《中国幽门螺杆菌研究》(全本)

总论篇

1．幽门螺杆菌研究进展

幽门螺杆菌及其感染

1 概述

胃细菌学的研究，长期来是一个被忽视的领域。1983年Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者胃粘膜活检标本中分离到幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）是对这一领域重要的突破。此后不久即在国际消化病学界引起了巨大轰动，它的发现对消化病学、特别是胃十二指肠病学的发展起了极大的推动作用。现在已经清楚它是许多慢性胃病（慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等）发生发展中一个重要致病因子。

1.1 Hp的历史、发现和命名

1.1.1 历史背景

Marshall在分离到Hp后又回过来探索了历史上的文献，发现这一类细菌实际上早就已经被人注意过。1893年在狗中，1896年在大鼠和猫中已有人报告在其胃中偶然见到螺形菌。本世纪初在溃疡性胃癌病人胃内容物中曾找到同样的细菌。其他报告也证实了这一些发现。也注意到健康人中未发现这些细菌。经过30年的努力，在散载的报告中，良性消化性溃疡病人胃中发现了这些细菌。1938年Doenges在一份综合性尸解研究报告中提出胃中螺形菌的流行率达43％，但是并未检查出这一细菌与不同的胃部疾病之间的关系。

关于这些细菌在人胃疾病中可能的作用一直存在着争论。有些研究者提出人们在活检标本中所见到的这种细菌是经口吞服的污染物。这一假说1959年由于当时的一位有影响的学者palmer发表了1000例胃活检标本大量组织学研究的报告而占了优势。在此以后对胃的细菌学的兴趣被泼了一盆冷水。

1975年Steer和Colin-Jones报告了胃溃疡病人中胃粘液层下的胃粘膜上发现了细菌，重新引起了人们对胃细菌在消化性溃疡致病机制中作用的兴趣，这提示细菌可能降低胃粘膜的抵抗力，因此易感于溃疡。Steer等企图分离这一细菌。结果生长的是绿脓杆菌。后来仔细审阅文章中的图片提示在粘膜中所见的是一种与绿脓杆菌无关的螺形菌。现在看来这些作者分离到的绿脓性杆菌可能是来自内窥镜的污染菌，而图片中所见的才是我们现在大家感兴趣的Hp。

现在已知Hp能产生大量尿素酶，在发现Hp之前许多学者曾证明在许多种动物胃中有内源性尿素酶活性的存在。1924年Luck和Seth最早描述了这一活性。1955年Kornber和Devies在一篇综述中下结论认为胃尿素酶主要存在于胃体部，且来源于细菌。后来在人粪中的研究还证实了这些酶与溃疡病之间的关系，甚至有人用尿素治疗某些病人取得了疗效。

随着Hp的发现，人们现在可以把这些研究放在一起得到一个清晰的认识，把胃中的Hp与尿素酶联系起来了。在这整个过程中从胃粘膜活检标本中分离Hp是一个关键因素。没有这一发现，人们对胃病的认识仍将受到限制。

1.1.2 发现和命名

在上述历史背景以及胃镜检查已大大普及、分离培养空肠弯曲菌的微需O2方法已经成熟的条件下，Marshall等敏感地意识到胃中所见的螺形菌，形态上与粪便中分离到的空肠弯曲菌相似。既然用常规的需O2和厌O2方法都不能把它分离出来，何不用分离培养空肠弯曲菌的方法试一试呢？结果因此使他们获得了成功。国内是在1985年取得成功的。最初信凭它形态上与弯曲菌属细菌相似，分离培养方法也相似，只是从胃标本中分离到的，因此称作胃弯曲菌样细菌（gastric campylobacter like organism,GCLO）。不久，由于此菌在胃窦部多见，又改称作幽门弯曲菌(campylobacter pyloridis,CP)，后来又因为这一名称不符合细菌统一的拉丁文命名原则，又改为cacpylobater pylori，简写与中文译名未变。随着对这一细菌的生物学性状研究的不断深入，发现这一细菌虽在形态和培养特性上与弯曲菌属细菌有相似之处，但也有许多特性与弯曲菌属细菌明显不同。曾有人根据Hp的16SrRNA的核苷酸序列与弯曲菌属细菌不同，而与wolinella succinogenes相近，提出应归入wolinella属。1989年Goodwin等把CP与弯曲菌属与wolinella属的代表菌种从超微结构、脂肪酸组成、呼吸醌、生长特点、酶的活性等五种表现型特征上作了系统的比较。他们认为CP既不应属于弯曲菌属，亦不归Wollinella属，应另立一个新属，称作螺杆菌属（helicobacter,H）。因之，CP应相应改称为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)。而当时已从雪貂胃中分离到的类似Hp的一种campylobacter mustelae相应改为雪貂螺杆菌（helicobactermustelae,Hm）。自从新立螺杆菌属以来，国际上已先后有人从多种动物胃肠道分离到新的菌种认为是属于螺杆菌属的，亦有人从过去已归属于弯曲菌等属的细菌中拉出某些细菌来认为应归于螺杆菌。从现有报道看，螺杆菌属的细菌已不下10余种。其中，除了Hp和Hm以外，还有一种猫螺杆菌（helicobacter felis,Hf）亦已得到较多人的认同以外，其他的尚均还在被认同之中。

1.2 Hp感染与上消化道疾病的关系

Hp感染与上消化道疾病之间的高度相关性已有大量报道，且已取得了基本一致的认识如下。

1.2.1 Hp感染与慢性胃炎

Hp与慢性浅表性胃炎之间的病因关系已充分确立。其证据如下：①事实上所有Hp阳性者都证实有胃窦炎。②若Hp感染经抗菌治疗，Hp根除后，胃炎可消退。③在一些动物模型中，接种由患者胃中分离而得到的Hp后，可复制出慢性浅表性胃炎的病损。④Marshall和Morris，分别用患者的Hp对自己作了自身感染，亦取得了同样结果。

1.2.2 Hp感染与消化性溃疡

从现有资料要确立Hp与消化性溃疡（peptic ulcer diseases,PUD），包括胃溃疡、十二指肠溃疡之间的病因关系尚有困难。部分原因是缺乏合适的动物模型，而且在Hp感染者中仅有少数人发生溃疡。然而几乎所有PUD患者都有Hp感染性胃炎。因此，在没有其他促发因素，如服用甾体类抗炎药（NSAID）或有Zollinger-Ellison综合征存在时，Hp感染与胃溃疡之间的相关性稍弱，不是NSAID诱发的胃溃疡患者中，80％有Hp感染。然而重要的是要注意到Hp感染者中的大多数人并不发生十二指肠或胃溃疡。这些事实意味着宿主的遗传性特征，菌株的变异性或其他因子在其中起着作用。Hp感染根除后，溃疡病复发率显著降低，这是Hp在PUD中起病因作用的最有力的证据。Hp根除后可预防溃疡病复发，这在胃溃疡中证据不如十二指肠溃疡那样充分。在十二指肠溃疡病例中，奇怪的是有些研究中，Hp在胃窦部部位比发生溃疡的十二指肠部位更为常见。胃窦部位的Hp为什么会引起十二指肠病变？已经提出的机理包括：Hp在十二指肠胃化的细胞上定居，胃酸或十二指肠碳酸氢盐的继发性改变，或感染菌的产物和／或宿主炎症应答反应引起的病变。

1.2.3 Hp感染与非溃疡性消化不良

Hp感染与非溃疡性消化不良(NonulcerDyspepsia，NUD)的相关性尚缺乏令人信服的证据。因此尚存在着争论。NUD患者中Hp的感染率并不高于一般人群。

1.2.4 Hp感染与胃部恶性肿瘤

Hp感染与胃腺癌：胃腺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在我国发病率仅次于肺癌。有证据显示Hp感染与胃体和胃窦腺癌相关联。然而，胃癌亦发生于一些无Hp感染证据的人。Hp感染的预防和治疗对胃癌发生的危险性的影响，证据尚不够充分。流行病学资料表明：胃癌发生率在一些Hp感染率高的人群中较高。Hp感染率和胃癌发生率都与社会经济状态呈负相关，都随着年龄增加而升高。在发达国家的连续出生列队研究中已见下降。在美国，非洲裔美国人和拉丁美洲人的发生率高于白种人。已发现，Hp感染率与胃癌死亡率之间存在着地区分布性的相关。然而，这两种病在流行病学上存在一些明显不一致的情况。例如，胃癌男人比女人高发，而Hp感染率两性间并无差别。据报道，某些人群Hp感染率高，但胃癌发生率低。这些不一致表明：除Hp感染率外其他因素在胃癌危险因素中亦很重要。在有一些但不是全部回顾性血清学研究中表明，胃癌患者的Hp感染率比对照组高。

感染与胃癌有关的最有力的证据来自三个前瞻性列队血清学研究。这些研究表明Hp感染者的胃癌发生率显著增加。在这些研究中，均未见Hp感染与贲门癌和胃食管联结处癌有关联。

Hp感染与淋巴瘤：胃的非何杰金淋巴瘤是一种罕见的病，占胃恶性肿瘤的3％。粘膜相关淋巴组织性淋巴瘤（MALT）低度克隆的新生物，被认为起源于固有膜中的淋巴样聚合（Lymphoid aggregate）。初步的流行病学资料显示，Hp感染与胃非何杰金淋巴瘤和MALT淋巴瘤都相关。

如果Hp感染与胃癌之间有任何病因关系，那么显然别的因素在胃癌的发生率中亦有重要作用。因此，目前尚不提倡出于预防胃癌的目的而作根除Hp的治疗。

2 Hp的生物学性状

2.1 Hp的形态学特征

Hp的形态学已有了充分的描述。总之，它是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌。（图1）长2.5～4.0μm，宽0.5～1.0μm。革兰染色阴性。有动力。在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。（图2）在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状。

图1 Hp的悬滴负染标本透射电镜（×48000）

图2 Hp藉鞭毛与部分菌体外膜粘附于胃粘膜上皮细胞表面扫描电镜（×16000）

电镜下，菌体的一端可伸出2～6条带鞘的鞭毛。在分裂时，两端均可见鞭毛。鞭毛长约为菌体1～1.5倍。粗约为30nm。鞭毛的顶端有时可见一球状物，实为鞘的延伸物。每一鞭毛根部均可见一个圆球状根基伸入菌体顶端细胞壁内侧。在其内侧尚有一电子密度降低区域。（图3）。鞭毛在运动中起推进器作用，在定居过程中起抛锚作用（图3）。

图3 Hp菌体末端及鞭毛根部的超微结构超薄切片透射电镜（×5000）

Hp经鞣酸处理，发现其外表面被厚达40mm的糖萼（glycoculyx）所包裹。电镜下，由于其呈细丝网状，与胃上皮细胞表面连接，因此亦有人称之为纤毛或拟菌毛。它成为Hp粘附于胃上皮细胞表面的主要物质基础（图4）。Hp定居于胃上皮细胞表面，除了鞭毛和糖萼的作用以外，在电镜下，尚可见到菌体细胞壁与胃上皮细胞细胞膜表面直接相贴的现象（图5）。这种现象的机理可能与藉糖萼粘连的机理不一样。其本质及其有何特殊意义有待研究。

图4 Hp藉拟菌毛粘附定居于胃上皮细胞表面超薄切片透射电镜（×70000）

Hp:幽门螺杆菌

Ep:胃上皮细胞

图5 Hp部分细胞壁与胃上皮细胞部分细胞膜直接相贴超薄切片透射电镜（×60000）

Hp：幽门螺杆菌

Ep：胃上皮细胞

培养物中的Hp，用悬滴法作电镜观察时，常见菌体外围有“炸面圈样”或“指突状”结构包裹。这些结构有何含义亦不清楚。

延长培养时间，典型的细菌会发生圆球样形态的变化。这可能就属于Hp的L型。它亦可在暴露于大气（含O2量较高）时发生。这种圆球体（图6）有两种类型。一种较大，电镜下可见稀疏的细胞质，细胞体积膨大。这种类型可能是一种退化型，在传代中不能再生长。另一种小圆球体，电镜下可见电子密度较高的细胞质，且有完整的细胞膜。这种类型可能比前者有较高含量的KDO和蛋白质。它已经被证明至少在30d内对物理和化学因素有一定的耐受性。且在4周～6周内在合适的培养条件下能重新生长成繁殖体。可是迄今尚未能证实这种圆球体在自然环境中的持续存在。或许这是弄清Hp感染的流行病学和某些治疗中失败的原因的关键因素。

2.2 Hp的生理学特征

2.2.1 Hp的生长和生存条件

Hp是一种专性微需O2菌。它的稳定生长需要依靠在生长的微环境中含2％～8％O2。因此，它在大气中和绝对厌O2条件下均不能生长。从临床标本中分离野生株都必需补充适量的CO2。早期认为Hp并不在代谢中利用碳水化合物获得能量，而是利用有机酸和氨基酸。但是不久前Reymolds等研制了一种合成培养基证明精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸是Hp的必需氨本酸。有一些株尚需要丙氨酸或丝氨酸。但没有葡萄糖时，Hp仍不能生长。有适量葡萄糖和丙氨酸时能大大促进其生长。这说明葡萄糖可能仍然是Hp能量和碳源的重要来源之一。Hp只含有MK－6呼吸醌，不含有所有弯曲菌属中普遍存在的甲基化MK－6呼吸醌。

许多固体培养基能用作分离培养Hp的基础培养基。例如：心脑浸液琼脂、哥伦比亚琼脂、布氏琼脂和M－H琼脂等。但必需加入适量的全血（马、羊或人）或胎牛血清作为补充物。加入适量的活性炭（0.2%）或淀粉（1％）亦有利于吸收培养基中衍化产生的毒性氧离子。Hp生长缓慢，通常需要3d～5d，甚至更长时间，才能形成针尖状小菌落,为了避免快速生长的兼性厌O2菌和霉菌等和过度生长，常需加入由万古霉素、TMP、两性霉素、多粘菌素等组合的抑菌剂。Hp在液体培养基中生长更加困难。这可能与在液体里面更难保证菌体周围稳定的微含O2量环境有关。

有人报告Hp能在33°C～40.5°C和pH6.6～8.4条件下生长。但实际应用中仍以37°C和pH7.0～7.2为最适条件。Hp对低ph 比一般细菌有较强耐受力。电镜下，甚至偶然可见Hp钻入壁细胞的分泌小管中（图7）。Clyne等认为酸对pH既有杀伤作用的一面，亦有保护作用的一面。他们把尿素酶阳性的野生株N6和尿素酶阴性的突变株分别接种在含有或没有10mmol尿素的两个pH范围从2.2到7.2的37°CPBS中,30min，然后测量CFU／ml、上清液的pH和溶液中的氨量。结果N6株在没有尿素的pH4.5～7.0的PBS中生存良好，甚至在有尿素的超始pH为3.5的溶液中亦能生存。然而野生株和突变株均不能在碱性环境中生长繁殖。存在野生株和尿素的酸性溶液的pH迅速从3.5升至8.45。尿素酶突变株在pH4.5～7.2的溶液中存活，不对尿素起反应。野生株N6暴露于氨的浓度高达80mmol仍能存活。胃的酸性环境可能对存活于尿素中的Hp有杀伤作用。但是Hp决不能存活于含有尿素的正常环境中，因为随后升高的pH的危害性远超过氨的毒性。

在血琼脂中，Hp不能在含有5％胆汁的情况下生长。但是暴露于含有5％胆汁的液体培养基中30min，只有25％的Hp被杀死。这说明Hp通过十二指肠时尚有生存的可能性。

在含有0.1 %到1.5%甲基纤维素的1％蛋白胨的粘稠深液中，有周鞭毛的大肠杆菌在20CP（厘泊），即被制止运动。而Hp在10CP比1CP游动得更快，甚至在200CP的粘稠培养基中仍能游动。这可能与Hp的螺旋形特征及鞭毛的旋转推动作用有关。由此，使Hp很容易穿透胃粘膜表面的粘液层，达到胃粘膜上皮细胞表面定居。而其他细菌很难达到这一点。

2.2.2 Hp的生化反应和酶

Hp对临床实验室中常用于鉴定细菌的大多数经典试验不起反应。但是有几种酶的反应是有特点的，特别是尿素酶，常用作Hp的生化鉴定。

尿素酶 尿素酶是Hp的一个非常重要的酶。它能使尿素分解成二氧化碳与氨。用柱层析方法测得其分子量约为625±kD，与底物有高度亲和性。它与变形杆菌属、摩根菌属、普罗威登斯菌属等许多微生物产生的尿素酶相比，在分子量大小、电泳活性、等电点和对尿素酶抑制剂的敏感性等方面都有它的独特性。Hp在固体培养基上和胃粘膜上能产生大量尿素酶，而且其酶的活性比其他微生物产生的尿素酶活性高几倍到几十倍，甚至更大。尿素酶不仅是Hp得以在胃粘膜表面定居的必要条件，可能也是Hp在胃部致病的重要因素之一。传统的测定尿素酶的方法，如Christensen尿素培养基等，均可用于测定Hp的尿素酶。由于Hp的发现和临床上对快速诊断Hp感染的需要，已由此发展出了许多种更加简便有效的或者能作非侵袭性体内诊断用的试验。

其他可用于Hp常规鉴定用的酶试验Hp的分离培养物的生化特性往往非常稳定。它们都能产生氧化酶、触酶、尿素酶、碱性磷酸酶、α－谷氨酰胺肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶。不产生其他44种酶（包括许多种氨肽酶、酯酶、糖甙酶等）。常规鉴定可参见表1。

表1Hp与相关细菌的生化特征比较

aHp=Helicobacter pylori Ws:Wollinellasuccinegenes Hf=Helicobacter Cj:Campylobacter jejuni Hm=HelicobactermustelaeNDb：未确定

2.2.3 对抗菌药物的敏感性

在体外，Hp对大多数抗菌制剂敏感。但对万古霉素和TMP高度耐药。磺吡苄头孢霉素（Cefsulodin），多粘菌素B及萘啶酸对少数菌株以外也都不起作用。这些抗菌药物可用于制备Hp的选择性培养基。许多抗菌药物在体外对Hp的高敏感性和在体内的低效或无效之间的矛盾，可能涉及许多因素。除了Hp自身发生的耐药性突变外，恐怕还受到药物在胃腔内对Hp作用的条件（胃酸作用的强度、不溶性粘液层的阻隔、不断的排空运动等）影响。Hp对常用抗菌药物的敏感性见表2。近年来由于临床上广泛应用灭滴灵、克拉霉素（Clarithromycin）等抗菌药物治疗慢性胃炎及消化性溃疡。因此，临床上对这些药物的耐药菌株已越来越多见。

表2 Hp对常用27种抗菌制剂的敏感性

aMIC:Minimal inhibitory concentration

2.2.4 粘附性

自然条件下，大量Hp仅出现在胃上皮细胞表面，细胞间隙及胃小凹中，而不出现在其他组织细胞表面（图8），说明Hp对胃上皮细胞有特殊的亲和性。后来人们也发现Hp对某些动物和人的RBC会发生聚集反应。作者还在Hp与“O”型血的血凝块的超薄切片中发现，Hp与“O”型RBC（后来证实按Lewis分型属Leb型”，及Hp与胃粘膜上皮细胞之间的关系，在高倍电镜下所见非常相似（图9）。这些特异的亲和现象很可能暗示着类似的粘附机制。1993年有人发现Hp特异地粘附于人胃粘膜上皮细胞受到人类初乳中SCIgA（一种携带高度多变的N－和O－连接的单糖链的糖蛋白）的抑制。当这种SC-IgA被墨角藻糖酶（α－L－fuco-sidase）降解后，抑制作用即降低，若用唾液酸（sialic acid）处理（曾有人报道Hp表达唾液酸特异的凝集素），并不降低其结合力。这一结果证明Hp在胃粘膜上皮细胞上的受体含有墨角藻糖(fucose)。而墨角藻糖结合的血型抗原，典型地在RBC上发现，也在人上皮细胞表面表达。Boren等为了弄清墨角藻糖酶敏感的Hp受体结构，他们比较了sc-IgA与S-IgA分子含有的不同墨角藻糖碳水化合物链的棋盘分析（Panel analysis）。最后他们证实了在人胃粘膜表面的Hp受体含有RBc Lewis分型的Leb抗原。他们还证实了Leb抗原是分泌型体质个体胃上皮细胞表面表达的最显著的血型相关抗原，而Lea 抗原是非分泌型体质个体中占相当优势的血型抗原。因此，阳性分泌型体质个体可能对Hp比较易感。胃溃疡个体的流行病学调查中也证明了Hp感染在Leb阳性的个体中较高发。

2.2.5 菌种保存

传统的冻干方法并不适宜于Hp的保存。有人曾用棉签沾取Hp的液态培养物冻干取得成功。但是目前置－70°C或置液氮中冷冻是常用保存方法。

2.3 Hp的分子生物学特征及菌株标识

2.3.1 分子生物特征

脂肪酸组成，一种细菌独特的脂肪酸组成常常与该菌的分类命名、细胞膜的生理化学特性和该菌的生物学性状有关。在早先许多学者都对Hp的脂肪酸组成作了测定。尽管测得的数值略有出入，但多数学者认为Hp经甲基化处理由气相色谱仪测得的数值表明：Hp的主要脂肪酸有十四烷酸（C14:0）、十六烷酸（C16:0）、十六碳稀酸（C16:1）、十八烷酸（C18:1）、顺式9、10亚甲基十八烷酸（C19:0cyc）,但是缺少了一羟基十四烷酸（3－OH－C14:0）。

Inamoto等深入地研究了Hp的脂质和脂肪酸。他们发现Hp的脂肪主要由胆固醇酯、三油酸甘油酯、游离脂肪酸、胆固酸、二酰化甘油和一酰化甘油等简单脂质组成。且在这些脂质中均含有11－甲氧基十七烷酸（11－OMeC17:0）和11－甲氧基十九烷酸（11－OMe C19:0）两种独特脂肪酸。与BCG的耐酸性相比，两者均有耐酸性，虽程度有所不同。他们认为Hp脂质与脂肪酸的特征可能是构成Hp亦具有耐酸性和与BCG耐酸强度不同的基础。

