

1.原理

血清中游离脂肪酸经抽提到高密度铜试剂中,形成铜皂在上层溶剂中,再用二苯卡巴肼与铜显色,进行定量。

2.试剂组成

代号 种类 浓度 组成 贮存2~8℃ 有效期
R-1 抽提剂 氯仿:庚烷:甲醇=5:5:1(V/V)
R-2 缓冲液 33mmol/L KH2PO44.539g/L 100ml+Na2HPO4·2H2O5.983g/l 50ml调pH至6.4
R-3 铜贮液 500mmol/L Cu(NO32·3H2o 12.07g加H2O→100ml
R-4 三乙醇胺 1.0mol/L 三乙醇胺10ml,加水→100ml
R-5 NaOH液 1mol/L
R-6 铜试剂 R-3 10ml+R-4 10ml+R-6 6ml
+H2O→100ml调pH至8.1
R-7 二苯卡
巴肼液
二苯卡巴肼(乙醇)液(4g/L)10ml+R-4 0.1ml 临用前配制
R-8 软脂酸标准贮存液 2mmol/L 软脂酸51.2mg溶于100ml R-1液 冷藏
R-9 R-8的应用液 500μmol/L 用R-1液稀释 冷藏

3.操作

按图15-7操作。

4.计算

血清游离脂肪酸(μmol/L)=ESA/EST×500