蛋白质组成Hp的菌体蛋白质含量通常用SDS－PAGE方法测定。用这一技术测得的结果，不同分子量的蛋白质条带很多，不同菌株看上去似乎很一致。但是用激光光密度计扫描，并用电脑分析比较，显示它们之间是存在差别的。所有的株的蛋白质条带80％是相似的，若以91％相似为阈值，可把Hp分成不同的电泳型。Hp的SDS－PAGE电泳谱中部分条带含有Hp的特异性抗原，也有一些条带含有与弯曲菌属细菌的共同抗原。由于技术条件未统一，各家报道的结果均略有上下。1990年Cover等从消化性溃疡患者活检标本中分离到的Hp，在肉汤培养物中用SDS－PAGE测到一种82kD大分子量的蛋白质。它只能在使细胞产生空斑作用的上清液中出现。另外用免疫印迹法以人血清能在产生空斑作用的上清液中识别出128kD的蛋白质条带。两者在产生空斑作用的上清液中出现的频率之间没有显著性差异。但是由于82kD蛋白质不易被人的血清识别。而对128kD蛋白质起血清学反应的抗体在消化性溃疡病人中比无消化性溃疡病的Hp感染者中更为常见。这意味着这两种大分子量蛋白质可能与Hp的致病性有关。后来人们把前者82kD蛋白质称作空泡毒素CacA，把后者128kD蛋白质称作细胞毒素相关蛋白CagA。而且经其他学者的工作发现，CagA蛋白质的分子量飘移在128－140kD之间。项兆英等人对43株Hp CagA和VacA毒力因子表达的分析揭示，能把临床分离株分成两种主要类型。Ⅰ型细菌含有CagA和VacA基因，表达CagA和VacA蛋白；Ⅱ型细菌不含CagA基因；不表达CagA和VacA蛋白。Ⅰ型和Ⅱ型细菌分别占56％和16%，而其余的为中间表型，即仅表达其中一种毒力因子。这一发现证明尽管许多细胞毒性Hp株含有CagA，但是VacA的表达可以不需要CagA的存在。

Hg的鞭毛可将其液体培养物藉着震荡脱落下来，然后再经过梯度离心等方法使其纯化。现知鞭毛蛋白中含有57kD与56kD两种鞭毛素亚单位，它们与弯曲菌属的细菌的鞭毛素具有共同的抗原决定簇。但是56kD的鞭毛素尚具有对Hp特异的氨基酸序列结构。

核酸 早期人们企图判断Hp是否与弯曲菌属同属，测试了它的DNAG＋Cmol%,结果发现其数值与弯曲菌属的数值范围（30mol～38mol%）完全重叠。因此这一方法在鉴别Hp与弯曲菌上毫无意义。后来人们根据Hp的16SrRNA才发现与弯曲菌属细菌不同。随着分子生物学的发展，人们迅速地投入了对Hp各种特殊的基因的研究。最早克隆成功的是尿素酶基因。到1995年7月EHpSG(EuropeanHelicobacter pylori Study Group)在爱尔兰召开的第八届胃十二指肠病理学与幽门螺杆菌国际会议上已介绍了不下十余种Hp不同的基因组或基因的研究工作。基中包括：趋化因子cheA和cheY、鞭毛素基因flaA和flaB、鞭毛生物合成调节基因flbA、鞭毛外鞘蛋白基因、转运系统基因nixA、热休克蛋白质基因hspA、尿素酶基因ureA、ureB、ureC、修复基因racA、空泡毒素基因VacA、细胞毒素相关基因CagA、CagC，细胞毒素第二相关基因CagII碱性磷酸酶基因组等。由此可见，对一种病原性细菌来讲，Hp基因研究所涉及领域之宽，进展速度之快是前所未有的。为了避免在这一研究领域发生混乱，大会上有一些学者呼吁为Hp的基因和基因组的统一命名制订规则。他们建议：①Hp基因同源于其他细菌中已经发现的基因，给于同样名称。例如ureA、ureB、flaA等。②完全新发现的基因，根据它们编码的蛋白质的功能或作用命名。例如：VacA。③当同源性不是太明显，新基因的功能还未完全确立，可以给予一个独特的临时性的名称。例如：CagA、CagII等。下面就研究得较多和较重要的两类基因作一介绍。

①尿素酶基因：1988年Labigne用穿梭载体（shurttle vecter）Pill500把Hp对应于尿素酶基因的DNA片段克隆出来，在大肠杆菌和空肠弯曲菌之间复制和转移获得了成功。但是它并不能在大肠杆菌中表达尿素酶活性，只有在接合于空肠弯曲菌时才能暂时地生物合成尿素酶。重组的粘尾质粒（recombinant cosmid）piLL585，具有33.2kb。它经过再克隆成8.1kb片段piLL590后才能把尿素酶的表型特征转输给空肠弯曲菌的受体株。此后，经过反复不断再克隆删除了不必要的部分后，尿素酶的基因最后定位在DNA的4.2kb区段内。用双脱氧法（dideoxy）测序，发现有四个开放读框(open reading frame)，分别编码四个预知分子量的多肽。它们分别是26000(ureA)、61600（ureB）、49200（ureC）和15000（ureD）。ureA和ureB编码的多肽与尿素酶结构的两个亚单位是相当的。它们与奇异变形杆菌尿素酶二个亚单位和刀豆尿素酶独一无二的亚单位高度同源。符合率分别是56％和55.5％。虽然ureD编码的多肽，与膜穿透蛋白质功能有关。但是对这一多肽与ureC编码的多肽均未明确其作用。从DNA序列图谱上看，表明这些多肽对把尿素酶活性转移给空肠弯曲菌受体是必需的。

②细胞毒素相关基因CagA和空泡毒素VacA：自从发现Hp高分子量抗原与消化性溃疡病有关后，引起了人们对它的基因的兴趣。Tumuru等用λZapII构建了Hp84－183的随机染色体片段文库。在大肠杆菌YLi-Blue的多个文库中用Hp感染者经过吸收的血清筛选。结果分离纯化出一个3.5kb插入片段的克隆。这一插入片段的再克隆能表达出一种Hp的重组蛋白质。它的分子量接近96kD，且能被人的血清所识别。得自Hp感染者和能识别天然的120～128kdHp抗原的血清，它们识别重组的96kD PMC3蛋白质的能力明显地大于不能识别天然的Hp抗原的血清。所有19株Hp产生的120kD～128kD抗原均能与PMC3产生斑点杂交。没有一个不产生同一抗原的得到同一结果。（P＜0.001）。因为15个产生空泡毒素的Hp临床分离株均与PMC3产生杂交。Tumuru等称这一基因为细胞毒素相关基因（cytotoxin-associated gene,CagA）。PMC3的序列分析证实有一个含859个氨基酸的开放读框，没有终端子。另外用人血清筛选λgtII文库还显示出一个能产生噬菌斑的0.6kb插入片段，其序列与PMC3下游序列吻合。为了克隆出全长度的基因，他们用0.6kb片段为探针从λZapII基因库中分离出一个含2.7kb插入片段的克隆。这一插入片段pYB2的核苷酸序列显示为785bp，与pMC3下游区域的序列恰好重叠。CagA全核苷酸序列的翻译揭示有一个产生分子量达131.517kD的1181个氨基酸组成的蛋白质的开放读框。这些结果与先前报道过的蛋白质序列没有明显的同源性。这些发现表明Hp高分子量抗原的克隆和特征可能与Hp的毒力和空泡毒素的产生有关。

至于Hp的空泡毒素，Telford根据已知Hp空泡毒素23个氨基酸组成，取其分别对应于最初和末了6个氨基酸组成的单核苷酸序列作PCR反应。并以PCR产物作探针探查Hp全菌DNA用HindIII酶切的文库，并克隆入其本质粒载体（bluescript plasmidvector），分离到含有～3kb插入片段的克隆。随后从用EcoRI酶切的文库分离出的7kb插入片段，也覆盖HindIII克隆的120bp区段。这两个片段均含有完整的基因。此基因含有唯一的较长的开放读框，能编码1296个氨基酸，分子量为139.7kD的蛋白质。由起动子，核糖体结合部位，终端子组成。最前面的33个氨基酸似乎是细菌信号肽，提示蛋白质是藉分泌决定机制（Sec-dependent mechanism）输出的。从34～56序位是与纯化的NH2－终端编序决定的23个氨基酸是一致的。然后，他们又用基因的不同区段在大肠杆菌中表达，产生了五种融合蛋白。并用免疫印迹法最后证实94kD的融合蛋白与前述的空泡推测基因相对应。

2.3.2 菌株标识

有人曾经企图对Hp进行生物学分型，但是没有获得明显的成功。尽管对蛋白质的SDS－PAGE及对全菌DNA的指纹分析会显示菌株之间的微细差异，但似乎并不实用。因为菌株与菌株之间的差异太微细、太多，难于识别。近年来在PCR反应发展的基础上出现了RAPD（Randomamplified polymorphic DNA）和RFLP（Restriction fragment length polymorphism）两种识别Hp不同种株的技术，这将为Hp的流行病学调查提供一些有效的方法。

3 Hp的致病与免疫性

Hp感染几乎总是与炎症反应同时并存。但是消化性溃疡与胃癌只在一小部分Hp感染者中发生。尽管国内外对Hp感染的致病机制已从临床资料及体外试验中作了大量资料积累。对它的致病机制也有了一些初步解释。但是仍然很少经过合适的动物模型的验证。因此它的确切致病机制现在仍然知道得不是很多。至于它的免疫性更是如此。

3.1 Hp的致病性

下面就胃十二指肠几个与Hp感染有关的主要疾病的发生学说作一些介绍。

3.1.1 胃炎的发生学说

正常情况下，胃壁有一系列完善的自我保护机制（胃酸、蛋白酶的分泌功能，不溶性与可溶性粘液层的保护作用，有规律的运动……等），能抵御经口而入的千百种微生物的侵袭。自从在胃粘膜上皮细胞表面发现了Hp以后，才认识到Hp几乎是能够突破这一天然屏障的唯一元凶。尽管也有报道另一种人胃螺菌（Gastrospirilumhominis,Gh,现又有人称之为Helicobacter heilmanii）亦能在人胃壁上定居，但其阳性检出率所占比例平均一般仅及Hp的1%以下。Goodwin 把Hp对胃粘膜屏障在破坏作用比喻作对“屋顶”的破坏给屋内造成灾难那样的后果，故称为“屋漏”学说。目前对Hp感染的研究能归入这一学说的资料最多（见表3）。主要包括①使Hp穿透粘液层在胃上皮细胞表面定居的因素；②对胃上皮细胞等起破坏作用的毒素因子；③各种炎症细胞及炎症介质；④免疫反应物质等。这些因素构成Hp感染的基本病理变化，即各种类型的急、慢性胃炎。其中近年来得到最重要关注的是空泡毒素VacA、细胞毒素相关蛋白质CagA，和尿素酶等的作用及其分子生物学研究（见前述）。

表3 Hp可能的致病因子及炎症反应

3.1.2 消化性溃疡的发生学说

Hp感染明显地增加了发生十二指肠和胃溃疡的危险性。大约1/6Hp感染者可能发生消化性溃疡病。治疗Hp感染可加速溃疡的愈合和大大降低溃疡的复发率。不用抑酸剂，单用抗Hp药物治疗，表明也能有效地治愈胃和十二指肠溃疡。Hp感染已经与一些引起溃疡病的原因找到了联系。例如：胃酸增加、十二指肠胃化生、粘膜屏障性质的改变、胃窦粘膜产生炎症代谢产物等。这些患者中的发现已在动物实验中得到初步证明。实际上消化性溃疡涉及几个复杂的相互作用的机制。如细菌的毒力因素（VacA和CagA等），宿主的反应性（例：如易感性的遗传、十二指肠上皮的胃化生、粘膜屏障和炎症的相互作用、泌酸反应、神经调节作用）和环境因素（例如饮食、获得感染的年龄）的综合作用导致溃疡的最后结果。过去临床上对溃疡的发生有一句谚语，叫“no acid,no ulcer”。现在，从现代理论来看,“no Hp,noulcer”应得到更多地强调。

3.1.3 胃癌的发生学说

胃癌是世界上肿瘤中仅次于肺癌的死亡原因。美国胃癌于1930年占肿瘤死亡原因首位。到现在已下降到较低水平（1985年为第9-10位）这一发生率的显著下降有利于研究这一疾病的致病机制.事实上，作为结果，胃癌可被认为在人类恶性病变中了解最清楚的。自从发现了Hp以后，对胃癌的发生提出了一些新的看法。

从早期描述的流行病学和临床资料研究的结合，肠型胃癌的学说早已形成。当时认为环境因素导致胃刺激，引起浅表性和萎缩性胃炎。低胃酸症，接着发生细菌过量生长，使亚硝酸盐转化成N-硝基胺（N-nitrosamines），引起组织异化，最后发生肿瘤。维生素C和β-胡萝卜素藉着它的抗硝基胺作用和抗氧化物作用会防止疾病的后期发展。这一得到广泛支持的学说是很有力的，但不能解释所有问题。自从清楚Hp感染是慢性胃炎主要原因，且在未治疗条件下几乎可以持续终生，引起了人们对胃癌形成学说的修正。从近年来对Hp感染的大量研究中提出了许多Hp致胃癌的可能机制：①细菌的代谢产物直接转化粘膜；②类同于病毒的致病机制，Hp DNA的某些片段转移入宿主细胞，引起转化；③Hp引起炎症反应，其本身具有基因毒性作用。在这些机制中，后者似乎与最广泛的资料是一致的。

体外和体内实验中，均见Hp引起细胞增殖。有人提出这是淋巴因子中的上皮细胞生长因子引起的。另一些人把它与尿素酶产生的氨联系起来。炎症细胞的增加对上皮细胞的增殖会增进危险性。中性粒细胞产生O2、H2O2、HOCL和氯胺等都能引起DNA键断裂，损害碱基对，和姊妹染色单体交换（sister chromatidexchanges）。突变原性的反应性O2产物的过量产生也已被Hp感染人类粘膜组织的化学发光（chemiluminesence）所证实，由此，Hp感染不仅引起有丝分裂，还提供了内源性突变原的来源。

Hp感染引起的细胞增殖，藉着①复制错误，②内源性炎症相关突变原，③饮食中外源性突变原三种机制增加对DNA损坏的危险性。大多数损坏的DNA能被机体正常的保护机制所修复。但是检查和修复的能力并不是总是那样的完美无缺的。上皮细胞中引起的有些DAN损坏可保留很长时间。感染期越长，不适当的修复可能性越大。最后转化成恶性。人们感染Hp在年青时期，他们产生明显的炎症反应，会增加肿瘤的危险性。假若这些人包含中会有较高的外源性致癌原和较低的抗氧化剂，它们的危险性会互加起来。虽然有些个体中感染或饮食已能单独解释肿瘤的成因，但两者的互加更能显示它们之间的协同作用。

3.2 Hp的免疫性

3.2.1 对Hp的体液免疫反应

通常对大多数Hp感染体液免疫反应的研究只是用在诊断上。Doig等用单克隆抗体的方法描述了Hp表面暴露抗原蛋白质的性质。他们鉴定的暴露表面的抗原包括有分子量分别为80、60、51、50、48、和31kD的各种外膜蛋白质。LPS的核心区域和鞭毛外鞘也被识别为Hp抗原。50、48和31kD的是不同株所共有的，而其余的为株特异性抗原。这些抗原成分和在感染病人血清中相应的抗体可能是有用的致病性和诊断的标记。用免疫印迹法，不同感染病人血清中并不能测得同样的抗原组成。这提示病人对这些抗原的抗体反应的个体差异。而且这提出了一个问题：这种抗体反应异质性的意义是什么？

Krenning等研究了IgG、IgA和Hp定居密度及胃炎严重程度的关系，他们认为IgG反应的强度与Hp定居的密度及胃炎的严重程度相关。但是IgA反应与胃窦炎强度有关，而不与胃窦部Hp定居密度和活性程度有关。IgA水平也与胃体部Hp定居密度和胃炎强度有关。

3.2.2 对Hp感染的细胞和炎症局部反应

在体外受到Hp抗原刺激后，来自Hp阳性病人外周血或胃粘膜固有层的T淋巴细胞的增殖和α-干扰素的产生比Hp阴性病人均有所下降。在Hp阳性病人胃粘膜固有层中某些淋巴细胞亚群（CD8和CD22）比Hp阴性病人中有所增加。这表明活跃的T淋巴细胞受到Hp抗原抑制，且可以部分解释免疫反应为什么对根除Hp无能。

Takemura等为了确定Hp水浸出液激活的中性粒细胞是否会破坏内皮细胞单层，并涉及这一过程的机制。他们把人类中性粒细胞与加入或没有加入Hp浸出液的人类脐带静脉内皮细胞（HUVECs）单层一起培养。结果Hp浸出液激活的人类中性粒细胞使内皮细胞从HUVECs单层上脱落下来。其严重程度取决于暴露的时间，但是内皮细胞的脱落可以藉直接抗中性粒细胞上的CD11/CD18单克隆抗体或抗内皮细胞上的细胞粘附因子1单克隆抗体防止。HUVEC单层的互解也可以藉超氧化物歧化酶、触酶和抗弹性硬蛋白酶（elastase）的单克隆抗体防止。进一步的研究表明Hp的浸出液是能抑制人的中性粒细胞弹性蛋白酶的。抗弹性使蛋白酶的作用不因氧化剂减弱。这些研究表明Hp浸出液激活的人类中性粒细胞能破坏HUVEC单层只有在人中性粒细胞能破坏HUVECs时，由此，对体内观察到的由Hp浸出液引起的中性粒细胞依赖的血管蛋白质泄漏提供了一个解释。Hp释放的多种抗蛋白质酶的可能性，可以部分地解释为什么这一细菌的毒力是如此的强。

4 Hp感染的诊断、治疗和流行病学

4.1 Hp感染的诊断

自1983年通过胃镜取活检标本分离培养成功以来，对Hp感染的诊断已发展出了许多方法，包括有细菌学、病理学、血清学、同位素示踪、分子生物学等许多方法。但总的讲来，从标本采集角度看，可以分为侵袭性和非侵袭性两大类。

4.1.1 Hp感染的诊断

侵袭性方法主要指必需通过胃镜取活检标本检查的方法。它是目前消化病学科的常规方法。它包括细菌的分离培养和直接涂片、快速尿素酶试验，药敏试验。病理学的组织切片检查，电镜检查及分子生物学的PCR，RAPD，RFLP等。其中分离培养+直接涂片镜检或分离培养+病理切征检查被国际上分认为判断其他各种方法准确性可靠性的依据，即所谓“金标准”。可是Hp是一种微需O₂菌，分离培养较困难。需要有一定的技术设备条件，因此在许多医院，甚至在较大的医院，亦未能普遍开展此项工作。现在看来，分离培养条件掌握得好，若能在胃壁不同病灶部位（因Hp感染灶在胃壁上分布不匀）取两块活检标本作分离培养，Hp的阳性检出率几乎可以达到90%以上，甚至接近100%。目前临床普遍采用的还是病理组织切片和快速尿素酶两种方法。病理切片HE染色特异性较差，Warthin-Starry镀银染色法较好。快速尿素酶试验由于市场上有药盒供应，有的自己配制，使用很方便。但是由于产品质量标准不统一，结果出入很大，因此在临床应用上造成了一些混乱。

PRC从理论上讲，本来是一种很敏感的、特异性亦较好的方法。但是必须具有合适的引物，良好的设备，严格的实验条件才能成功地进行。因此目前在临床上仅用于研究，尚未普遍开展。随机扩增多形性DNA（Random amplified polymorphic DNA,RAPD）及限制性片段长度多形性（Restriction fragment length polymorphism,RFLP）试验是PCR技术基础上发展起来的两种方法。它们共同特点是能区别Hp株的特异性。因此在追踪Hp的传染源或判断溃疡病的复发是由于Hp未根除还是再感染的有效工具。成熟的PCR技术除了可应用胃及口腔等部位的消化道标本的检测外，还可用于体外标本，为解决Hp的传播途径等问题作出贡献。

这一大类方法最大的缺点，或者说受到的限制是必需通过胃镜取标本。除了消毒不严密，胃镜检查本身就是一种传播Hp感染的媒介以外，胃镜检查还能造成胃病患者额外增加一些损伤与痛苦。一般来讲患者都是在迫不得已的情况下才接受这一检查的。因此更不宜在短期内重复用于抗Hp疗效的考核上。而且做胃镜的费用亦较贵，若不是为了初诊的需要，只是为了考核抗Hp疗效，普遍再去做胃镜检查，显然是不适宜的。

4.1.2非侵袭性诊断方法

国际上是指非通过胃镜取活检标本诊断Hp标本感染的方法.这类方法包括血清学和同位素踪两大类。

血清学方法 是根据Hp感染者血清中出现相应的抗体而设计的。血清中的IgM与IgA亦均能检测到，但其临床意义均不如IgG明显。因此目前最常用的是以ELISA方法测血清中的IgG，或者再加上IgA。这在市场上已有药盒供应。由于各家厂商所用的抗原种类不同。所定的标准又不统一，因此结果参差不齐。若用全菌或粗制抗原，由于与空肠弯曲菌存在共同抗原，敏感性可能较高，但特异性较差。若用第三代精制抗原（测Hp的尿素酶或外膜蛋白等）特异性较高，但敏感性可能会削弱一些。由于患者抗体一旦产生后，会持续相当长时间。因此Hp的血清学反应阳性表明此人必定感染过Hp，或者此人目前还可能在感染中。但是由于胃中Hp经治疗后已被杀灭，血清中IgG不可能一下子降下来，还可持续6～12个月，因此血清抗体测定一般不适宜用作抗Hp疗效的监测。

采取胃液用ELISA法测分泌型IgA，亦是一种可采用的血清学方法。但其实际意义未见有更大优越性，因此未获得广泛采用。最近国外还有人提出用ELISA法测唾液中IgA。若后者方法上趋于成熟，结果可靠，将是一种较有前途的方法。

同位素踪方法 这一类方法是基于Hp尿素酶能把尿素分解成CO₂和NH₃，根据用不同的同位素标记在尿素的C原子或N原子上，然后让被试者口服一定量的标记尿素，定时收集呼出的气体或排出的尿，检测其中标记CO₂和NH₃的排出率，即可准确地反映Hp在胃中的存在。由此，产生了三种不同的试验。用¹³C标记的称作¹³CO₂，呼气试验，用¹⁴C标记的¹⁴CO₂呼气试验。这两种试验方法与作用类同，只是¹³C只是稳定性同位素，检测仪器需用质谱仪，但目前已可用光谱仪检测。¹⁴C是放射性同位素，可用液体闪烁扫描仪检测。¹⁴C是一种半衰期长达5000余年的放射性同位素。对被检测者有可能造成长期的内照射损伤，是一种不宜推广应用的方法。更不宜用于孕妇及儿童，在成人中重复应用亦应极其谨慎。1992年我国学者吴继琼等人在国际上首创了用稳定性同位素¹⁵N标记的尿素作¹⁵NH₄⁺排出试验（后又改称¹⁵N排出试验）。这一种试验原理与作用与¹³CO₂呼气试验相同，无放射性损伤。所不同的是搜集的标本不同，前者搜集的是尿样，后者搜集的是呼出气体。目前国际上普遍认为¹³CO₂呼气试验是监测抗Hp疗效的最佳方法。其优点：可无损伤地及时地反映胃内的实际感染情况，敏感性特异性较高，可克服活检标本因Hp感染灶在胃壁分布不匀可能造成的假阴性结果，甚至孕妇儿童都能重复使用。尿¹⁵N排出试验与¹³CO₂呼气试验一样，目前由于涉及设备与费用总是，暂时还难于推广。

4.2 Hp感染的治疗

Hp感染现在主要靠抗Hp药物进行治疗。尽管Hp在体外对许多抗菌药物都很敏感，但是在体内用药并不那样如意。这是因为Hp主要寄生在粘液层下面，胃上皮细胞表面。注射途径用药，对它无作用，经口局部又因为胃酸环境．粘液层的屏障及胃的不断排空作用，使药效也大大地受到了限制。再加上有些药长期应用易产生严重的副作用或耐药菌株等问题。因此Hp感染引起的急慢性胃炎．消化性溃疡等疾病，本来看起来很容易治疗的问题，实际上效果并不总是很理想。何况目前缺乏合适的Hp感染的动物模型，可供帮助制订有效的治疗方案。因此目前的治疗方案几乎全凭临床经验制订，有很大的局限性（因地区、人群的差异）。总的讲来，目前不提倡用单一的抗菌药物，因为它的治愈率较低，一般＜20％，且易产生耐药性。

治疗方案的选择原则是：①采用联合用药方法；②Hp的根除率＞80%，最好在90％以上；③无明显副作用，病人耐受性好；④病人经济上可承受性。判断Hp感染的治疗效果应根据Hp的根除率，而不是清除率。根除是指治疗终止后至少在一个月后，通过细菌学、病理组织学或同位素示踪方法证实无细菌生长。

目前国内外常用的抗Hp药物有羟氨苄青霉素、甲硝唑、克拉霉素、四环素、强力霉素、呋喃唑酮、有机胶态铋剂（De-Nol等）等。溃疡病患者尚可适当结合应用质子泵抑制剂或H2受体拮抗剂加上两种抗菌素，或者质子泵抑制剂（如奥美拉唑）加上一种抗菌素。疗程一般为两个星期。由于治疗Hp感染抗菌方案的广泛应用，有可能扩大耐药性问题的产生。因此，将来替换性的治疗或预防策略，如疫苗预防或免疫治疗的研究是值得重视的。

4.3 Hp感染的流行病学

慢性胃炎患者的胃粘膜活检标本中Hp检出率可达80%～90%，而消化性溃疡患者更高，可达95%以上，甚至接近100%。胃癌由于局部上皮细胞已发生异化，因此检出率高低报道不一。在自然人群中初出生的新生儿血清中抗Hp-IgG水平却很高，接近成人水平，可能从母体获得被动免疫抗体之故。半年后迅速下降。在我国及大多数发展中国家中阳性率待降至10%～20%后又迅速回升。大约在10岁以后即迅速上升达到或接近成人阳性检出率水平。人群Hp感染率因国家因地区有所不同。低达20%，高达90%。人群中总感染率高于发达国家。这些基本资料说明了如下几个问题。①胃病患者中Hp检出率远高于人群中总的检出率，这说明Hp感染者并不都得胃病。这可能还蕴藏着与致病有关的其他因素，特别是遗传因素（宿主的易感性和菌株的型别差异等）。②人群中的Hp感染率与胃病的发生率，发展中国家高于发达国家。这又与社会经济、卫生状况有关。特别是现已证明胃癌高发区不仅与该地区人群中Hp感染率高有关外，还与人群中Hp的早发感染有关。③人类一旦感染Hp后，若不进行治疗，几乎终身处于持续感染中。因此感染率总的讲来随着年龄增长而增长。

关于传染源问题：自然人群中Hp感染率是如此之高，因此是人类Hp感染的主要传染源应该是毫无疑问的。现在的问题是除了人类以外是否还有其他的传染源。在非人的灵长类动物——某些猴类、鼬鼠、猫狗等动物的胃中，亦曾分离到Hp。因此有人认为Hp感染也是动物源性传染病。关于这一点当然不能绝对排除。但是作为传染源来讲这些动物的机会是非常少的，因为人群与这些动物直接接触的机会是不多的（当然属宠物的除外）。

按理Hp是上消化道寄生菌，再加上人群感染率是如此之高，使人们很容易想到其主要传播途径必定是粪—口途径无疑。可是直到如今活的Hp由粪便排出未找到有力的证据。几年前有一位英国学者报告成功地自粪便中分离到Hp，但是其他学者均未重复成功。近年来许多人都是用PCR来证实粪中Hp的存在，结果亦很不一致。有的说粪中阳性率很高，有的说即便在胃中已证实有Hp感染者，粪便中亦未出现阳性。因此粪便中是否有Hp的典型菌，圆球体或残留的HpDNA排出仍是一个谜。可是从有一些人的牙菌斑及龋齿中分离到Hp，为Hp的经口传播提供了一些证据。另外由于消毒不严，由胃镜引起的医源性传播亦已得到证实。上海市医务人员中Hp感染的血清学调查表明从事消化内窥镜工作的医护人员的Hp感染率明显高于其他医务人员。这也可以说是因密切接触后可能造成间接口—口传播的一个证据。

尽管Shahamate等证明Hp能在人工模拟河水的微生态环境中长期存在。并证明在实验室条件下4°C河水中能存活10d。但是迄今未有人从自然环境中分离到Hp。然而Klein等发现胃癌发病率比南美洲高4倍的非洲Lima的普鲁（Peru）族人中，用¹³CO₂呼气试验发现2～12岁儿童中Hp感染者用外源性饮用水（井水）的比用内源性饮用水（自来水）的高3倍。Hulten等进一步对Lima附近一个小镇的饮用水作了研究。他们从Lima取回冰冻水源，用抗Hp-IgG包裹的免疫磁性微球浓缩Hp。用Hp粘附素亚单位基因PCR和Hp约16s rRNa RTPCR（逆转录酶PCR）两种分子生物学手段去检测水源中有无Hp的DNA。结果24/48份标本粘附素亚单位PCR阳性，而11/48份标本两种检测方法均为阳性。因此，他们认为普鲁人饮用水中出现Hp与儿童中流行病学的高发结果是一致的。这为某些条件下可能发生Hp的水源性传播提供了证据。

5 GHLOs与Hp感染的动物模型

5.1 GHLOs

胃螺杆菌样细菌（Gastric Helicobacter likeorganisms GHLOS）是指人胃中发现的Hp以外的在某些性状上类似Hp的细菌，自从1989年Goodwin提出另立Helicobacter一属以来，先后已有许多学者报告了10余种GHLOs，至少包括有雪貂中的H.mustelae(Hm)，大鼠和小鼠中的H.muridarum，猫、狗中的H.felis(Hf),卷尾猴中的H.nemetrinae，猎豹中的H.acinonyx，狗中的H.canis和H.bizzozero，小鼠中的H.hepaticus等。另外有人把原属弯曲菌属的有些细菌，亦归入此属。例如H.cinaedi、H.fenneliae和H.heilmanii 。还有人把流产羔羊中分离到的Flexispira rappini，后来在人胃肠类病人中亦发现此菌，且其尿素酶基因与Hp相似，因此亦归入此属，称作H.rappini。这些GHLOs中一部分可能是人或动物胃中的寄生菌，另一部分可能是人或动物胃中的寄生菌，另一部分可能是人或动物胃以外下消化道中的寄生菌。因此它们的生物学性状及致病性等千差万别。除了Hm和Hf以外，目前尚缺少系统的比较资料。

5.2 Hp感染的动物模型

Hp与Hp感染的许多问题的深入解决，尚有待于找到合适的动物模型。但是要建立一个理想的Hp感染动物模型，又是很困难的事。近十年来人们作了很多努力。最早人们用各种常规实验动物作Hp感染均未成功。1987年Krakowka以GF（Germ-free）级小猪用Hp感染，最早建立了悉生（Knotobiotic）动物模型。后来又有人用SPF（Specific-pathogen-frees）级小猎兔犬建立了悉生动物模型，条件非常困难，耗费又大，一般情况下很难办到。因此有人企图用小鼠大鼠等小动物取代之。但直接用Hp感染均未成功，因此人们转而企图用GHLOs（Hf,Hm）在小鼠中建立模拟人类Hp感染的模型。1990年Lee等首先用Hf接种GF级的Swiss Webster小鼠建立了模拟的人类急慢性胃炎的动物模型。后来Karita用BalB/c裸鼠直接感染Hp获得成功。但是裸鼠是一种免疫缺陷型动物，把它用作Hp正常感染情况的研究也有很大缺陷。Fox曾建议用雪貂作动物模型。因为成年的雪貂几乎100%感染了Hm。尽管GHLOs在某些特征上类似于Hp，用它做Hp感染的动物模型能说明一些问题。但GHLOs总终是GHLOs，不能完全代替Hp。裸鼠虽能感染Hp，由于免疫缺陷，亦使其实际应用受到局限。Dubois等又建议用自然感染Hp的族群内繁殖的猴群作Hp感染模型.但这种猴群又往往同时感染有Gastrospillum hominis。总之，十余年来一直未能找到一种十分满意的Hp感染动物模型。最近，Marchetti等用Hp直接感染了CD1和BalB/c，小鼠获得了成功。看来，他们成功的经验在于，Hp原来对这些小鼠的致病力是非常弱的，由于重复通过了这些小鼠，使其致病力有所提高才得以感染。

6 展望

Hp的发现可以说对胃、十二指肠病学的发展产生了一个划时代的影响。近十余年来胃、十二指肠病因学的观念发生了根本的改变，新建立了一系列的侵袭性的和非侵袭性的涉及微生物、病理学、免疫学、生物物理学和分子生物学诊断Hp感染的方法。对急、慢性胃炎及消化性溃疡疾病的治疗改用抗Hp为主的治疗方针后，已取得了良好效果，溃疡的复发率已大大下降。在胃癌与MALT淋巴瘤的发生中也看到了Hp感染在其中起着重要作用，这为今后预防这些肿瘤指明了努力的方向。对Hp本身的生物学性状及其致病机制也已越来越清楚。这些是十余年来取得的巨大进展。然而目前也还存在着一些问题。例如：诊断中最可靠最基础的细菌分离培养工作尚未能普及。准确性较高的非侵袭性¹³CO₂呼气试验及尿¹⁵N排出试验等由于涉及设备条件，费用较贵等原因不易推广。快速尿素酶试验及血清学诊断制剂等市场上供应的药盒，种类繁多，缺少统一标准，有的甚至未经过严格鉴定即上市，给临床诊断上造成了混乱。分子生物学方法，亦因种类很多，需要有一定的技术条件，因此还在研究试用阶段，尚未成熟到能普及给临床作出准确诊断的程度。因此，诊断方法的不断改进完善，仍然是不能忽视的一面。慢性胃炎与消化性溃疡由于广泛采用了抗Hp方针为主的治疗后，不可避免地带来越来越严重的毒副作用和耐药性问题。因此，除了不断总结经验，改进治疗方案以外，探讨免疫治疗的可能性及挖掘祖国医学中的伟大宝库亦是一些值得重视的方面。Hp在自然人群中感染的面是如此之广，其涉及的疾病，除了胃癌是我国肿瘤死亡位居第二的病因外，影响广大人民身体健康及劳动生产力的程度也是极其严重的。研究一种像卡介苗一样，能有效地从婴幼儿时期开始即预防这些疾病的疫苗的研究任务已经放在我们面前。希望我们有志者能来突破这一堡垒，为人类作出贡献。当然还有一些问题。例如：Hp感染的传播途径仍需进一步搞清楚。致病机制尚需经合适的动物模型的考核。GHLOs需要好好整理一下，哪些是毫不相干的等等。当前首先一个重要的问题是我们要把Hp的有关知识尽快普及给人民群众，让每家每户都知道：胃病是因传染了Hp后引起的，目前唯一有效的简易办法是讲究卫生，防止“病从口入”，特别是做家长的从婴幼儿出生后即开始注意这一点。若能做到这一点，待有效地疫苗到来之前，我们就已可能从儿童开始减少一大批Hp感染者，大大减少各种胃病的发生率。

张振华

上海第二医科大学微生物学教研室（200025）

图6 Hp圆球体扫描电镜（×20000）

图7 Hp钻入壁细胞的分泌小管中超薄切片，透射电镜（×8000）

Hp：幽门螺杆菌

st:分泌小管

图8 Hp密集地粘附于胃上皮细胞表面超薄切片，透射电镜（×8000）

图9 Hp与Le^bRBC发生的凝集现象超薄切片透射电镜（×12000）

Hp：幽门螺杆菌

Leb：lewisb型红细胞

我国幽门螺杆菌感染研究的现状和未来

自1983年Warren和Marshall发现了幽门弯曲菌（Campylobacter pylori,Cp，1989年下半年开始国际上已改名为幽门螺杆菌， Helicobacter pylori,Hp)与慢性活动性胃炎和消化性溃疡的关系以来，迅速引起了世界范围的慢性胃病（慢性胃炎和消化性溃疡等）生物病原学的研究热潮。我国亦于1985年11月于昆明召开的全国第三次消化性疾病学术研究会以后逐步形成了全国范围的研究高潮。在此期间有一些地区或单位还曾举办过一些Hp的专题学习班。1990年5月20～22日由中华消化杂志编辑部、上海市消化疾病研究所、广州市第一军医大学南方医院联合组织在珠海召开了全国第一次Hp专题学术讨论会。此后不久，9月13～15日又由北京医科大学等单位在黄山召开了另一次全国Hp专题学术讨论会，在这两次会议上可以说基本上反映了我国在Hp研究上所取得的成绩和达到的水平。因而，现在有必要回顾我们以前的工作，以便确定我们进一步的战略目标。下面从几个方面谈谈我们一些看法，以供参考。

1 病原病理学

经过国内外大量的从慢性胃病患者胃粘膜表面检出Hp的工作，抗菌药物对慢性胃病的疗效观察及部分志愿者的自身感染实验及动物模型的建立等，Hp作为慢性胃病的一种重要病已经被国内外大多数学者所接受。人们对Hp的认识，亦从一无所知，进入到掌握了它的基本生物学性状（包括它的细胞水平、亚细胞水平和分子水平）的阶段。正由于对它们生物学性状有了比较深入地了解，因此1989年下半年Goodwin提出Cp不同于弯曲菌属的细菌，应另归一新属称Helicobacter，并得到了国际上多数学者的支持，因而得现名Hp。由此对它在胃粘膜标本中的检出已不成为太大的问题，对它在胃粘膜表面所引起的病理变化的基本规律亦已有所了解。虽然所用的具体方法不同，所得结果还有细微的差异，但这无妨于判定Hp与慢性胃炎和消化性溃疡的病因密切相关的大局。现在所需要解决的问题是：Hp究竟是怎样致病的？为什么它在人胃粘膜上的感染是那么普遍？为什么在胃粘膜上皮细胞表面几乎只有这一种细菌能实现真正的寄生？为什么各种慢性胃病在适当的抗菌疗法后，会有一个时期的好转，但又很容易复发？Hp的L型菌会不会在这中间起作用？等等。所有这一切问题靠现有的常规研究方法是难以解答的。这就需要我们联合多学科，从分子生物学和微生态学的角度来解决这些问题。例如我们仍需要花大力气来提高分离培养的阳性率，因为分离培养总还是不失为最可靠的方法、最有说服力的方法，许多更深入的研究亦需要以分离培养为基础。目前国内分离培养的阳性检出率普遍还不高，只有50%～70%，或稍高一点，这可能与培养基的成分和分离培养条件有关。当前迫切需要研制出一种特别适用于Hp生长的培养基。关于菌种保存问题，虽然冷冻干燥方法对Hp不太适宜，但深低温（-70°C以下）保存1年以上是没有问题的。这对开展深入一步的研究是非常必要的条件。除此以外，Hp究竟能产生哪些致病物质？Hp有哪些特异性的抗原？人群中的Hp有没有生物分型？它与各地区的Hp流行规律和致病性有没有关系？Hp的基因图谱如何？特别是Hp的一些有重要的特征的基因片段是怎样的？它的核苷酸序列如何？它是怎样来调控Hp的这些重要特征的？等等，这些问题的解决均将有利于Hp感染的致病机制的研究和诊断、治疗、预防方法上出现突破。在这些方面国外已有一些学者在探索，并取得了一些进展，在国内尚有待开拓。

2 诊断学

诊断学是建立在病原病理学的发展基础上，1983年Warren和Marshall用活检标本的印片染色检查和病理切片检查方法，特别是微需氧条件下的分离培养技术发现了Hp以来，世界各地已把这三种方法作为检测胃粘膜表面Hp的常规手段。各种染色方法的选用只是更便于识别而已。1984年Langenberg确认了某些人胃中存在的高强度的尿素酶是由Hp产生的以后引起了一个新的突破，由于Hp的尿素酶的产生强度远高于其他消化道中常见的尿素酶产生菌，再加上Hp往往是感染者空腹胃中的优势菌，因此一种利用检测活检标本中尿素酶以判断有无Hp存在的尿素酶快速诊断试剂盒应运而生。自从国外有了试剂盒供应后，国内各地亦争相而上，这一方法虽然简单方便，但是假若没有严格的制造工艺和使用方法，是很容易出现假阳性和假阴性反应的。因为它是靠一种非特异的酶反应来判断Hp的存在与否，再加上它的判断方法靠目测，误差比较大，因此它的实际价值有限。所有上面这些方法的最大缺点，就是要作胃镜取活检标本，不适宜人群Hp感染率的调查，另一方面它亦不易克服Hp感染局灶性分布所造成的偏差。因而，应用免疫学方法来取代是可行的。国外从1985年以后陆陆续续地出现了一些用补体结合、间接血凝、ELISA、免疫印迹等方法来检测血清中各种免疫球蛋白的报道，后来用得较多的还是应用ELISA方法检测抗Hp-IgG，最近一二年国内亦已有一些单位开展了这一方面工作，且已有试剂盒生产供应。测抗Hp-IgG虽然亦能反映一个人是否感染了Hp，但用它来监测药物疗效有困难，因为抗体一旦产生后会持续相当长一段时间，不能灵敏对反映患者经治疗后胃中的实际感染状态。为了利用免疫学的特异性诊断功能，国外已建立了一些抗Hp的单克隆抗体细胞株。国内亦有单位建立了一些抗Hp的单克隆抗体细胞株，并已成功地应用于对直接涂片中的Hp作特异性的鉴定，至于它的进一步应用正在深入研究中，由于血清抗体在Hp清除后尚可保持几个月，因此1987年后国外一些学者根据Hp的尿素酶能使胃中尿素分解成CO₂和NH₃而设计了口服¹³C和¹⁴C标记的尿素，然后测呼气中的¹³C和¹⁴C标记的CO₂的一种无创伤性试验。这类试验的优点不仅在于它是无创伤性的，还在于它能反映胃的整体感染状态，可以克服活检标本的局限性。可是这些检测方法需要贵重的质谱仪等仪器设备和费用较贵的试剂，这样也就限制了它的实际使用范围。¹³C是稳定性同位素，它需要用质谱仪测量技术条件要求较高，而且¹³C-尿素价格较昻贵。¹⁴C是放射性同位素，它的测量技术虽然在一些大医院是办得到的，¹⁴C-尿素的价格也比较低一些，但是终究是有放射性的，在实际使用上有一定禁忌。呼气试验类似的原理设计了一种国际上还没有报道过的口服稳定性同位素¹⁵N标记的尿素，然后测尿中排出的¹⁵NH₃来判断胃内Hp感染情况。所有上述的诊断方法，都各有各的优点，也各有各的或大或小的局限性，因此迄今用于Hp感染的十全十美的诊断方法还没有。相对来讲尿¹⁵NH₃排出试验有较多的优越性，只是目前广泛使用尚受到条件的限制。

3治疗学

自从Hp的发现，慢性胃病的生物学病原受到重视以来，临床上对慢性胃炎、消化性溃疡的治疗方案亦发生了重大的转向，过去常用的H₂受体拮抗剂如甲氰咪胍、雷尼替丁以及硫糖铝等，虽然缓解一些症状，但对Hp的转阴无效，治疗复发率高。然后改用某些抗菌药物，例如呋喃唑酮、羟氨苄青霉素以及三钾二枸椽酸时，Hp可有一定程度的转阴，除症状缓解、病理示炎症消退外，溃疡复发率亦明显降低，但是总的看来，治疗慢性胃病，特别是伴Hp感染的慢性胃炎，还没有一种理想的药物。已有药物大都有一定的副作用，而且Hp对它的耐药性趋势亦在增长。

4 流行病学问题

从现有的国内外资料来看，Hp在人群中的感染率非常高，发达国家的感染率要低一些，发展中国家的感染率要高得多，有人估计我国人群的感染率可达40%左右。这么高的感染率是怎么来的呢？可是直到现在可以说我们对它的传染源与传播途径仍然一无所知，近年来有些国外学者已开始对这一问题进行一些探索，国内还只有个别人用很不可靠的尿素酶快速诊断试验作一些流行因素的分析，有的正在用血清学方法作一些人群中流行病学的调查，但是这还不能解决Hp感染的传染源与传播途径问题。因为只有解决这一问题以后才能谈得上可以采取什么措施预防Hp感染的流行。从现有的血清学资料，可以肯定Hp感染是属于后天获得性感染，不是天生就有的。因此只要我们掌握了Hp的感染是可以预防的。这样也才能从根本上来减少我国和全世界慢性胃病的发生率，以普遍提高我国和全世界人群的健康水平。解决这一问题用目前的常规方法也是不行的。必须用更加现代化的分子生物学、分子遗传学、单克隆抗体等手段来检测人和其他生物标本以及环境中的Hp，并用动物模型，特别是悉生动物来证明才行。Hp与各种慢性胃病的关系从现有资料来看，Hp与慢性胃炎及消化性溃疡的关系是比较清楚的、明确的，但是与胃癌的发生亦有一定的关系，有待进一步肯定。当前在传染源与传播方式未弄清以前，按照消化道疾病“病从口入”的规律，注意改善卫生条件仍是十分重要的预防措施。

幽门螺杆菌的研究现状

1983年Warren 和Mashall从活动性慢性胃炎患者粘膜中成功地培养出幽门螺杆菌（Hp），该菌受到世界范围的注意和研究，1985年我国分离成功。本文就Hp一般特性、流行病学、相关性疾病、诊断、治疗等的研究新进展综述如下。

1 概述

幽门螺杆菌（Hp）原命名为幽门弯曲菌，该菌是一种G菌，呈弧形或S形，有1～2个微小弯曲，属微需氧菌，在pH值为6～8时繁殖最为活跃，该菌具有丰富的尿素酶，可分解食物中的尿素产生氨，产生的氨包绕细菌本身，从而与具有杀菌作用的酸性胃液隔绝，该菌生长于胃粘液深层，胃粘膜表面，多在胃窦部以胃小凹、上皮皱褶的内折及腺腔内为多，这就为其创造了微需氧环境，并免遭酸性胃液的伤害，而能繁衍。

Hp感染呈全球性分布，但不同国家和地区或不同人群的感染率差异较大。感染率与当地公共卫生状况有关。发达国家感染率为20%～40%，中国人群的感染率为21%～93%，市区为50%，郊区为68.8%，胃镜室医务人员感染率为82.4%，显著高于其他医务人员（66.4%）。Hp感染途径有口-口，粪-口途径。Hp感染有家庭聚集现象，父母Hp抗体阳性者其子女阳性率高于父母阴性者。

2Hp相关疾病

2.1 消化溃疡

溃疡中Hp阳性率高，十二指肠溃疡（GU）中，Hp感染率为80%～100%，胃溃疡（GU）患者，Hp感染率为80%左右，根据Hp可显著降低消化性溃疡的复发，十二指肠溃疡（DU）愈合后Hp持续阳性者，一年复发率58%，而阴性者仅为2.6%。因而认为Hp感染是消化性溃疡（PU）特别是DU的重要致病因素，但PU能否确认为感染性疾病，尚有较多争议，因大多数Hp感染者并无症状，大多数学者认为PU本质上是Hp相关性疾病，而胃酸、胃蛋白酶的刺激是决定溃疡发病的关键因素。Hp引起消化性溃疡的发病机制有两种学说：一是漏屋假说——Hp致病因素包括毒素、毒性酶类及致炎作用。Hp致病的主要毒素为空泡毒素，使上皮细胞空泡样变而坏死，Hp分泌的毒性酶类包括尿素酶分解尿素产生氨，氨可加重空泡样变。Hp抗原加上酶的激活，引起胃粘膜上皮产生严重免疫反应，损害胃粘膜，Hp自身激活巨噬细胞释放的IL-8及抗原抗体反应形成的免疫复合物，吸引中性粒细胞引起炎症反应，引起胃粘膜屏障的破坏，酸腐蚀并进而发生溃疡，另一种是胃泌素联系学说：胃窦部Hp感染增加了此部位的胃泌素释放，引起循环的胃泌素水平升高，引起高胃酸，致胃粘膜损害，根除Hp可使高胃泌素血症及高胃酸分泌恢复正常，提示促使胃泌素增加也是Hp致病机制的一个重要方面。

2.2 胃癌

Hp感染在胃癌发病中的作用日益受到重视，血清回顾性调查，发现Hp阳性者发生胃癌的危险是阴性者的8倍，某些发展中国家胃癌发病率高，Hp感染率也高，发达国家胃癌发病率低，Hp感染率也低，社会经济地位低下者胃癌发病率高，Hp感染率也高，Hp高流行的国家和地区，胃癌的发生率也很高。提示Hp感染与胃癌的发生有关。目前认为胃粘膜发生癌变的过程如下：正常胃粘膜→慢性活动性胃炎→慢性萎缩性胃炎→肠化生→不典型增生→癌变。Hp感染与其中每一步骤均有关联。Hp代谢所产生的多种酶类和毒素造成细胞DNA损害，继而招致一些基因抑制物减弱和癌基因表达，产生内源性突变的，通过复制错误，基因突变致癌。虽有很多间接证据提示Hp感染与胃癌的发生有密切关系，但尚缺乏有说服力的实验加以证实，Hp并非胃癌的特异病因，还有其他促进因素（环境、饮食、遗传等），且只有长期的慢性感染才会使胃癌发生的危险增加。

2.3 残胃炎

良性胃病做胃部分切除术后的残胃常发生残胃炎。吻合口炎甚至发展成残胃癌，残胃炎除与胆汁反流有关外，Hp感染也是重要的原因。Oconnor等对24例消化性溃疡术后无症状胆汁反流进行组织学研究，12例中10例病人的胃切除标本检出Hp。Hp造成的低胃酸使其它细菌繁殖和胆汁反流，使残胃更易发展成残胃癌。因此，对残胃炎的治疗，需在抗反流措施外，同时用抗Hp抗生素治疗，对预防残胃炎癌变有一定意义。

2.4 非溃疡性消化不良（NUD）

NUD时Hp的检出率是否明显增高。两者有否相关性，Hp感染与临床症状的关系尚难以确定，依据目前研究结果尚不能说根除或清除Hp可以使NUD的临床症状改善，总之，Hp与NUD的关系是一个值得深入研究的课题。

3诊断

Hp可在光镜下看到，产生高活性的尿素酶并刺激有力的免疫反应，这三者构成了Hp诊断技术的基础，可分为两类：①侵入性，包括细菌培养，病理，涂片，及快速尿素酶试验等。②非侵入性：呼吸试验及血清学检查。

3.1细菌培养

将胃粘膜研碎，立即接种于含有血和选择性抗生素的培养基上，在37°C微需氧条件下培养3d～4d，如发现有螺旋形或弯曲形革兰阴性杆菌，则需进一步有尿素酶、氧化酶和过氧化氢酶学试验的阳性结果才能确定为Hp细菌培养准确可靠，往往作为验证其它试验的“金标准”。但费时长，需要一定的条件和技术。

3.2 镜检组织中的细菌

将胃粘膜组织均匀地涂在玻片上，革兰染色或复红染色镜检，方法简便。组织切片染色以Warthin-starry银染色的效果最好，但费时，需一定技术。

3.3 活检组织尿素酶试验

最为简便、实用，多用于临床诊断，机理：Hp具有丰富的尿素酶，可分解尿素酶产生氨，使试验液变为碱性，由Hp指示剂显色，因为已有商品化的尿素酶试验药盒供应，有胃镜的单位可使用。

3.4 呼吸试验

病人口服同位素¹³C和¹⁴C标记的尿素溶液，如有Hp感染，尿素被分解后产生的同位素标记CO₂从肺呼出，可收集呼气标本，作液体闪烁计数器或用质谱仪测定同位素标记的CO₂量。本试验具有快速、可靠、安全、无痛苦的优点。国外已将其作为追踪观察治疗效果的最好方法。适用于大规模流行病学调查，它优于血清学的一个明显特征是表明目前是否有Hp感染，而不是曾否感染过。

3.5 血清学

以酶联免疫吸附试验（ELISA）的效果最好。第一代的血清学检测法使用全菌或细菌提取物质粗制抗原，有较高的假阳性率，第二代则使用较纯化的抗原如尿素酶、高分子细胞相关蛋白质、血清学检查特别适合于流行病学调查。

3.6 其它

目前聚合酶链反应（PCR）等分子生物学技术亦已用于Hp感染的诊断，使敏感性和特异性大大提高。

进行临床诊断，选择上述其中一种方法（血清学除外）即可，进行科研，至少应选择其中两种。流行病学调查，以血清学和呼吸试验较为适用。观察治疗效果，提倡做细菌培养和药敏试验，呼吸试验。Hp感染治愈标准为停药一个月以上组织学检查、尿素酶试验、细菌培养或组织涂片Gram染色共三项检查均为阴性。

4 治疗

寻求效佳、安全、价廉、疗程短的根除Hp方案是近年的热点，国外不少学者认为Hp根除率达90%以上的方案方达要求，国内外报告一致认为，单药不论哪种抗生素，Hp根除率（疗程2周～4周）均在30%以下，二联疗法如洛赛克+羟氨苄青霉素或痢特灵+铋剂等，根除率在70%～80%；三联疗法是目前疗效较好的方法，首届西太平洋Hp国际会议提出的以铋剂为中心的标准方案，包括胶体枸橼酸铋（CBS）、甲硝唑和羟氨苄青霉素（或四环素、痢特灵）经5年多来全球验证确认疗效可靠稳定。2周根除率在80%～90%，国内多中心协作研究，病例近600例，Hp根除率达88%以上，副反应显著降低，抑酸药（洛赛克、兰索拉唑、雷尼替丁），加二种抗生素（羟氨牙苄青霉素、灭滴灵、克拉霉素）三联法根除率在80%以上。国外报告，雷尼替丁胶纤铋加克拉霉素二联新方案，Hp根降率在80%以上。以药尚未在国内应用，中药治疗Hp疗效尚难满意，方剂治疗Hp根除率多在40%以下，用中药方剂再加抗生素有一定疗效，尚待进一步证实。

幽门螺杆菌研究的若干进展

Warren与Marshall 1983年成功地培养出了Hp后，世界各国学者对Hp的生物学特征、流行病学、在胃十二指肠疾病中的作用及相关的诊断、治疗问题进行了大量研究，现将有关进展简略综述如下。

1Hp的生物学及流行病学特征

Hp是一种革兰阴性弧形或S形杆菌，过去称为幽门弯曲杆菌，由于对其研究的不断深入，现改称为幽门螺杆菌。在普通伊红和苏木精染色切片中看不清楚，在Warthin-starry银染下，胃粘膜细胞的胞浆呈橙黄色，胞核呈紫色，Hp极易识别。Hp有1-2个微小弯曲，宽约0.5μm，长约2μm。电镜下，菌体光滑，有4-6根带鞘的单极或双极鞭毛。由于具有鞭毛和螺旋体型，使其钻透粘液层而靠近粘膜。Hp分布在胃粘膜上皮的细胞间沟里，附着在微绒毛上及游动在深层的碱性粘液中。胃窦部最多见，其次是胃体部，也可见于食管和肠的胃腺化生上皮中，而未见其它组织生长。

Hp的感染途径是通过密切接触方式传播。人类对Hp普遍易感，可达46.5%，随着年龄增大，Hp感染率也相应增高。不同种族，Hp的流行情况也有所不同，希腊人、阿拉伯人、意大利人、中国人、印度人和美国人中有较高的检出率，英国的撤克逊人和墨西哥人中的检出率较低。黑人患者的阳性率高于白人患者，年龄和性别间无明显差别。

2Hp在胃十二指肠疾病中的作用

许多研究表明，Hp在胃十二指肠疾病患者的胃粘膜中检出率远远高于正常者。其中最高的为十二指肠球部溃疡，为80%～100%，其次为慢性胃炎，为70%～90%，胃溃疡，57%～85%，以及残胃炎，十二指肠炎，非溃疡性消化不良症，碱性反流性胃炎等。目前已有充分的证据揭示Hp与胃腺癌有关联，药物预防高危人群可有效地降低胃腺癌的危险性。

Hp感染与胃炎的活动性和严重程度有关。感染程度愈重，炎症改变愈明显，炎症愈明显，Hp检出率愈高。Hp感染与溃疡病的关系也十分密切。特别是Hp的存在对溃疡的复发影响极大。一组Hp阳性的十二指肠球部溃疡病人分别用具有杀灭Hp的三钾二橼铬合铋和对Hp无作用的甲氰咪胍，Hp的清除率前者明显高于后者，1年后的复发率前者为40.7%，后者为78.0%，表明Hp的存在是溃疡复发的重要因素。Hp与其它上消化道疾病的关系目前虽没有完全明确，但在非溃疡性消化不良症、十二指肠炎、碱性反流性胃炎中阳性检出率常常高于正常，且症状随着使用Hp杀死剂而明显减轻，说明Hp与这些疾病的关系也是非常密切的。

3 的可能致病作用机制

3.1 机械作用

Hp位于胃粘膜上皮细胞表面，能在粘液中快速游动，对粘膜上皮产生机械刺激作用，使粘膜屏障作用减弱，以利致病因子的损害。

3.2生化作用

Hp有较强的尿素酶、过氧化氢酶及超氧化物歧化酶、蛋白水解酶。尿素酶可使胃粘膜上皮细胞产生跨膜氨递度，破坏胃粘膜的屏障作用。Hp还影响胃粘膜的疏水性，降低其抗酸作用。

3.3 免疫作用

研究最多的Hp特异性IgG抗体的产生、检测及意义。其它还有细胞毒性因子，常见的有：①血凝素又称移生因子抗原，为环绕在Hp表面的柔韧纤维结构，其本质为一种唾液糖蛋白，可粘附于上皮细胞表面，促进宿生移生。②空泡形成因子，为一种蛋白质，能引起哺乳动物的空泡变性。③Hp脂多糖中含有脂质A，与内毒素活性有关。这些因子可以导致胃粘膜上皮细胞的损害。

3.4 促胃酸分泌作用

Hp能促胃酸分泌增加，加重胃粘膜的损伤。

4Hp的诊断

4.1 组织学检查

包括直接涂片和细菌培养。前者为活体胃组织直接涂片，经Gram染色、三荣红染色或W-S银染，Giemsa染色后镜检。其中W-S银染下最易识别，此法准确性高但效率较低。

4.2 免疫学检查

Hp感染后能使宿主产生相应的IgG、IgA等抗体，随着Hp的消失，抗体效价也逐渐下降。用Elisa法可测得这种抗体，敏感性高，有较高的临床价值。近年有学者用酶联免疫吸附试验检测Hp，阳性率高；以及抗Hp尿素酶抗体的测定，也已开始用于临床。

4.3 快速检测法

也是利用Hp尿素酶的活性，用特别的含有尿素和Hp指示剂的试剂合来检测Hp的生长情况，3min即可有结果，并可半定量。

4.4¹³C标记的尿素呼吸试验

利用Hp的尿素酶能分解尿素的特点，口服¹³C标记的尿素液体后，其分解产物¹³CO₂从患者呼气中排出，用同位素比值质谱仪测得¹³CO₂/¹²CO₂的比值，由此了解Hp的生长情况。

4.5PCR技术定量检测Hp

用PCR方法测定Hp的DNA碱基序列，特异地扩增测定Hp的菌数。

5 抗Hp治疗

目前Hp在胃十二指肠疾病中的作用越来越受到重视，有关Hp感染的治疗方法、有关药物的研究非常活跃，取得了许多进展。现临床研究得较多的有抗菌素类，如痢特灵、黄连素、灭滴灵、庆大霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素、羧苄青霉素、氟呱酸，其它还有小诺霉素、四环素等。但抗菌素除了杀死Hp以外，对胃粘膜无其它作用。

近年已取得显著效果的另一类药物是胶体铋，大量的临床试验证实，疗效确切，复发率较低，优于其它疗法。该药既有杀灭Hp的作用，又有保护胃粘膜的作用，同时，还有不少资料表明，胶体铋与抗菌素或H₂受体拮抗剂联用，效果更好，从而使Hp相关性胃十二指肠疾病的痊愈率明显提高，为本类疾病的治疗开辟了一条新途径。

2．幽门螺杆菌与胃十二指肠疾病的关系研究

幽门螺杆菌与慢性胃炎及消化性溃疡

自1983年Marshall和Warren从人体胃粘膜标本中培养出幽门螺杆菌（Hp），并指出Hp与消化性溃疡（PU）及慢性胃炎高度相关以来。大量研究表明，Hp的检出率在十二指肠溃疡（DU）患者中高达95%～100%，胃溃疡（GU）中亦高达70%～90%；Hp根除后溃疡的年复发率可降到10%以下，显着低于Hp仍阳性的病人，基于上述事实，Hp在慢性胃炎及PU中无疑起着重要的致病作用。近年来已愈来愈引起医务工作者的高度重视和关注，现将有关情况作如下综述。

1Hp感染与NUD和慢性胃炎

1.1NUD诊断标准

①慢性上腹部疼痛、饱胀、烧心、反酸、嗳气、恶心及或呕吐等症状。②纤维内镜检查正常或排除了糜烂、溃疡及肿瘤等器质性病变。③实验室、B超及X线检查等排除了肝、胆胰器质性病变。④追踪2～5年，2次以上胃镜复查，未发现新的器质性病变。综上所见：非溃疡性消化不良主要是根据临床症状，内镜诊断。包括慢性胃炎，慢性十二指肠炎，但不包括糜烂、溃疡及肿瘤等器质性病变。1～3项为国际上通用标准，而第4项标准则属作者为了严格选择病例而制订的。

1.2 Hp感染与NUD及慢性胃炎相关部分慢性胃炎，特别是重度萎缩性胃炎能引起NUD的有关症状及贫血、口臭营养障碍等，已无多大疑义。但是无症状自愿者经内镜检查，亦发现慢性胃炎，老年人检出率更高，症状的严重程度并不和炎症的严重程度一致；NUD症状的周期性加剧或缓解也不和慢性胃炎的病理改变一致，因此，人们怀疑慢性胃炎是引起NUD症状的主要原因。有学者通过粘膜炎症细胞计数研究，提出炎症浸润程度与NUD症状无明显关联，而幽门螺杆菌本身则与腹胀、嗳气有关，有人认为系由于Hp产生大量尿素酶，分解胃粘膜中的尿素，产生氨和二氧化碳有关。

2Hp与消化性溃疡

2.1 Hp在消化性溃疡时检出率

消化性溃疡时Hp的检出率与正常对照者有显著差异。Hp的检出率在十二指肠球部溃疡患者中高达95%～100%。GU（胃溃疡）中亦达70%～90%；Hp根除后溃疡的年复发率可降至10%以下，显著低于Hp仍阳性的病人，基于上述事实，Hp在消化性溃疡（PU）中无疑起重要的病因作用。

2.2 Hp在PU发病中的作用

Hp在PU发病中的作用目前比较一致的观点是当无别的促发因素如服非甾体类抗炎药（NSAID）或卓—艾综合征存在时，Hp感染是几乎所有DU和绝大多数GU发生的先决条件，但也有对此观点提出疑议，例如为什么大多数Hp感染者不患PU？为何用无抗Hp作用的H₂-RA治疗溃疡能够愈合？前一问题可能是由于感染者反应的不同，Hp菌株毒力的差异或其它因子在PU的发病中起作用，对后一问题，用Goodwin提出的“漏屋顶”假设可作形象的解释。在此假设中，胃十二指肠粘膜屏障被比喻为屋顶，胃酸为雨。由于Hp感染破坏了粘膜屏障，造成“漏屋顶”，下雨（胃酸）就会使房子里面积水（溃疡形成）。不下雨（抑制胃酸），房子里面可无积水（溃疡愈合），但根本的措施是修补好屋顶（根除Hp）。

2.3 抗Hp治疗中清除率和根除率

清除率（clearance）指抗Hp一个疗程结束时的Hp阴转率，根除率（eradication）指抗Hp一个疗程结束4W后的Hp阴转率。后者才真正代表Hp被杀灭。故在进行临床观察和考核药物疗效时，应以根除率作标准。

2.4 Hp根除后与溃疡复发率的关系

Tytgat于1993年总结了32篇关于根除Hp治疗后PU复发率的报道，随访个月至4年，Hp阳性病人溃疡年复发率为58%，而Hp阴性病人年复发率为2.6%。Labenz等对190例有关溃疡复发史且已根除Hp的DU124例、GU59例、复合溃疡2例、残胃吻合口溃疡5例进行了随访，与Hp根除前相比，1年溃疡复发率从67.9%降至1.1%，2年后复发率从91.1%降至3.0%，这些病人中第一年Hp阳性率为2.6%，第二年为1.2%，而第三、四年则未见重复感染者，进一步的随访研究表明，无Hp感染者可继续保持溃疡不复发，Forbes等对Hp根除后的35例DU已随访年，92%的患者7年后Hp仍阴性，7年中Hp阴性者的DU复发率仅为3%。

2.5 与溃疡并发症的发生率

Hp的根除不仅显著地降低了消化性溃疡的复发率，亦降低了溃疡并发症的发生率，Labenz等随访66例有出血并发症病史并已抗Hp治疗的消化性溃疡（DU39例，GU25例，复合性溃疡2例）这些患者中有42例得到根除，24例未根除。在中位数为17个月的随访期中，前者溃疡复发率为2.4（1/42），无出血并发症，而后者复发率为62.5%（15/24），出血复发率为37.5%（9/24）。

2.6 根除Hp与溃疡治疗周期

研究表明：根除Hp治疗可使溃疡的治疗时间缩短1周～2周，停药4周后复查不逊于常规抗酸药物治疗，而且年复发率大为降低。

上述事实表明：根除Hp可以根本上改变PU的自然史，使大多数PU能得以彻底治愈。

3 治疗与抗生素的选用

美国国立卫生研究院（NIH），于1994年组织专家讨论，明确提出有Hp感染的溃疡病患者不管是初发还是复发，除用抗胃酸分泌药物治疗外，需用抗菌药物治疗，NIH的这一建议反映了90年代PU治疗的重大变革，大量研究表明：单一药物治疗不能取得高的根除率，需用2种或3种药物联用，疗程不宜超过2周。

3.1 两种药物联合治疗

胶态次枸橼酸铋（CBS）或次水杨酸铋（BSS）与抗生素联用，或羟氨苄青霉素与中另一种抗生素联用，不仅提高根除率，而且降低耐药菌株的出现。CBS或BSS加硝基咪唑根除率为67%，但CBS加羟氨苄青霉素疗效不佳，再林与雷尼替丁合用治疗用Hp感染所致消化性溃疡的愈合率达92%，12个月随访表明，再林与雷尼替丁合用治疗十二指肠球部溃病复发率仅8%。

3.2 三种药物联用

CBS或BSS加硝咪唑再加四环素或羟氨苄青霉素可使Hp根除率达80%～90%。第九届世界胃肠病大会专题工作组推荐了一个2周治疗方案，CBS120mg，每天4次；甲硝唑400mg，每天3次；羟氨苄青霉素500mg或四环素500mg每天4次，但副作用较大，需进一步观察，并积极探讨其它防治措施，找出一些Hp根除率更高、副作用轻微和价格便宜的新方案。

慢性胃炎及消化性溃疡的病因机理及治疗学进展

自1983年，澳大利亚两位科学家，从慢性胃炎的胃粘膜中取样，在微需氧的条件下，培养出幽门螺杆菌（Hp），并指出这种菌与慢性胃炎的直接关系以来，引起了全世界医学界人们的广泛研究证实，并在活动性慢性胃炎及消化性溃疡病灶中，查出Hp,检出率为98%和100%，此菌被分认为慢性胃炎及消化性溃疡的致病菌。

1Hp的致病机理

Hp是革兰阴性杆菌，呈螺旋形、弧形或S状，宽约0.5nm，长约2nm，有4～6条带鞘单极鞭毛，顶端呈球形膨大，借助鞭毛运动，此弯曲状的菌体，容易钻入粘液深层，菌体的外壁上有植物凝聚素样粘附蛋白，可以与粘膜上皮细胞膜上的特异碳水化合物成分结合，使此菌牢固附着于粘膜细胞微绒毛上，附着处粘膜肿胀，形成中央凹陷的浅杯状隆起，细菌数量多时，可致绒毛减少甚至消失。Hp有群集繁殖特征，紧密地粘附于胃型上皮表面，形成一个粘附基栓。Hp粘附作用具有绝对组织特异性，在十二指肠，甚至直肠上皮出现胃型上皮化生时，均可出现群集繁殖，相反在直肠上皮化生的胃区域，群集繁殖迅速中断。Hp粘附作用还有相当的宿主特异性，它只能在人、非人类灵长目动物以及猪自然群集繁殖，由于群体繁殖而增加Hp的毒力，致胃上皮表面pH值偏中性，然而有些Hp能无所顾忌地接近泌酸细胞而不受损害。环境适合时，Hp为螺旋形，不利环境变为球形，起保护自己的作用。此菌分泌多种酶，如尿素酶、过氧化氢酶、蛋白酶、脂酶等，分泌细胞毒素，使细胞受损。尿素酶在粘液——碳酸氢盐中生成氨，围绕在细菌周围形成一个碱性的微环境，称“氨云”。过量的氨在壁细胞内与H+结合形成NH4离子，可造成“壁细胞衰竭”及低酸；氨还可能与中性白细胞产生的亚氯酸结合而产生细胞毒性产物，如羟胺、氯醛胺等。另外，在胃窦内Hp产生的氨可以破坏细胞对胃酸的负反馈机制，引起餐后高胃泌素血症。过氧化氢酶可抑制中性细胞的吞噬作用。因中性细胞在吞噬泡中产生过氧化氢杀灭细菌，而过氧化氢酶却使过氧化氢分解。蛋白酶能很快地使胃粘蛋白降解，从而消弱了胃粘液的粘滞性及其阻止离子弥散的能力，破坏粘液的框架结构，使其易被溶解。有的学者观察到Hp可以破坏粘液层的三维网络结构的稳定性，从而使其失去保护作用，但当Hp根除后，这层网络结构迅速重建。脂酶、磷脂酶可能减低粘液的疏水性，而且细胞膜也可能被分解为卵磷脂和溶血卵磷脂，使细胞受损。此外，细胞培养技术发现此菌最少产生两种毒素，一种可使培养的上皮细胞发生空泡，另一种可使壁细胞分泌障碍。Hp抗原又可引起免疫反应，其可溶性细胞成分能吸引吞噬细胞向腺体和基底膜聚集，出现典型的活动性胃炎表现。这些吞噬细胞通过上皮细胞层时，向此菌产生毒性产物，在这一过程中使上皮细胞也同时受损。基底膜中含有许多单核细胞，其中有免疫功能的浆细胞产生有特异性的IgA和IgG。Hp抗原有在IgG同时存在时能使补体激活，在Hp相关性胃炎中，淋巴细胞主要是T淋巴细胞在上皮细胞上产生局部细胞毒免疫反应。这样，一个通过宿主介导的防御性的免疫机制，便可以解释Hp伴同性胃、十二指肠疾病，而无需其他的病理机制，所以学者们认为十二指肠溃疡和胃溃疡是一种病原菌，是同样发病机理的病，又称作是移位到十二指肠的胃溃疡。

2 流行病学的研究

中国预防医学科学院流研所科研人员发现，此菌在人群中感染率很高，用蛋白电泳及免疫印迹等分析方法，对国内外分离到的Hp进行比较研究，发现Hp菌株间，在蛋白成分及非蛋白成分上，均存在明显的差异，这种差异除反映在不同病人来源的Hp菌株间，也一定程度地反映了菌间的地域差异。并非所有Hp菌株均具有相同的感染和致病能力，不同致病菌株引起的临床表现亦可不同。有的学者指出Hp对胃窦及胃体下部粘膜的粘附部位具有高度的选择性，说明Hp的粘附有明显的组织学特异性。

上海消化疾病研究所，对Hp做了血清流行病学调查，城市农村对比研究，得到的结论是Hp抗体的感染率，随着年龄的上升而增加，农村各年龄组Hp感染率高于城市，农村7岁～10岁组感染率已达56.4%，市区27.4%。农村人群的平均感染率61.6%，明显高于城市人群的平均感染率（40.5%），Hp感染与症状密切相关，而与性别无关，与经济卫生状况及生活习惯有关，为粪—口传播性疾病。

肖正达医师探讨胃镜检查与Hp感染的关系，269例胃镜检查者作胃粘膜Hp检测，且同步对消毒后的胃镜、有关器械和操作者手套采样，作Hp检测，结果发现，消毒前镜端、活检钳、清洁刷、器械管道插口和操作者手套采样标本的Hp的阳性率，分别达69.51%，73.60%，81.62%，87.73%和97.72%，如消毒不彻底会引起医原源性感染，应予高度重视。

3 治疗学的探讨

抑制胃酸分泌类药物：其中有甲氰咪呱，丙谷胺、雷尼替丁、法莫替丁、奥美拉唑等药，能使溃疡暂时愈合，但是没有消灭或根除作用，而胃酸致成溃疡的理论是片面的。铋剂类药物：如得乐、德诺、胃必治等，口服疗效不佳，因为铋剂胃内形成不溶解性沉淀，难被胃肠道吸收到血液，所以药物只以杀伤病灶表面Hp和游离在胃肠腔内的病原菌，但胃肠道粘膜组织和溃疡病灶组织内的病原菌仍然存活，停药10d或数月即繁殖复发。所以单用铋剂类药物也是片面的。广大临床医师研究证实，治疗Hp必须联合用药，解放军157医院，临床研究单用庆大毒素、呋喃唑酮及甲硝唑治疗，其Hp消除率分别为56.7%，75%及25%，但根除率约20%～50%，而三种药物联合用药1个月内根除率100%，溃疡愈合率为96%，炎症活动好转或消失率为94%。华西医科大学附属第一医院，分别用羟氨苄青霉素、灭滴灵、胃必治、甲氰咪呱及安慰治疗106例胃炎Hp感染者，疗程2周，清除率分别依次为60.9%，40%，23.8%，4.6%及0%，胃炎好转率与Hp消除率完全一致，胃必治及甲氰咪呱基本无效。赵世民报告：胶态次枸椽酸钾冲剂（CBS）、西咪替丁、雷尼替丁对162例消化性溃疡伴Hp阳性的治疗及远期疗效观察，结果：CBS对Hp的转阴率为95%，显著高于甲氰咪呱23%和雷尼替丁22%，治疗近期溃疡愈合率差距不大，1年后Hp阳转率三组分别为5%、100%和90%。广州中山医科大学附属一院内科，用扫描电镜、透视电镜证实了药物在十二指肠球部溃疡治疗的作用，与上述结果大致相同，只是病例数太少。有学者在体内外Hp药物敏感实验证明，Hp对青霉素、四环素、庆大霉素、头胞噻吩、红霉素、甲硝唑、痢特灵等药均有一定敏感性，对铋盐（CBS、TDB）和羟氨苄青霉素或吡呋氨苄青霉素为最敏感。

总之，当前认为慢性胃炎、消化性溃疡的病因为Hp所致，机理是Hp能分泌多种植物凝聚素样粘附蛋白及各种酶，另外，还分泌各种细胞毒素，因此Hp具有在胃上皮高度粘附力和群集繁殖能力，所以它可无所顾忌地在胃上皮生存，破坏上皮细胞，造成炎症及溃疡，Hp有严格的组织特异性，只附着在胃形上皮细胞上。

现提倡治疗方案为抗生素加铋盐类药物，最理想药物羟氨苄青霉素加CBS或TDB，能清除Hp使病灶痊愈。

幽门螺杆菌在十二指肠溃疡中的作用

自1983年Warren和Marshall从人胃粘膜活体标本中分离出幽门螺杆菌（Hp）以来，大量研究资料表明，Hp是慢性胃炎的主要病因之一，但Hp在消化性溃疡，尤其是十二指肠溃疡的发病学中是否为不可缺少的因素，正在日益引起人们的重视。

1Hp与十二指肠溃疡发病学的关系

大量国内外资料表明，十二指肠溃疡患者Hp检出率为80%～90%。Hp能诱导炎症细胞浸润，导致胃、十二指肠球部粘膜慢性炎症和十二指肠的胃上皮化生。Hp仅感染胃上皮细胞，十二指肠胃上皮化生的形成使Hp可在十二指肠定植，且Hp感染胃窦，便可播散浸入化生的上皮。并通过局部细胞毒作用，使粘膜抵抗力下降，胃酸和胃蛋白酶侵袭脆弱的粘膜，导致糜烂性十二指肠炎，最终形成溃疡。

如果认为Hp是十二指肠溃疡病的病原菌，那么二者相互联系的特异性一定很强，但是多数Hp感染的病人并没有患十二指肠溃疡，有研究报告指出，对345例有Hp定居而无十二指肠溃疡的消化不良病人，进行了3年左右的内镜和临床随访，在此期间仅2例发生了十二指肠溃疡病，1例发生了胃溃疡病。我院内镜室1989～1995年进行上消化道内镜检查，检出Hp感染者共779例，其中仅144例（18.4%）有十二指肠溃疡。这表明十二指肠溃疡病的发病率低于一般人口中的预期数值。同时，大量的流行病学调查表明：经济发达国家的人群中，Hp感染率明显低于发展中国家，各国十二指肠发病率虽有一些差异，但并不与Hp的感染率相互平行。十二指肠溃疡患者中，男性显著多于女性，而Hp的感染率则无显著的性别差异，综上所述，Hp的感染率与十二指肠溃疡的发病率并不成正比关系。

2 十二指肠溃疡治疗药物对比

理想的溃疡病治疗应同时接受抑酸剂、粘膜保护剂、抗生素的药物。但3种药物同时应用三种不同作用机制并不一定达到理想的效果。相反经临床实践证明，单独应用抑酸作用越强的药物对溃疡病的疗效越好。H₂受体阻断剂对Hp无效，质子泵抑制剂奥美拉唑与抗菌药物合用可以提高Hp根除率，但单独使用根除Hp的效果并不明显。以上药物对Hp阴性或阳性的十二指肠溃疡病人的溃疡愈合率基本上是相同的。这说明抗胃酸分泌药并不是通过作用于Hp后才使溃疡愈合，而是由于胃酸分泌受到显著抑制作用的结果，临床研究结果表明，溃疡的愈合不受Hp的影响，抗胃酸分泌药的溃疡愈合效果优于抗菌药物组。另外用抑酸药物维持疗法可以有效地预防溃疡病的复发，此作用与Hp没有明显的关系。此结果就很难支持Hp是十二指肠溃疡的直接致病因素的论点。

总之Hp在十二指肠溃疡的发生中起着一定的作用，但是这种作用不是直接的，而是通过十二指肠上皮的胃化生为溃疡病的发生提供了病理基础，在其它致溃疡的危险因素共同作用下而发生溃疡。包括微生物因素、环境因素、遗传因素和其它因素或这些因素的综合。所以，将Hp视为多种促发十二指肠溃疡病因素中的一种可能比较符合实际，而Hp并不是发生十二指肠溃疡的不可缺少的条件。

幽门螺杆菌是一种新的胃病致病因子

人胃内弯曲样细菌早在1906年就曾有过报道。此后，一些学者相继进行了研究。直到1983年，Marshall等才在微氧条件下从人体胃粘膜活检中培养出一种弯曲类菌(Campylobacter-like organism,CLO)，现称之为幽门弯曲菌(Campylobacterpyloridis)现已称为幽门螺杆菌（Hp）认为该菌参与胃病的致病过程。现将有关Hp的研究进展综述如下。

1 Hp的检测及其生物学特性

目前业已证明，胃窦粘膜中确有一种弯曲菌的存在。组织学上，活动性慢性胃炎患者粘膜表面可查到Hp。采用Warth-Starry银染色法、HE及吉姆萨染色可进行该菌检测。最近报道利用相差显微镜、吖啶橙荧光染色，以及培养检测法均以Hp。该菌可位于酸度正常的粘膜表面。粘膜层及上皮细胞分泌的碱性物质对细菌有保护作用。胃窦弯曲菌可在粘性环境中运动，胃内肠腺化生部位查不到该菌，而在十二指胃腺化生部位则可查到。该细菌呈“S”形或螺旋状，革兰染色阴性，大小约3μm×0.5μm。电镜观察表明，Hp既可位于粘膜表面，又可存在于细胞连接处，其表面光滑，有4～6根极鞭毛，每根极鞭毛均附有鞘膜。上皮细胞间亦可有大量细菌，此时，粒液细胞完整，但呈锯齿状，并伴微绒毛脱落。在上皮细胞与细菌接触部位，杯形表面突起变浅，细胞间水肿明显。同时还可观察到多形核白细胞，细菌数量与多形核细胞多少相关。细胞吞噬液泡中可含有胃窦弯曲菌，提示细菌可进攻和激活多形核白细胞。胃腔内的炎细胞具有杀菌功能。胃窦组织培养时，少数病例中还可观察到一种弯曲棒状样菌，类弯曲菌2型（CLO-2），其生物学属性及脂肪酸含量位于弯曲菌范围内，但与胃窦弯曲菌无关。

2 Hp的生化特性及其对药物的敏感性

最初采用弯曲菌株分离出了这种Hp，近期又相继报道了一些其它分离方法。该菌为微需氧菌，最适温度为35°C～37°C。体外分离传代后，其形态学可发生改变。

Hp的生化特性，脂肪酸含量均与其它弯曲菌不同。株聚丙凝胶电泳研究表明有相似的蛋白带。该菌缺乏甲基化的6粉甲基苯醌，酚肽磷酸试验阳性，DNA碱基对在弯曲菌范围内（G+C36%）。革兰染色阴性，过氧化物酶、过氧化氢酶及尿素分解阳性，硝酸盐还原阴性，因此可把尿素分解阳性作为胃窦弯曲菌的一种特异性反应，该菌可通过直接或间接改变粘膜的pH值，从而造成胃粘膜上皮的损伤。此菌可抵抗啶酮酸，对大多数抗菌素均敏感，包括四环素、红霉素、青霉素、头孢菌素、甲硝哒唑及三钾二枸橼酸铋（TDB，De-Nol）等。而对西咪替丁、生胃酮不敏感。胃窦弯曲菌在抗生素敏感性方面与空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌谈判眲在有差异。现将不同抗生素对胃窦弯曲菌、空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌的最低抑菌浓度（MIC）、50%最低抑菌浓度（MIC50）及90%最低抑菌浓度（MIC90）比较如下：

表1 幽门、空肠、胎儿弯曲菌对各种药物的敏感性

由表1可知，除苄青霉素、粘菌素和多粘菌素B以外，大多数抗生素对该菌的MIC范围均较窄。Hp较空肠弯曲菌，胎儿弯曲菌对大多数抗生素更敏感。

3 Hp消化性疾病中的致病作用

许多报道均认为该菌与非自身免疫性胃炎关系密切，尤其与活动性慢性胃炎关系较大，如胃窦慢性炎症。认为该菌在B型，非免疫性胃炎中有着不同的致病机制。14例A型自身免疫性胃炎患者，细菌阳性者只占3例。40例消化不良患者，胃窦组织培养阳性16例（40%），该16例检查均有胃炎。消化性不良患者细菌阳性率与性别有关（男性60.9%，女性11.7%,P＜0.01），而与吸烟、饮酒无关。对于非溃疡性疾病患者，十二指肠和胃内胆汁返流可造成胃窦粘膜损坏，引起Hp机会性感染。20例无选择受检者口腔粘膜检查，Hp均为阴性。

对于十二指肠，Hp可出现在急性十二指肠炎和胃腺化生部位。一些研究确认该菌与消化性溃疡有关。70例十二指肠溃疡患者全部和40例胃溃疡中的27例，Hp阳性。现将有关疾病与Hp检测阳性率汇总如下：

吞饮Hp液10d后，病理学检查发现有Hp，细胞内粘液减少及多形核白细胞浸润增强，电镜研究表明，上皮细胞微绒毛脱落。

目前，国外学者已制备出Hp多克隆及单克隆抗体。血清补体结合试验、血凝试验和细菌凝集试验均发现细菌阳性患者抗体滴度升高。消化性溃疡患者IgG滴度高于儿童及实验室工作人员。IgA及局部免疫反应有关。IgG、IgM滴度只在细菌阳性患者中明显升高，而IgM无明显差异。细菌阳性患者同样可有局部胃窦抗体，如IgA。抗原的选择和制备对于血清学的研究有较大影响，通常以超声波处理过的细菌作为抗原较好。IgG特异性强，而IgA可发生交叉反应。免疫过氧化物酶技术研究表明，IgG、IgA、IgM均可封闭胃窦弯曲菌，而位于胃粘膜深部的细菌则可逃避宿主抗体。

表2 Hp在胃部疾病中的检出率

4 Hp与消化性溃疡的治疗

Hp作为一种新的胃部疾病的致病因子，使临床对于消化性溃疡的治疗有了进一步的认识。目前，临床使用的抗溃疡药物有西咪替丁，呋喃硝胺及三钾二枸橼酸铋（TDB，De-Nol）等。但最严重的问题就是高复发率。Hp对TDB敏感，而对西咪替丁不敏感。服用TDB后，Hp可消失，溃疡愈合，且复发率明显低于西咪替丁和呋喃硝胺。TDB具有细胞保护作用，维持胃肠道粘膜上皮的形态和功能。研究表明，TDB通过增加粘膜内源性前列腺表的合成而发挥细胞保护作用，如PGE。其它临床疗效观察也表明，TDB是一种理想的溃疡治剂。

幽门螺杆菌感染与上消化道疾病研究进展

自1983年以来，从慢性活动性胃炎病人胃粘膜活检标本中分离出幽门螺杆菌（Hp）以后，国内均做了大量的研究工作，我国1985年由张振华分离培养成功。大量研究资料表明，幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎的重要致病因素之一，在胃、十二指肠溃疡的发病中也起着重要作用，但与胃癌的关系不少学者正在探索之中，在我国大部分资料报道了经胃镜检查者的Hp感染情况。而对人群的Hp感染了解甚少，至于Hp的传染源，传播途径等问题至今仍不清楚。一些研究显示，Hp感染在慢性胃炎和消化性溃疡病者中常见。曾经发现用抗生素和化疗可消除细菌并导致粘膜正常化，然而Hp作为致病原的作用尚未证实。该菌可能是胃粘膜的一种正常栖息菌，出现某些病理变化时选择的菌群中的一部分，参与发病机制的一种加剧因子，或其本身是引起胃病的致病因子，多数学者研究胃或十二指肠内粘膜上Hp的存在量是否与内镜或组织病理学变化相关以及检查所分离到的Hp菌株的同一性。

1Hp病因学

1.1Hp细菌学

Hp为一种呈S形或弧形弯曲的革兰阴性细菌，特异地寄生于胃粘膜的粘液层下面，上皮细胞表面，目前除粘膜上皮表面及十二指肠和食道的胃上皮细胞表面以外尚未发现其它部位有这种细菌寄生。人工培养需要较丰富的培养基和微需氧的条件。此菌生长缓慢，中国预防医学科学院以血液双相培养基测了Hp的生长曲线。起始接种浓度为1.02×10²cg/ml，第4天达2.87×10⁵cg/ml。此后又开始下降，Hp感染同样能引起机体的免疫反应。胃粘膜首先呈现出对Hp的非特异性炎症反应。表现为多形核白细胞，嗜酸性粒细胞，单核细胞等由粘膜固有层向上皮内移行。菌量越多，浸润的炎细胞越多，组织病理学改变越明显，严重者尚可见多形核细胞移行到胃腔吞噬Hp的现象。在炎症反应过程中巨噬细胞释放的水解酶，溶菌酶，补体系统等可能都参与对胃粘膜上皮的破坏作用。Hp的感染亦能引起特异性免疫，大约60%B型胃炎病人空腹胃液中测到Hp特异性IgA和少量IgM。同时在胃粘膜活检标本中，粘膜表面分别被IgA、IgG或IgM包被的Hp占85%～100%。65%和61%分别被分泌小片、溶菌酶和C₃包被的占85%、57%和69%，说明Hp可刺激局部粘膜产生特异性抗体，另一方面又可通过激活补体系统引起对细菌的杀伤。增强清除细菌的作用，Hp感染越重炎症反应和胃粘膜损伤越重。血清中特异性IgG和IgA滴度越高，由于Hp定居在胃粘膜表面，可能经粪便或口腔途径传播。但是至今未有人从粪便分离到此菌。有人实验发现，Hp能在4°C河水中存活1d。因此提出水源性传播亦不能被忽视，有人曾分别从貂、猴、猪、兔等动物的胃中找到类似Hp的细菌，但它们与人胃Hp间是否属同源，除人外有否其它传染源。Hp传染途径是否由动物传播给人值得进一步研究。

1.2关于Hp感染及流行病学

Hp感染是一个世界性的问题，我国属于感染率较高的国家，河南医学科学院研究所对河南辉县的一个乡571人进行胃镜普查，Hp感染率男性为72%，女性为63%，15岁～20岁青少年组为53.6%，成年组为76%。正常胃粘膜为6.6%，慢性胃炎为93.6%。北京医科大学对山东牟平胃癌高发区347例无症状者行胃镜检查活检。Hp的检出率为73.7%，显著高于北京地区消化不良成人患者49.4%，10岁-30岁检出率为50%，30岁～50岁升至75%，50岁以后降至42%～44%，正常胃粘膜未检出Hp。北医大三院对47名无症状的11岁～14岁儿童进行检查，Hp检出率为52.5%。南方医院用间接法ELISA法检测血清中抗HpIgG抗体，70例小儿住院病人无消化道症状者Hp感染率为12.9%，≤6个月组感染率21.7%,7个月～5岁组为6.5%，6岁～13岁组为12.5%。以≤6个月组抗Hp抗体阳性率为高，推测这些婴儿的抗Hp抗体是通过胎盘从母体中获得的。为了证实这个推测，他们又同时测定了32对母亲和新生儿的HpIgC水平，两者呈明显正相关。同时对两个地区1019例自然人群进行血清流行病学调查。Hp感染率为60%，不同地区，性别、血型、职业间的Hp感染率无差异，将吸烟，饮酒，食肉，食奶制品分别为不、偶尔、经常三个频度分析。Hp感染率也无差异。Hp感染与主食种类，饮用水来源无关。但与有无胃病症状明显相关。Hp感染率在20岁～29岁年龄组为45.7%，30岁～39岁为63.6%，随且稳定在60%左右，在≥70岁为78.9%，说明我国人口Hp感染的年龄早，较国外早10a～20a，感染率随年龄增长而增高。

2Hp感染的诊断

Hp培养，胃粘膜直接涂片染色，组织切片染色，快速尿素酶试验，呼吸试验等任何一项阳性即可作出Hp感染的诊断。其中以尿素酶试验最为简便快速，结果较为可靠，提倡用经过鉴定的商品化试剂盒如CPUT药盒，有胃镜的单位即可使用。但是一定要注意操作要求，超过规定观察时间易致假阳性。进行科学研究，最好能同时使用几种检查方法，至少应选择其中两种，取长补短，提高准确性，Hp在胃内的分布是不均匀的，一般在距幽门口5cm以内的胃窦部取材，至少取3块。目前临床上甚至杂志上对Hp感染的诊断名称比较混乱，诸如Hp相关性胃炎，Hp阳性慢性胃炎，慢性胃炎伴Hp阳性等等。关于Hp的诊断目前方法很多，细菌培养也是诊断Hp感染最可靠的方法之一。但是要一定的条件和技术，扬州医学院附院介绍一种简易培养法，以焦性没食子与碳酸钠反应取得满意效果。

2.1 Hp与慢性胃炎胃溃疡的诊断

有学者最近研究发现，Hp的出现与慢性活动性胃炎之间有显著的相关关系，但不能发现与非活动性胃炎有任何显著的相关关系。Hp是慢性活动性胃炎的重要致病因素之一。在胃十二指肠溃疡的发病中也起着重要作用。与胃癌的关系不少学者正在探索之中，我国大部分资料报道了经胃镜证实Hp的感染情况。1990年8月下旬在澳大利亚悉尼召开的第九届胃肠病学大会上提出了一种新的胃炎分类法，引起了我国消化内镜医师的注意。新的分类法由两部分组成，内镜和组织学，组织学以病变部位为核心，确定三种基本诊断。①急性胃炎。②慢性胃炎，③特殊类型胃炎和活动性Hp感染性胃炎。新的分类法显著特点有三个。①把胃炎的病因或相关病原也纳入诊断，加上病变部位，组织学变化和胃镜所见，使诊断更为全面完整，例如Hp相关性全胃炎，以胃窦为主，药物相关的胃窦炎。②加入了新的研究成果Hp，认为Hp感染在胃炎发病中起着重要的作用。③胃镜检查，取病变活检，作病理检查，找到Hp即可作出Hp感染性胃窦炎。

3 关于Hp感染后胃溃疡的诊断

Hp感染可能是慢性活动性胃炎的病因，Hp感染后与慢性胃炎和消化性溃疡密切相关，并且参与了慢性胃炎和胃溃疡发病的病理过程。并且在十二指肠溃疡的发病中亦起有一定的作用，十二指肠溃疡患者中常有Hp存在，在临床试验中，用药物治疗根除Hp后溃疡复发率随之下降，然而这些发现并不能证明Hp和十二指肠溃疡发生之间的因果关系。如果能够表明在时间进程中溃疡复发的危险性与Hp的存在以及其随时间可能改变有关，则将进一步支持这种关系。有人研究通过对接受过影响Hp药物治疗的十二指肠溃疡患者，检查其前次纵向研究中重复内镜检查所采取的胃窦活检标本，作组织病理学检查，即可作出正确的诊断。综上所述关于Hp感染后的诊断大致分为三类，①直接从胃粘膜组织中检查Hp，包括细菌培养，组织涂片或切片染色镜检细菌。②用尿素酶试验或呼吸试验等方法测定胃内尿素酶的活性。③血清学检查抗Hp抗体，Hp寄居在上皮细胞表面，要采取胃粘膜标本需借助于胃镜，因此是一种侵入性检查方法，而呼吸试验和血清学检查属非侵入性方法。

4Hp感染后慢性胃炎及胃溃疡的治疗

近来一些时期研究，Hp阴性螺旋状细菌同慢性活动性胃炎、十二指肠溃疡有关，一些研究表明，感染之对原发性胃炎的特异性感染清除后胃炎严重程度得以改善，一般认为该菌在慢性活动性胃炎发病机制中的病因学作用提供了支持的依据，该菌在消化性溃疡中的病因，发病机制中之作用尚未确立，支持Hp感染是十二指肠形成之一因素的主要证据，是予以针对根除近端胃肠道Hp繁衍之治疗使十二指肠溃疡复发率降低的一系列研究，这些治疗方案涉及了一些药物。河南医科大学第二医院用纸片扩散法和琼脂稀释法，体外测定了20株Hp对15种抗菌药物敏感性，结果表明，红霉素、氨苄青霉素和青霉素G抑菌作用最强。庆大霉素、卡那霉素，呋喃唑酮，链霉素，四环素和土霉素次之。利福平对44%的菌株有中度抑菌作用。氯霉素，杆菌肽，洁霉素，磺胺嘧啶和复方新诺明对Hp均无效。其中红霉素对Hp的抑菌作用最强，高度和中度敏感者占90%和10%，其平均抑菌浓度为≤4mg/ml，氨苄青霉素次之。高度和中度敏感者占75%和25%。在临床治疗中，庆大霉素，羟氨苄青霉素，土霉素，呋喃唑酮等抗菌药物对清除胃内Hp的繁殖有肯定的效果，如北京医科大学第一医院报告，庆大霉素对Hp清除率为56.7%，消化性溃疡的愈合率为70%，有73.3%的慢性胃窦炎的症状有明显好转。他们应用黄连素，呋喃唑酮和土霉素治疗Hp阳性的十二指肠溃疡也取得了与庆大霉素相似的疗效。华山医院和南方医院都证实，呋喃唑酮和霉尼替丁在溃疡愈合方面疗效相似。但是在缓解炎症和消除Hp方面，前者明显优于后者。华西医科大学附院用羟氨苄青霉素治疗Hp阳性的消化性溃疡。4周后Hp阴转率高93.8%，溃疡愈合率为88.2%，同时用雷尼替丁加胃舒平治疗，Hp阴转率为26.9%，两种药物均无直接的杀菌作用，其机理有待进一步研究。文献报道，西米替丁治疗溃疡病愈合后一年复发率达80%，说明用呋喃唑酮对溃疡病的远期疗效大大优于西替咪丁。综上所述我们认为，Hp的成功清除可导致急性和慢性胃炎及胃溃疡的显著改善。慢性炎症的消退是相当缓慢的进程，粘膜完全愈合显然需数月之久，甚至数年，慢性胃炎及胃溃疡及其它成份中许多尚未解决的问题尚待更长时间内随访中研究。Hp对胃癌的作用尚有争论待今后进一步的研究。

幽门螺杆菌与胃十二指肠疾病

自从1983年Marshall和Warren重新发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori Hp)并指出其与慢性胃炎的关系后，引起了各国微生物、病理及内科医生的注意，进行了许多研究。现着重将近两年来与临床有关的若干进展作一介绍。

1 关于幽门螺杆菌

Hp是革兰氏阴性的螺旋菌。它生存于胃肠道粘液中，氧化酶阳性，不能代谢糖类和微量需氧，此外尚具有更多的特征：如极强的尿素酶活性和γ-谷氨酰转肽酶活性；细胞的主要脂酸为四葵酸（10：0）与顺9：10甲烯辛葵酸和极少量已葵酸（16：1）；在体内生长必须有血红素等。电镜下Hp直径约0.7nm，长6nm，无轴丝，有清晰的细胞壁，表面光滑，有4～6条位于一端的被鞘鞭毛，鞘与细胞壁的外膜联成一体。由于具有鞭毛与螺旋体型，就能“钻透”粘液层而接近胃粘膜。Hp具有极强的进氧化氢酶活性，故能抵抗胃炎和溃疡时炎症细胞释出过氧化物酶的损害。

Hp的来源仍然不明。从唾液、十二指肠液、胆汁、粪便中以及牙龈、咽部、结肠、尿道、阴道粘膜/拭子中均未能培养出该菌来。但它可在家庭成员中传播。Hp不是偶然进入胃内的机会菌或污染菌，而是致病菌，支持点如下：①Hp大量移生于胃粘膜表面，此处的上皮变薄，并有中性多形核白细胞浸润。超微结构研究发现此处的上皮与细菌之间有“台座”样结构，微绒毛变平或消失；②用抗生素除去细菌，这些损害可恢复；③Hp感染病人血清中可发现特异的抗体；④志愿受试者吞服Hp纯培养后发生了胃炎。

2 幽门螺杆菌在人体内存在的特点

就人群总的情况说，Hp检出率儿童远低于成人，随着年龄增长也逐渐增加，如1岁～11岁为0%，21岁～35岁为8%，36岁～50岁为44%，51岁～65岁为46%，66岁～93岁为56%。就个体而言，不论有无临床症状，内镜所见如何，健康对照者或有上消化道病史者，都有检出Hp的报告。而凡组织学显示有慢性炎症的胃粘膜，多可检出Hp，组织学正常的粘膜，检出Hp的机会就极少。

胃液中不易发现Hp。Hp在胃粘膜中的分布呈两种形式：一是存在于较深层的碱性粘液中；一是聚集在胃上皮细胞表层的一些特殊部位周围，如细胞间联结点，80%的Hp深入此点约2nm。Hp在粘液中有很强的运动能力，在10倍于使大肠杆菌不能活动的粘度之粘液中，仍能“钻行”无阻。

最初认为Hp只存在于胃窦部，最近发现，在其他部位的胃粘膜中，如体下部小弯、上部大弯均可检出。Hp还可出现于胃腺化生的食管上皮（Barrertt食管）和胃腺化生的十二指肠冠部上皮中，但不存在于肠腺化生上皮中。

Hp的易感因素有，男性、吸烟、不同来源的移民，而与住院或门诊、饮酒、抗炎症药物或抗酸剂的服用无关。

3 幽门螺杆菌与胃炎的关系

Hp最常见于胃窦部慢性炎症粘膜中，如前所述，胃体部与底部也有Hp存在，但此时底部粘膜的胃镜象和组织学多显正常。故认为Hp通常只是停留于此处而移生于胃窦部。

Hp的阳性率和胃炎的严重程度有关，如组织学正常的21例。无1例检出Hp；轻度胃炎4/16例、中度胃炎11/13例、重度胃炎32/33例为阳性。如胃炎伴肠腺化生时，其阳性率同正常组织。Hp的阳性率也与胃炎是否活动有关（所谓活动性炎症系指切片中有明显的中性多形核白细胞浸润），即活动性胃炎Hp检出率高，但也有不赞同此说者。Hp与慢性胃炎的密切关系，还可从以下各点得到证明。

志愿受试者吞服活的Hp后，出现上腹饱胀、呕吐粘液（无酸）等非特异症状，此时胃镜像虽正常，但原正常的胃粘膜表面和固有膜中，出现大量中性多形核白细胞浸润，上皮表面变平，微绒毛消失，细胞内粘液几乎消失。2周后活检出仍有炎症但较前减轻，有少量单核细胞聚集，由镜检查仍见Hp。并可从活检标本培养出来。

单用氨苄青霉素、磺甲硝咪唑 、灭滴灵或红霉素，或并用铋剂（De-Nol）片剂，能使胃炎消散。有报告将Hp阳性胃炎病人分成治疗组（服De-Nol，4周～8周）及对照组（服甲氰咪胍及安慰剂）治疗组Hp被清除达69%～73%（对照组为0），此组病人的组织学所见对照组显著好转（P＜0.001）。

4 幽门螺杆菌与NUD不良的关系

现在仍然不清楚，Hp胃炎是否引起消化不良。在最近治疗肥胖的一组病人中，无消化不良症状者，Hp带菌者为18%，而有消化不良症状者，73%均有Hp胃炎（P＜0.001），这可能提示Hp胃炎的发病过程为：感染Hp后先产生“胃肠炎”的症状，经过某些阶段后出现反复发作的消化不良，即非溃疡性消化不良（NUD）。NUD在临床上常见，病人常诉餐后上腹痛或烧心、腹胀、嗳气、恶心等，而钡餐及胃镜、超声等检查均为阴性。NUD病人中大约70%可能有Hp胃炎，此类病人清除Hp感染后，上腹痛或烧心显着好转，但恶心、腹胀改善不大，故仍需要更多的双盲研究和长期随访以确定消化不良是否由Hp胃炎引起。

5 幽门螺杆菌与溃疡病的关系

意见不一。有人认为Hp与溃疡病有关，如一组报告，溃疡病人中Hp阳性率为46%，对照组仅9%（P＜0.001）。胃溃疡患者Hp阳性率为50%～95%，十二指肠溃疡为63%～100%。

使用某些抗菌药物后Hp阴转，溃疡愈合率也高，此种情况支持Hp与溃疡病有关。60例十二指肠溃疡病人用甲氰脒胍或De-Nol加用甲磺硝咪唑或安慰剂，治疗8周，43例痊愈，17例未愈者中16例Hp阳性，愈合率在Hp阴性组中较高。33例（Hp阳性21例，阴性12例）随访了36个月，阳性组中13/21痊愈，但12/13（92%）复发；阴性组中11/12痊愈，仅3/11（27%）复发。说明根除Hp可预防十二指肠溃疡复发。我国以痢特灵治疗溃疡病疗效显著，而且复发率低，这很可能与根除Hp有关，值得深入研究。最新报告证实了痢特灵对Hp胃炎的疗效。

但也有人认为Hp与胃溃疡复发夫关，也不影响溃疡愈合。

前面提到，Hp聚集于细胞间联结点，由于Hp迅速水解了此处的尿素，改变了胃上皮细胞的环境，使得氢离子产生逆向弥散，结果胃腔内产生胃酸过少。粘膜发生损害形成溃疡则是自身消化结果。这一假说，解释了Hp致溃疡的主要机制。

6 幽门螺杆菌与十二指肠炎的关系

十二指肠炎临床常见，但病因不明。在胃腺化生区的活动性十二指肠炎时可发现Hp，多在胃腺化生上皮的表面，而从未在杯状细胞周围发现过，提示可能杯状细胞产生的某些物质不利于Hp的生存。组织学正常的十二指肠粘膜也极少发现Hp。

十二指肠粘膜上皮中Hp阳性者，胃窦上皮中Hp也都阳性；反之则不然，似可说明只要有胃腺化生上皮，十二指肠粘膜也可成为Hp的首先聚集处。由于十二指肠溃疡几乎均有十二指肠炎，提示其中可能存在某些联系。

7 关于诊断方法

检出Hp最可靠的细菌学方法是Warthin-Starry银染色法。此法不但Hp染得好，且易与污染菌及组织碎片鉴别。要提高检出阳性率，新西兰学者的经验是：①至少取4块活检标本，因为即便在同一部位，Hp可能呈斑块状不均匀分布；②组织学检查与微生物培养各送2块；③用加血的巧克力培养基；④涂片检查效果不好，用印片检查，阳性率可提高20%；⑤培养基平板至少应放置1周，因Hp生长缓慢。

改良的Giemsa染色法（即不用鉴别染色）快速简便，与银染色法同样可靠。经福尔马林固定、石蜡包埋的胃活检切片中的Hp，可用吖啶橙染色法来鉴定。此法操作简单，Hp好辨认，对我国Hp的研究有实用价值。

快速诊断法适应胃镜检查的需要。其基本原理是Hp具有极强的尿素酶活力，能分解尿素为氨及二氧化碳，氨可用多种方法检出。在用Christensen尿素液作基质时，如有氨释出，溶液从棕色变为粉红色。有人检查了112块活检组织，证实此法与组织培养法极为吻合，组织培养阳性的66例中，尿素酶试验60例阳性；培养阴性的46例中，尿素酶试验45例阴性；且显色速度和颜色深度与标本中的细菌数大致平行。现应用专用的尿素液，可缩短反应时间，且尿素酶活力的对数与银染色法检出Hp间直接相关，尿素酶阳性的程度又与炎症细胞浸润程度相关。澳大利亚Dalta West公司提供了一种称之为CLO test的微皿，内盛尿素琼脂及指示剂，用前预热至30°C，然后将镜检时取得的活组织块置入其中，阳性时活组织周围呈红/粉红色，阴性时原黄色不变，只需10min即可出结果。对205例胃镜检病人所作的前瞻性研究证实此法简便、准确、可靠。

最近有人报告了一种快速非侵入性Hp诊断法—¹³C尿素呼吸试验，有Hp感染者，在口服¹³C—尿素后20min，¹³CO₂即出现于呼出气体中，在100min内以恒定的比例累增；无感染者则无¹³CO₂呼出。此法安全，可重复，可用于流行病学调查及观察治疗反应，但设备条件要求高。

但是，不论采用何种方法，都可能有假阴性，其原因是多方面的。胃镜检查时可造成假阴性的原因是：咽下了利多卡因或服过二甲基硅油（去泡剂）；活检钳沾上了戉二醛（电镜检查标本之固定剂）；或所取为肠腺化生上皮。服用过铋剂、抗生素，胃内有甲氰脒胍或呋喃硝胺，也都可造成假阴性。

有关Hp感染后免疫学的研究，近两年来甚为活跃。如31例Hp培养阳性的病人，100%补体结合反应阳性，87%细菌凝集反应阳性；Hp的存在、抗体的检出与组织学证实的胃炎三者间有极密切联系。用酶联免疫法发现，Hp阳性的NUD病人血清中IgG抗体（全身免疫保卫系统中的主要抗体）、IgA抗体（浆膜粘液分泌的主要局部抗体）均明显增高，尤以前者为著。不过，这些病人抗其他弯曲菌（空肠、痰、粪、胚胎弯曲菌）的抗体滴度也升高，说明抗原有交叉反应。进一步用免疫氧化酶技术证实胃炎粘膜切片中的Hp 被IgG、IgA、和IgM所覆盖，但它们并未能清除Hp，处于胃小窝深处的Hp则不被覆盖，说明Hp在此处受到保护。

最近报告用免疫吸附（immunoblotting）发现十二指肠溃疡病人的血清对Hp有特异性免疫反应，这种特异性抗体，儿童低于实验室工作人员，后者又低于溃疡病人，三组之间并无重叠现象。Hp阳性病人接受铋剂或抗生素治疗后用被动血凝法测出的抗体滴度，随着治疗好转而下降。

19世纪末期就已发现溃疡病人胃组织中有细菌存在。从Marshall等开始的有关Hp的研究，可能将使胃炎（消化性溃疡？）的病因学和治疗学方面的研究有重大突破。我国慢性胃炎的发病率很高；我们在用痢特灵等治疗溃疡病方面已经开始了很有意义的工作，也许这些都和Hp研究有密切关系。我们可以从下述几方面着手工作：①学习有关Hp的基本知识，检查方法和研究进展；②组织起来，对过去胃镜检查的大量病例，有计划地作回顾性研究，摸清基本情况，随访不同条件的群、组的发展与转归；③摸索动物模型的问题；④开展前瞻性、双盲对照治疗研究，选择对胃炎、溃疡无作用而为Hp敏感的药物，包括中药，进行试验，观察清除Hp对炎症、溃疡的影响（包括愈合、复发等方面）；⑤采用精确分析方法，研究Hp感染后机体某些重要成分的改变与Hp致病物质；⑥利用过去胃镜普查资料，作我国Hp流行病学研究；⑦注意Hp与其他常见病（如胃癌）的关系，等等。可能将是一个十分广阔的新领域。

（本文系作者在澳大利亚悉尼大学及皇家北岸医院内科进修时完成，曾得到Piper教授的热情指导和澳中理事会的支持，谨致谢意）。

3．幽门螺杆菌与胃癌的关系和研究

幽门螺杆菌与胃癌

胃癌是严重危害人类健康的最常见的恶性肿瘤之一，在世界上的恶性肿瘤中估计占第二位。我国胃癌年死亡率为16/10万，居各类肿瘤之首。近20年来，不少学者致力于胃癌流行病学研究，发现胃癌的发生与环境因素有关。自1983年从人胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）以来，许多研究认为该菌感染作为环境因素之一，与胃癌的发生有关。虽然尚不能肯定两者有因果关系，但越来越多的资料支持Hp在胃癌的发生中起一定的作用。本文就近年来流行病学资料，从病因学研究的原则角度，对Hp与胃癌的病因学关系作一综述。

1 Hp是慢性胃炎的病因

目前对Hp的生物学性状已基本了解。Hp借助于鞭毛的动力，尿素酶产生的“氨云”的自身保护作用，逃避宿主免疫反应的能力，依靠粘附作用而定居在胃粘液层之下、上皮细胞的表面。Hp产生的尿素酶、蛋白酶、脂酶、磷脂酶和细胞毒素及在局部产生的免疫反应，可造成胃粘膜上皮细胞的损害。

人类Hp实验感染有2例成功的报道。口服从病人体内分离出的Hp菌株，1例出现急性胃炎症状，另1例出现急性胃窦炎表现，并且转为慢性，均伴有相应的组织学改变，Hp阳性。经抗菌治疗后症状好转，组织学炎症改善，Hp也转阴。对2例试验者胃内分离出的Hp菌株进行鉴定，其生化特性及药敏试验与吞服的菌株一样。提示Hp能定居在正常人胃粘膜，并引起急、慢性胃窦炎。Hp实验感染制备动物胃炎模型、已取得一些进展。感染悉生乳猪、悉生狗、无胸腺小鼠、Balb/c裸鼠已获得成功。Hp作为胃炎的致病菌，基本达到了Koch的原则。

Morris对自身感染前、中、后期的基础酸进行了观察，吞服Hp5d内胃液pH值呈酸性，第8日升至7.6，持续21d，第29天降至正常。从而提出Hp可引起低胃酸症。此后Graham等报道了1例Hp感染引起低胃酸症的病例。Pereson等对12例健康志愿者吞服Hp后出现自发性低胃酸症者，在发病时及6个月后测血清HpIgG抗体量，6个月时有9例抗体滴度明显升高，也证实Hp可以引起低胃酸。在低胃酸症者胃癌危险性增加，胃酸分泌减少，致分解硝酸盐的细菌在胃内滋生，所产生的亚硝酸盐与N-亚硝基化合物具有致粘膜癌变作用。

意大利学者采用组化和电镜技术分析了A型、B型和癌相关性慢性胃炎的分泌上皮萎缩，增生和化生病变，发现100例B型胃炎中87例见Hp附着于小凹和表面上皮，上皮细胞肿胀形成微乳头和近腔面糜烂。病变均发生于Hp阳性的病例及标本，病变程度和范围与细菌感染量有密切关系。超微结构见近腔面的胞浆空泡样变性的细胞内均可见Hp附着其腔面，严重者近腔侧粘液颗粒、胞浆丧失，腺体中度萎缩，少数明显肠化生。在早期癌旁组织中36例腺癌中29例有不典型增生，有些伴Ⅲ型肠化生，有的可见该区轻度细胞学和结构的改变。提示Hp是B型胃炎的病因。认为癌相关性胃炎、腺体萎缩及其被增生-化生上皮取代，则胃癌危险性增加。

2 Hp感染与胃癌

当人体暴露于致病因素后，可能引起致病效应，由于人体的抗病机制及内外环境各异，有的可能发病，有的不一定发病。作为对照组的个体，也不等于都不发病。但是病因暴露组的发病率应高于对照组，且应有致病的因—果相关性。

Forman等学者研究了不同国籍的胃癌患者Hp感染情况（表1）。结果表明在不同国家和不同国籍者，Hp抗体阳性率在胃癌组明显高于对照组。Tallcy进一步研究了Hp感染与胃腺癌的部位及组织学分型的关系。69例组织学证实为胃腺癌，Hp抗体阳性率在贲门部腺癌为38%，非贲门部腺癌为65%，与对照组相比，Hp感染与非贲门部腺癌的危险性相关，OR=2.67（99%CI=1.01～7.06）。在调整年龄和性别后，肠型癌阳性率相对于对照组的OR=4.57(99%CI=0.78～26.73)，而弥漫型癌者OR=2.25(99%CI=0.63～8.08)。Nomnra根据组织学分类，肠型癌与弥漫型癌之间有明显统计学差异。Parsonnet调查了非贲门部胃腺癌中的肠型癌、弥漫型癌以及胃食管结合部腺癌相对于对照组的Hp感染率，OR值分别为3.1,8.0,0.8(95%CI分别为1.5～6.6，1.0～64.00,0.31～2.1(表2)。

表1 不同国籍胃癌患者Hp感染情况

注：*OR:Odds Ratio(机会比) * *95%CI；95%可信区间

表2 Hp抗体阳性值在胃癌与对照组间的OR值

上述结果提示在不同的研究者对不同的国家和地区，不同的人群，采用病倒对照研究的方法，得出的结论基本一致，即认为Hp与胃癌的危险性相关，而且与胃癌中的非贲门性腺癌，组织学为肠型癌者有相关性。

2.1 Hp感染在胃癌发病中的先导作用

Hp感染作为胃癌的一处危险因素，提示Hp感染先于胃癌。目前的研究多为回顾性的，Hp与胃癌的相关性，有三种可能的解释：①胃癌引起Hp感染；②Hp感染引起胃癌；③Hp和胃癌间还有其他因素的作用。由于Hp也存在于正常人，不可能继发于胃癌；B型胃炎中Hp检出率为60%～80%，胃粘膜Hp的存在与慢性胃炎的活动性密切相关；抗菌治疗后Hp消失的同时伴胃粘膜组织学改善，这说明Hp是一种原发的而不是继发的侵入菌。Forman等的一组研究，血清标本取自胃癌诊断前4月～13年7个月，平均6年，HpIgG抗体阳性率相对于对照组，在取样后＜5年诊为胃癌者OR＝2.68。5a～14a者OR=2.82。Parsonnet的研究血样采集到诊断胃癌的平均时间是14.2a(1a～24a).。Nomnra的109例病人血清取样至诊断胃癌的时间为13a±5a，取样后0a～9a，相对于对照组Hp感染率的OR值为1.5；10a～14a的OR值为6.0。血样取自诊断胃癌之前，避免了胃癌本身影响Hp感染的机会，排除取样后5a内诊断为胃癌者，没有OR的下降，支持Hp感染先于胃癌的假说。

许多研究证明，Hp集中于肿瘤邻近的粘膜内，主要见于癌旁组织上皮及腺体内，癌巢内未见Hp的存在，肠化区无Hp寄居，在癌变的胃粘膜或癌旁组织中，84%为不完全型肠化生。这些癌前病变（萎缩性胃炎、肠上皮化生）的发展伴随着Hp的侵入下降，在癌组织内无Hp寄居，推测随胃粘膜被肠化或肿瘤组织广泛取代，在一些病人Hp消失，然而Hp通常伴随着胃癌，引起其他微生物的过度生长，可以成功地与Hp竞争其生态地位。严重的萎缩或灶性肠化先于胃癌的发生，导致Hp减少，这时活检组织Hp阴性。胃癌的存在可以改变胃的微环境，是以导致Hp感染率下降。在人群中Hp的感染率较高，但仅少部分人发生胃癌。虽然研究表明Hp先于胃癌而存在，与胃癌有相关性，为可能的病因，但在大量Hp感染的人群中未发展为胃癌，说明还存在着其他因素在Hp致病中起协同或加速的作用。

2.2 Hp感染与胃癌之间的剂量—效应关系

Forman检测了29例胃癌患者的HpIgG抗体滴度，有20例（69%）＞10μgIgG/ml，其中16例（55％）＞90μg/ml；而对照组116例有54例（47％）＞10μg/ml，其中44例（38％）＝90μg/ml。病例组平均滴度为90μg/ml，对照组为3.6μg/ml，两组差异非常显著（P＜0.01）。Nomnra根据Hp试验结果和HpIgG抗体水平，得出胃癌与对照组的OR值（表2），随着HpIgG抗体水平的增加，胃癌的危险性也相应增加，抗体的滴度的升高，与胃癌的危险性的上升相一致，反应了剂量—效应关系。尚有待积累更多的资料。

2.3 Hp感染与胃癌的流行病学研究

胃癌的发病率、死亡率在世界各地区之间悬殊很大，亚洲、拉丁美洲、中欧等地胃癌死亡率在30/10万以上，日本胃癌患者是美国白人的8倍，我国胃癌死亡率占各类恶性肿瘤之首。我国学者对Hp感染的研究发现胃癌高发区Hp感染的阳性率为62.5%，而低发区仅12.6%，而且萎缩性胃炎的发生率在50岁以前也是高发区明显高于低发区。胃粘膜上皮糜烂及小凹增生、腺体萎缩、肠上皮化生、异型增生以高发区患者程度为重。胃癌的死亡率与Hp感染率及感染的年龄有关，检测我国46个农村地区的1882例男性的HpIgG抗体水平，这些地区的胃癌死亡率1973a～1975a为3～60/1000，而人群中Hp抗体阳性率则为28%～96%。胃癌死亡率高的地区Hp感染率也高，35岁～39岁组Hp感染率55.8%，60岁～64岁组62.5%，随着年龄增加，Hp感染率有增加趋势。我国人口Hp感染年龄较早，约比发达国家早10a～20a，20岁～29岁Hp感染率45.7%，30岁～39岁63.6%,以后稳定在60%左右,≥70岁者为78.9%。

Megrand等在对来自法国、阿尔及利亚、象牙海岸和越南的1000份血清的大规模普查中证明，Hp感染呈世界性分布，在发展中国家，10岁人群中50%Hp阳性。30岁时上升至75%。秘鲁的Hp感染率高且开始于婴幼儿或幼儿期。Burstein等比较了1796例秘鲁人与2883例发达国家胃癌及溃疡病的流行情况，发现秘鲁人胃癌（4.5/80）发生率明显高于发达国家（1/29，P＜0.0001）。并介绍了用13C尿素呼吸试验调查玻维利亚儿童Hp感染率，在其90%父母低收入家庭的1岁～10岁儿童中，Hp阳性率达54%；与之相比，78%来自父母高收入家庭的儿童，Hp阳性率仅30%。Graham调查Hp感染在美国人中的流行病学，无症状人群Hp阳性率为52%，以1%年速率随年龄增加而增加。黑人Hp感染率70%，白人34%，综合平衡其他因素后，这种差别仍存在。而且经济地位高者Hp感染率低，经济地位低者Hp感染率高。

上述结果表明，Hp感染与胃癌相关的一些特征符合流行病学的规律；①胃癌高发区人群中，Hp感染的年龄早且感染率高，萎缩性胃炎和肠化生也重于低发区；②社会经济地位低下者，胃癌发生率高，Hp感染率也高；③发达国家胃癌发生率低，Hp感染率也低；发展中国家胃癌发生率高，Hp感染率也高。提示环境因素在Hp与胃癌的关系中起重要作用。

2.4 Hp感染与胃癌的病因学效应的生物学依据

从动物实验中，探讨Hp感染所导致的细胞、分子、DNA水平的变化，从分子生物学、分子病理学的角度研究其确切的致病作用，这是一个长期而艰巨的工作，目前Hp感染致胃癌尚缺乏生物学依据。

2.5 Hp感染与胃癌发生的特异性

胃癌的发生是一个漫长的过程，为多因素共同作用的结果。Hp作为胃癌的危险因素，已得到众多学者的承认。Talley等的研究不仅说明Hp感染与胃癌有密切关系，并且研究了结、直肠癌、食管癌、肺癌等其他肿瘤与Hp感染率间无明显关系，从而反证了Hp对胃癌的致病作用。但Hp绝不是胃癌的特异病因，因Hp与消化性溃疡、非溃疡性消化不良均有密切关系，更支持胃癌病因学中环境因素的作用。对Hp感染与胃癌的发生应从多因子复合病因学说角度来认识。

根据Hp感染是慢性胃窦炎的主要病因，以及伴肠化和萎缩病变等最终可引致癌变的研究结果，提出假设：Hp相关性胃窦炎→萎缩性胃炎→肠化生→癌变。众多流行病学资料支持Hp感染与胃癌相关。但还有许多需要解释及解决的问题。为什么Hp在人群中感染率高，但大部分Hp感染者无胃癌？为什么Hp感染与胃癌的机会比明显低于乙肝病毒感染与肝细胞癌的机会比？如果Hp是十二指肠和胃癌的一个病因，为什么这两种疾病的描述流行病学相差很大？对Hp感染的患儿一直随访到成年，对了解Hp感染的自然史及在发病中的作用是非常有价值的；治疗现症患者，对胃癌或癌前病变高危人群进行根除Hp远期疗效的随机干预试验，观察腺体萎缩、肠化生能否消失；改变初次感染年龄，能否延迟或阻断胃癌的发生，这些对Hp与胃癌是否为因果关系的确立具有重要意义，需长期的观察研究。采用流行病学研究方法，在致病因素、机体和环境等方面宏观地进行探讨，对Hp与胃癌的关系可以提供某些重要发现和有力的证据。

幽门螺杆菌感染与胃癌

就世界范围而言，胃癌仍然是最常见的恶性肿瘤之一。在我国，每年约有16万人死于胃癌。胃癌发病率有很大的地区差别、我国西北各省及东南沿海一带，属胃癌高发区。欧美某些国家，甚至包括日本，近年来胃癌发病率明显下降。流行病学资料表明，胃癌多发生于社会经济水平较差的地区，环境因素甚为重要。环境因素中，直至最近2a～3a前，多数认为系饮食因素所致。在经济发达地区，食物保鲜条件较好，可能明显减少胃内亚硝基化合物类的形成及其它有害物质（如高盐食物）的摄入，从而降低胃癌发病率。

另一方面，慢性胃炎与胃癌关系密切，两者无论在流行病学、病理、免疫、生化等方面都有许多相似之处。慢性胃炎→胃粘膜萎缩→肠化生→异型增生→胃癌这一模式过程已为国内外多数学者所赞同。自从幽门螺杆菌（Hp）被发现以来，国内外研究表明，Hp可致急性胃炎，感染一旦成立，常持续存在。在慢性活动性胃炎中，Hp感染率常在80%以上。流行病学同样证明，Hp感染特别高发于经济低水平地区。很多资料表明，Hp可能是慢性活动性胃炎的主要原因。基于以上事实，人们不禁要问：Hp感染是否亦与胃癌有关？

Forman等利用酶联免疫吸附法（ELISA）测定Hp抗体，对我国部分农村进行大规模的胃癌流行病学调查。普通人群中Hp感染为28%～96%，通过计算，Hp感染率与胃癌死亡率的相关率为40%（P=0.02），而在其他肿瘤中则无此相关性。在美国，Correa同样采用ELISA检测Hp抗体，调查胃癌高发区及低发区人群的Hp检出率，发现前者明显高于后者，认为社会经济条件同样影响胃癌发病率及Hp感染率。Parsonnet等观察109例胃窦、体腺癌，测定其Hp抗体检出率为84%，而在相配对的186例对照组中，其Hp检出率仅61%，二者差异有显著性（P<0.05）,其优势比（odds ratio）为3.6（95%）可信限为1.8～7.3)而在贲门癌中则无此差别。Forman等在英国作了前瞻性观察。对29例胃癌，取其确诊胃癌前血清作Hp抗体测定，检出率为69%，而在年龄配对的对照组中为47%；胃癌组抗体中位浓度（90mg/l）明显高于对照组（3.6mg/l,P<0.01）；经计算Hp感染者其胃癌危险优势比为2.77（95%可信限为1.04～7.94,2P=0.039）。Nomnra对居住夏威夷的美籍日本人作了类似观察。在5908人中，109例胃癌被确诊，取其过去贮存血清检测Hp抗体，检出率为94%，而与其配对的对照组仅为76%，其胃癌优势比为6（95%可信限为2.1～17.3）。Hp感染不仅与慢性胃炎、胃癌相关，而且与肠化生（IM）亦有关。Craanen等在533例中取胃窦粘膜活检2274块，同时检查了肠化生与Hp感染，共发现IM135例（25.3%）及Hp289例（54.2%）,二者在年龄上相似；≥50岁者明显较≤50岁者常见（IM，P<0.01,Hp,P<0.05），IM多见于Hp阳性者（33.9%），阴性者仅为15.2%(P<0.001)。IM患者Hp阳性者平均年龄为64岁，Hp阴性者为72岁，二者差异有显著性（P<0.005）。以上虽不能肯定二者的因果关系，但提示Hp感染可能为IM发生的重要因素。结果提示，Hp感染确可增加胃癌发生的危险性，可能为胃癌发生的因素之一。

胃癌可分肠型与弥漫型，Hp感染是否与型别有关？Parsonnet等发现在37例肠型胃癌中，33例（89.2%）非胃癌粘膜切片内有Hp,而在22例弥漫型中,仅7例(31.8%)有Hp,优势比为17.7(P<0.01)。事实进一步阐明Hp，慢性胃炎及肠型胃癌的关系。

当然，Hp感染在胃癌发生中究竟起多在大作用？起什么作用？亟需研究。这一研究在我国极为重要，因为Hp感染在我国很常见。据报道广州地区5岁以下儿童的感染率已达6%，10岁左右小儿感染率已超过10%，20岁～29岁为46%，30岁以上达60%，如果Hp确与胃癌有关，而Hp感染是完全可以进行有效治疗的，这对胃癌的防治将起不可估量的作用。

幽门螺杆菌与胃癌的关系

自从1983年幽门螺杆菌（Hp）被分离培养成功以来，其与胃部疾患的关系已引起人们广泛的关注。目前普遍认为，Hp是慢性胃炎的病原菌，在消化性溃汤的发生和复发中可能起重要作用，但是否与胃癌有关尚有争议。本文就Hp与胃癌关系的研究现状作一综述。

1Hp与胃癌有关的证据

近来，越来越多的研究表明Hp感染可能与胃癌的发生有关。①流行病学调查表明，胃癌高发区Hp感染率显着高于胃癌低发区，且获得感染的年龄也较早。胃癌死亡率与Hp感染率有显着的地域相关性。②前瞻性研究表明，Hp阳性者在随访的1a～24a间，患胃癌的危险性较Hp阴性者增加3倍以上。有人估计，约35%～55%的胃癌可能与Hp感染有关。③在社会经济状况较低的人群中，有着较高的Hp感染率，同时也发现胃癌危险性增加，两者似乎有相同的社会经济背景。有人认为，世界范围内胃癌发病率的下降，至少部分与社会经济条件改善，Hp感染率下降有关。④有研究表明，儿童时期居住过分拥挤与成年后胃癌危险性增加有关。据推测可能是在居住稠密的人群，Hp更易于传播，从而增加了患胃癌的危险性。⑤Hp阳性患者胃粘膜肠上皮化生发生率显著高于Hp阴性患者。特别是Ⅱ型和Ⅲ型肠上皮化生在Hp阳性者显著高于Hp阴性者，说明Hp可能对肠化生的形成有促进作用。⑥临床研究表明，胃癌患者Hp感染显著高于正常对照组及其它肿瘤患者（如食道癌、肺癌、结肠癌等）。Hp感染率与肿组织学类型、分化程度及肿瘤部位也有关系；肠型胃癌高于弥漫型胃癌，分化好者高于分化差者。Hp与胃窦癌有相关性，而与贲门癌无相关性，这与Hp多寄居于胃窦部相一致。

2Hp的致癌机理

假如Hp在胃癌发生中起作用，那么一个很重要的问题是：它是如何发挥作用的。综合有关文献，Hp可能通过下述机理引起细胞癌变：①研究表明，细胞增殖加速是人类细胞癌变的普遍机理。Hp引起的炎症损伤，使细胞更新加快，从而增加了DNA损伤的危险性。有丝分裂期的细胞较静止期细胞更易于受外源性或内源性致突/癌物作用而发生转化。②Hp感染时，炎症区自由基、超氧化物生成增加，可引起细胞过氧化损伤，而诱发细胞癌变。自由基具有强大的破坏作用，可使核酸主链断裂，碱基降解和氢键破坏，脂质过氧化物的分解产物丙二醛可引起蛋白质分子内和分子间交联并导致DNA断裂，在体内有直接的致癌或促癌作用。同时，Hp感染可使胃液内抗坏血酸浓度降低，减弱了抵抗DNA过氧化损伤的防御机制。③Hp本身也可能产生致突、致癌物质，直接作用于感染部位，引起细胞恶变。不少研究发现，Hp可产生细胞毒素。初步鉴定表明，它是一种Mr约992001的大分子蛋白质，对热不稳定（70°C，30min可灭活），对胰蛋白酶和蛋白酶K敏感，酶活性可被50%饱和硫酸铵沉淀，不能通过99200分子孔径的超滤膜，对多种体外培养细胞有致空泡作用。最近来自美国的一项研究表明，在新奥尔良胃癌高发区黑人居民中，Hp产毒株高达83%，而其它地区报道一般只有30%～55%。更重要的是慢性萎缩性胃炎和肠化生患者其Hp产毒株所占的百分比显著高于弥漫性胃炎。；因此，Hp毒素在胃癌发生中的作用，值得进一步研究。④Hp感染时，胃窦部炎症粘膜的增殖区内，表皮生长因子浓度显著高于非炎症区粘膜，同时发现表皮生长因子的表达与粘膜内淋巴细胞有关，而与中性白细胞无关。由于表皮生长因子对胃有潜在致癌作用，因此推测Hp可能通过诱导胃粘膜表皮生长因子过度表达而引起胃粘膜细胞癌变。

已有足够的病理学和流行病学证据表明胃癌的发生是一个多病因、多阶段的连续过程。从慢性胃炎、经过萎缩性胃炎、肠上皮化生和不典型增生，最后发展为胃癌一般需十几年，甚至几十年时间。在这漫长的演变过程中，各种致病因子可能单独或协同作用于不同的阶段，而最终引起细胞癌变。一般认为Hp感染主要作用于起始阶段，而起到一个“启动子”作用。但也有人认为，Hp感染不仅可使萎缩和肠化生提前出现，而且也可加速肠化生的发展，起“促进剂”的作用。

Hp感染可引起胃酸分泌减少，胃腔内pH值升高。这种胃内环境的改变，有利于胃内其它细菌的生长并促进N-亚硝基化合物的合成。另外，Hp为硝酸盐还原酶阴性菌，已证明也有催化N-亚硝基化合物合成的作用。因此，Hp在人类是否参与胃内N-亚硝基化合物的合成及其机制值得进一步探讨。

Hp感染引起的胃粘膜屏障的破坏，增加了其它损伤因子对胃粘膜的损伤作用。Hp与胆汁酸的相互作用已有报道。一方面Hp可使胆汁酸去酰胺化，形成较多的有毒性的次级胆汁酸-石胆酸和脱氧胆酸；另一方面，胆汁酸对Hp又有抑制作用，胆汁返流可抑制Hp的定植和生长。Dixon等则认为，Hp感染和胆汁返流应被看作两个独立的引起肠化生的危险因素，而两者可能起协同作用：已受Hp损伤的上皮更易受胆汁返流的侵蚀，在再生过程中也更可能被肠型细胞所取代。

Hp感染和胃癌发生是否有相同的遗传学基础尚不清楚。家庭调查表明，Hp有家庭内聚集现象，对胃癌家族的调查也发现其子女中Hp感染率较高。一方面说明Hp可能在家庭内通过密切接触人-人传播，另一方面也可能与遗传因素有关。某种遗传机理可能使Hp和胃癌的易感性同时增加。

3 问题及展望

虽然临床及流行病学调查表明Hp与胃癌有关，但尚无直接证据表明两者的因果关系。还有许多问题尚不清楚：正常人群有相当高的Hp阳性率，但患胃癌者毕竟是少数，而相当部分的胃癌并无Hp感染。已知Hp与十二指肠溃疡也有密切关系，在某些地区的人群（如非洲）有着较高的Hp感染率，但胃癌发病率却相对较低。虽有几项研究表明Hp感染与胃癌危险性增加有关，但其相对危险度和机会比却较低，远不如乙肝病毒与肝癌。萎缩和肠化生也可发生于无Hp感染的胃粘膜。因此，Hp既不是唯一的，也不是必需的致癌因子，在胃癌发生中可能只起到辅助致癌作用。“消除Hp，即可使60%胃癌免于发病”的预测未免过于乐观。

尽管如此，Hp的发现毕竟给胃癌病因学的研究开辟了新的途径，为胃癌的一级预防增加了新的内容。在美国已开始了胃癌高发区的Hp干预性治疗，这项前瞻性研究定将给Hp与胃癌关系提供更有力的证据。国内也应尽快开始这方面的工作。尽快建立Hp诱发或促发胃癌的动物模型也势在必行。由于Hp既易诊断，又可治疗，研究Hp与胃癌的关系无疑将有着光明的前景。

幽门螺杆菌与胃癌关系的研究

慢性萎缩性胃炎，胃溃疡与胃癌有密切关系，1972年世界卫生组织将其列为癌前期状，而将胃粘膜的上皮化生及腺上皮不典型增生（ATP）列为癌前病变。近年来国内外学者普遍认为幽门螺杆菌（Hp）感染与慢性活动性胃炎及消化性溃疡有密切关系，因此Hp与胃癌的关系已引起人们关注，现就我们对Hp与胃癌关系的研究报道如下。

1 材料和方法

1.1 病例

本组1000例有消化道症状进行内镜检查的门诊及住院病人进行Hp有关检查。男709例，女291例，年龄12岁～81岁。274例连续内镜活检标本的组织学研究，并与同期广州一所医院连续内镜活检材料对照。3852例Hp流行病学调查材料。

1.2 方法

所有进行内镜检查病人均在胃窦幽门前区活检做细菌学培养、尿素酶快速检查及组织切片染色检查。Hp流行病学调查方法包括一般个人资料，文化社会因素，健康状况，生活饮食习惯等48个量变的问卷调查。然后采集血清检查HBsAg，ALT及用ELISA法测定HpIgG抗体；普查前与Hp阳性病人组织学和细菌学检测对照，敏感性100%，特异性91%。

1.3 动物试验

用5只成年狗在Hp感染前后进行内镜检查并活检，以观察Hp感染前后的胃粘膜变化。每只狗在第1次内镜检查后灌注Hp活菌液5ml（含菌数约108/ml）。以后每周内镜观察并活检1次，共8周。

2 结果

2.1 内镜检查病人Hp阳性率

平均为53%，其中胃溃疡Hp阳性率为73.2%，十二指肠溃疡81%，慢性活动性胃炎为76.7%，胃癌为75.5%，慢性浅表性胃炎为41.3%。胃癌及癌前期状态患者Hp检出率显著高于慢性浅表性胃炎（P＜0.01）亦高于兰州地区Hp流行病学调查平均阳性率(63.8%)。

2.2 兰州与广州同一时期比较

兰州地区胃癌检出率为9.9%，广州地区为30%，（P＜0.05）。十二指肠球部溃疡与胃溃疡比例兰州为2.9:1广州为14:1,消化性溃疡与胃癌Hp阳性率两地基本相同,但非溃疡性消化不良Hp检出率两地有显著差异,兰州为71.6%,广州为47.7%(P＜0.05)，Hp相关性胃炎中，重度萎缩和肠发生率见表1。

表1 兰州与广州连续内镜检查病人组织学对比

结果显示兰州地区Hp感染率明显高于广州，中、重度萎缩和肠化生率高，年龄也较广州提前，以后随年龄增长萎缩及肠化发生率及程度也逐渐加重，这有可能是兰州胃癌发生率高于广州地区的因素之一。

3852例大样本人群Hp感染流行病学调查结果显示，兰州地区Hp感染阳性率平均为63.8%，高于国内广州的47.3%及广西的40.2%,10岁以下儿童感染率已高达42%～55%,此期儿童感染率平均每年以4%左右速度递增,可称为“剧增期”，10～40岁每年以1%速度递增，可称为“缓增期”，40岁以后Hp感染率基本保持稳定，不再继续上升，可称为“平坦期”。

2.3 动物试验结果

实验狗在实验前内镜及活检组织检查胃粘膜均未见明显病变，Hp各项检查均为阴性，灌注Hp活菌液后，有3只狗在1W后胃粘膜有活动性胃炎改变，Hp细菌学培养、尿素酶试验及组织学检查均为阳性，说明慢性活动性胃炎的发生与Hp感染有密切关系。

3 讨论

本研究资料显示，Hp感染与慢性活动性胃炎及消化性溃疡密切相关，动物试验结果亦支持这一结论。而胃癌的发生和发展有诸多因素，但慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃息肉及胃粘膜不典型增生、肠上皮化生等胃癌前期状态及癌前病变已被认为其与胃癌发生密切相关。兰州地区为胃癌高发区，1970年～1985年胃癌死亡率男性为32.12/10万,女性为20.34/10万,常规内镜检查，连续内镜活检及流行病学调查结果均显示Hp感染阳性率每年10/10万）。儿童期Hp感染率亦高于上海、广州及一些西方国家，在一些胃癌低发的西方国家20岁以前Hp感染率相当低，20岁以后才逐渐上升。这种Hp感染及发生率的差异，有可能是胃癌发病率不同的因素之一。

连续内镜活检结果显示，兰州地区中、重度萎缩和肠化发生率明显高于广州地区，年龄也较广州提前，这支持Hp感染和胃癌发病相关学说，Hp由于其寄生胃粘膜表面不溶性粘液层下，受到碱性粘液的保护，同时Hp能释放尿素酶分解尿素，产生大量氨以中和胃酸，从而使其在适宜的pH环境中生长。故有人认为一旦感染Hp很难自动清除，甚至终身受累。即儿童期一旦受Hp感染，首先发现的是慢性活动性胃炎，随着年龄增长和时间推移，有人发展为慢性萎缩性胃炎、胃溃疡——肠上皮化生——腺上皮不典型增生，最终有可能发展为胃癌，所以对受Hp感染人群，进行系统的抗菌治疗，清除Hp，不但可以防治慢性活动性胃炎及消化性溃疡，而且可能会降低胃癌发病率。

但本项研究同时还显示Hp与十二指肠溃疡关系也很密切，但为什么该病流行病学特点与胃癌发病相距甚远，即十二指肠溃疡病患者很少有发生胃癌者，值得进一步研究。

幽门螺杆菌与上消化道癌的关系研究

上消化道癌与幽门螺杆菌（helicopacterpylori Hp）关系的探讨，近年来已成为各国学者研究的热点。上消化道癌产严重危害人类健康的恶性肿瘤，国内、外学者对二者关系的研究也多有报道，一般认为，Hp可能是胃癌致病的环境因素之一，而对食管癌与Hp关系报道较少。本文旨在分析上消化道（这里主要指食管癌和胃癌）组织不同部位Hp感染的阳性率，以期探讨在上消化道不同的部位癌肿与Hp感染的关系。

1 对象和方法

本院于1993年~1994年在门诊胃镜检查的1956例患者，进行Hp检测。经胃镜及病理学诊断的上消化道癌共116例，其中男85例，女31例，平均年龄为54岁。胃镜检查时取病理组织一块，作快速尿素酶试验，观察在室温5mm内试剂变色情况，变红色即为阳性。所有操作均由胃镜室护士一人进行。所用试剂由福建三强生物品制剂公司提供。

2 结果

116例癌肿组织检测总的阳性率为43%，食道下段15例，胃底贲门7例，胃体8例，胃小弯5例，胃窦部66例，幽门管13例，残胃2例，阳性率分别为78.53%,85.71%,25%,80%,34.85%,61.54%,50%。

3 讨论

我国为胃癌、食管癌的高发区，而据国内外学者对胃癌高发区的Hp检测，阳性率为62.5%,低发区为12.6%,而普通“健康”人为40.5%，本组资料主要研究了食管癌和胃不同部位癌与Hp感染的关系，其结果显示在食管下段癌，胃底贲门，胃小弯及幽门管等处的癌与Hp感染关系密切，这些部位的Hp感染明显高于胃癌的高发区，因而认为这些部位Hp可能与癌肿关系较为密切。目前国内外许多研究表明，在胃癌发病率高的地区，Hp感染率也高；发达国家胃癌发生率低，而Hp感染率也低；Hp感染率高的国家和地区，胃癌发生率也高，因而认为Hp可能是胃癌致病的环境因素之一。

现认为Hp感染后发生癌变的可能机制：①Hp感染后产生氨，中和胃酸引起的低胃酸使胃癌的危险性增加；而胃酸下降，致分解硝酸盐的细菌在胃内滋生，所产生的亚硝酸盐与N-硝基化合物具有致粘膜癌变作用。②Hp产生的代谢物及毒素直接损伤粘膜引起炎性反应，致细胞快速更新增加DNA受损机会，炎性反应产生内源性突变。③Hp感染的细胞生长代谢旺盛，易致DNA的损伤及非整倍体的危险性增加。④也可能由于癌变后致组织的环境因素发生改变而易致Hp感染。因而认为Hp感染有更多的机会引起慢性萎缩性胃炎，肠上皮化生等癌前病变，增加了致癌的危险性，从而提示Hp可能是上消化道癌的起动病因之一。

本研究显示结果，提示了Hp不但是胃癌致病的环境因素之一，也可能是食道癌致病的环境因素之一；胃内不同部位的Hp感染阳性率不同可能与Hp的流行病学有关，即粪—口途径传播。但就目前资料尚不足以充分说明Hp感染与癌肿发生之因果关系，有待进一步探讨与研究。

胃癌与癌前病变的关系分析

为研究肠上皮化生（IM）及不典型增生（ATP）与胃癌的关系，作者分析证实了近10年的病理活检资料，现将研究结果报告如下：

1 材料和方法

本组材料为我院1983年～1993年常规病理活检资料完整、内镜采取的胃粘膜组织及外科手术中胃大部切除标本368例。观察取材部位主要是胃窦部大弯、小弯，胃体部大弯、小弯以及窦部的前壁、后壁，胃体部前壁、后壁等。每例取材1～8块，以体积分数为10福尔马林液固定。石蜡包埋切片，HE常规染色。

2 结果

IM51.9%(189/368),ATP20.2%(79/386)。IM在胃溃疡发病率为55.9%，在胃癌为58.5%，两种疾病之间无统计学差异（P＞0.05），在高分化腺癌和低分化腺癌的发病率分别为67.6%和50.9%,经统计学处理,两者之间差异不显著(P＞0.05)。ATP在胃溃疡病中发生率为17.6%，在胃癌中37.8％，两者的发生率有显著差别（P＜0.01），在高分化胃腺癌和低分化胃腺癌的发生率分别为53％和24.5%，两者之间的差异显著（P＜0.01）。在非癌非溃疡的其它胃部疾病的胃粘膜中，IM占29.6%，ATP占12.2%，其中胃炎中占10.5%，IM，ATP的发生率均明显低于胃溃疡病及胃癌。IM，ATP等胃的良性病变中，男女之比约为5:1。并随年龄增加而检出率亦增高，其发病的高峰年龄组为40岁～59岁，与胃癌发病年龄一致。IM，ATP病变部位的分布，以窦小弯所占比例较大，胃体部病变检出率较低且程度轻。可见，胃的良性病变以胃窦部的检出率最高，病变的程度也最重，尤其是胃窦小弯部，与癌的病变部位分布一致。

3 讨论

近几年来认为，幽门螺杆菌（简称Hp）的感染是慢性萎缩性胃炎、胃溃疡病及胃癌发生的重要致病因素之一。自1983年Warren和Marshall在胃炎病人胃窦粘膜活检标本中发现并培养出幽门螺杆菌后，引起了国内外学者的重视。人体感染了Hp后，在遭到外界不利因素作用或内环境紊乱时，胃粘膜组织发生了病变。原来桔红色泽丧失，代以灰色灰绿色，粘膜水肿或厚薄不均，缺乏完整性光滑性，出现粘膜表面粗糙或凹凸不平。透镜电镜下发现，慢性萎缩性胃炎病人胃粘膜活检标本的病理变化，粘膜上皮及腺上皮细胞普遍低矮，细胞间隙增宽，排列不整，腺腔扩大，腺管萎缩，分泌颗粒减少，间质水肿伴有淋巴细胞、粒细胞等炎症细胞浸润，少数间质出血等变化。有时局限性组织再生过程占优势，则可发生息肉，病变严重时，胃粘膜形态与小肠相似（肠化）。所以，病理诊断的根据，以胃固有膜腺体萎缩为主，伴有IM，炎细胞浸润，淋巴滤泡形成，粘膜内纤维组织增生或腺体异型增生等。

为了研究IM与胃癌的关系，不少专家对IM的粘液和酶组织化学进行了研究，提出了可把IM区别为完全型和不完全型两类。前者分化成熟，特点与小肠接近，称为小肠型，癌变机会不多，大多数属此型，后者分化不成熟，含有结肠杯状细胞内也具有的硫酸粘液，与胃癌关系密切称为大肠型，仅有少数属此型。从胃粘膜上皮IM的检出率及其发生部位看，IM与胃癌的关系，究竟是肿瘤起源于IM，还是IM系胃癌发生过程中的伴随病变？目前尚不够完全明了，董聿明等报告大肠型肠化在肠型胃癌中发生率高，范围广、程度重，胃癌与肠化呈一致性分布，占80.5%。王学诚等在电子显微镜下观察到IM与肠型ATP、肠型胃癌细胞超微结构具有相似性。多数学者均发现IM移行至癌的表现。本组病例IM从病变的程度、病变的部位分布及年龄组分布情况来看，也与胃癌的分布一致，支持胃癌起源于IM的观点。

根据本组材料所见，胃粘膜上皮ATP，并存于消化性溃疡、胃炎等病变中。它不是一种独立存在的临床病种，而是一种病理组织学的改变。ATP的性质，Elster认为是一种不可逆的病变，最终肯定都要发展成为胃癌。但Ochlert报告46例重度ATP，仅4例发生癌变，占8.7%。即使是重度ATP，50%以上的病例是可逆的，30%以上的病例多年没有变化。张齐联等报告4210例胃粘膜组织活检中有213例有不同程度的ATP，轻度者多属炎性增生，及溃疡、糜烂旁再生腺体。中度、重度包括癌前病变及虽有较明显异型性，但属长期无进展的良性病变，其中1例随访3年后发生癌变。

从上述分析可见，胃粘膜上皮ATP，与胃癌的发病率似乎有平行关系，且ATP的病变部位分布，年龄组分布，与胃癌的颁布较接近一致。

幽门螺杆菌与胃癌的流行病学关系及致癌机制

自从1983年Warren和Marshall报道在慢性活动性胃炎患者的胃窦粘膜活检标本中分离培养出幽门螺杆菌（Hp）以来，引起了国内外学者的高度重视，为此已进行了大量的研究，并多次召开了国际性学术研讨会。目前对其已进行了分型、流行病学、动物模型、致病机理、治疗、疫苗研制等多层次、多方位的研究，获得了大量的临床资料。现已确定Hp是慢性胃炎，特别是慢性萎缩性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素之一，并认为Hp感染和胃癌有一定的关系。近年来，大量有关Hp感染与胃癌的流行病学调查资料显示，胃癌亦是一种Hp相关性疾病。认为Hp是胃癌的启动病因之一。本文就Hp与胃癌的流行病学关系及致病机制作一简述。

1 Hp与胃癌的流行病学关系

Hp与胃癌的关系已引起国内外学者的广泛关注，认为Hp是胃癌发生的重要始发因素，亦是胃癌病因学中的一个新的危险因素。欧洲胃肠病专家研究组对13国17地区人群随机的多中心流行病学研究，有选择性地反映全球胃癌的发生率。通过检测HpIgG阳性血清和累积率，统计胃癌发病率和死亡率的回归系数为2.68(P=0.001)和1.79（P=0.002）。结论是：Hp感染人群胃癌发生的危险性是无Hp感染人群的6倍。国内对Hp感染血清回顾性调查，发现Hp阳性者发生胃癌的危险性是阴性者的8倍。对胃癌高、低发区人群中Hp感染率的调查，证实Hp感染率与胃癌死亡率成正相关。张锦坤有PRC法检测胃癌21例，肠腺化生19例，不典型增生17例，浅表性胃炎4例和正常对照组29例胃粘膜中的Hp及C-Ha-ras癌基因突变，ras-P21表达和细胞内DNA含量的测定。发现病变组织Hp检出率为68.9%，其中胃癌57.1%,肠腺化生76.5%,不典型增生79.0%,浅表性胃炎50%,而正常对照组为27.6%(P＜0.001)。癌基因突变组的Hp阳性率（71.4%）高于无突变组（68.5%）；ras基因产物P21蛋白表达在Hp阳性组高于阴性组（P＜0.01）；细胞内DNA含量及S期细胞Hp感染组均明显高于未感染组（P＜0.01）。提示Hp可能有致癌基因突变作用。吴艳环等采用酶免疫吸附试验（ELISA）法对148例胃癌患者和对照组148例的血清Hp抗体进行检测，得到了与上述不同的结果。检测结果显示，胃癌组Hp感染率与对照组无差异，胃癌组为71.62%，对照组为68.91%。感染率在60岁以上年龄段明显高于60岁以下年龄段。认为Hp感染与胃癌致病关系不象其与慢性胃炎和消化性溃疡之间那么密切。这说明目前的Hp感染与胃癌的流行病学关系尚未统一，可能存在着区域差异。

Hp的传播途径。就目前的研究资料显示，比较公认的有以下几个途径；①粪—口传播。随着新技术在Hp研究中应用，使提出已久的粪—口传播理论得到了证实。应用敏感的PCR技术已经在胃Hp阳性患者牙斑和粪便中发现了HpDNA。杨海涛在瑞士选用敏感的PCR引物，在几乎所有的牙斑标本中都检到了Hp。最近也有人从Hp感染者粪便中培养出了Hp，支持了Hp的粪—口传播理论。来自上海的市民和郊区农民Hp感染情况的调查表明，农村Hp感染明显高于城市。也说明了Hp粪—口传播的可能性。②人—人传播。梁冠峰等用ELISA技术检测血中Hp抗体的方法，发现父母Hp抗体阳性的22个家庭102名成员中Hp抗体阳性率达76.5%，而父母阴性的24个家庭113名成员中Hp抗体阳性率仅为9.7%，两者相差非常显著，且前一组的抗体水平也显著高于后一组。从而表明了Hp感染存在家庭内聚集现象，提示了人—人传播的可能性。③口—口传播，国内学者用巢式PCR在唾液中和牙斑中检出Hp。加拿大，美国、英国的学者亦分别从人的牙斑，唾液和粪便中培养出了Hp。证明了口—口传播途径的可能性。共用碗、筷、水杯和接吻等都会导致Hp感染。④经水源传播。美国Westblom从秘鲁利马采集污水样本40份，应用PRC技术发现了3份水样Hp。Hp在污水中的存在，提示了Hp有可能经水源传播。总之，Hp感染与社会因素、经济因素、环境因素和遗传因素有关，具有多途径传播的特点。

2Hp致癌机制

众所周知，胃癌的发生是多因素所致，Hp并非是胃癌的特异病因，而只是其发病多因素中的一个，且只有长期的慢性感染才会使发生胃癌的危险增加。Forman发现胃癌组抗HpIgG平均滴度为mg/l，对照组为3.6mg/l，两者相关非常显着。Nomnra提出抗体滴度越高，发生胃癌的OR值越大，提示Hp感染与胃癌之间存在量关系。目前还没有发现Hp产生致癌物直接损伤上皮细胞基因，提示Hp的致癌作用是间接作用。Hp相关性胃炎可触发胃粘膜发生一系列变化，进而促进胃癌的发生。目前认为胃粘膜发生癌变的过程如下：正常胃粘膜→慢性活动性胃炎→慢性萎缩性胃炎→肠化生→不典型增生→癌变，Hp与其中每一步骤均有关联。国内于军等发现Hp感染与胃癌发生之间的演变顺序如下：Hp感染→持续炎症→胃粘膜上皮增殖修复→癌基因及／或抗癌基因突变→上皮癌变。Hp的致癌机制可能有以下几个方面：①细菌产生的氨、乙醛、蛋白水解酶、脂肪分解酶及各种毒素，能促进肿瘤的形成和生长。在胃癌高危人群中Hp能产生形成空泡的细胞毒素；②Hp对胃粘膜的化学和物理特性起不到影响，使胃粘膜对致癌因素较为敏感。Hp能长期抑制胃粘膜分泌维生素C，使胃内亚硝基化合物的形成增加；③Hp相关性胃炎时，炎症细胞释放的细胞激动素及其它生物介质促进炎症粘膜上皮细胞的过度增生和分化，使正常粘膜细胞向化生转变。④长期慢性的Hp感染导致增生性上皮细胞的基因损害，粒细胞及巨噬细胞释放的自由基，活化氧代谢物，保护性维生素C和自由基清剂缺乏也加重了这种损害。⑤Hp感染可诱导有丝分裂，提供内源性突变原。Hp通过错误复制内源性炎症相关突变原和外源性饮食突变源，引起细胞增生而增加DNA损伤的危险。如感染的时间越长，修复又不当，恶变的可能就越大。

以上的说法虽不能解释所有的现象，但对将来的进一步研究是一种启示。最终明确Hp感染与胃癌发生之间的关系，有待以后研究。

幽门螺杆菌感染与胃癌前病变的关系

自发现幽门螺杆菌（Hp）以来，已证明Hp感染与慢性胃炎和消化性溃疡的发生密切相关，Hp与胃癌的关系仍是一个尚有争议的问题，但流行病学资料已显示Hp感染与胃癌的发生密切相关。我们分析了2563例因上腹部不适而在我院做胃镜检查患者的胃粘膜病理组织学和Hp感染的结果，初步探讨Hp感染与胃粘膜肠化生，萎缩和不典型增生3种胃癌病变的关系。

1 材料与方法

1.1 对象

2563例均系1994-01～1996-03因上腹部不适在我院顺序做胃镜检查患者。其中男1680例，女883例，年龄17岁～76岁，平均42.3岁±11.2岁。除外条件：检查前已接受抗Hp治疗；胃癌；手术后胃癌。

1.2 方法

全部病例做胃镜检查时钳取胃粘膜组织，送病理组织检查有无肠化生、胃粘膜萎缩和不典型增生。同时在胃窦部距幽门孔5cm内取活检1块，作快速尿不经酶试验，判断有无Hp感染。

2 结果

共发现Hp感染1419例（55.4%），无Hp感染1144例，病理组织检查发现肠化生、萎缩和不典型增生3种癌前病变共有516例，总发生率为20.1%。其中Hp感染组有310例发生癌前病变，发生率为21.8%；而无Hp感染组发生癌前病变206例，发生率为18.0%，两者比较，差异显著（t=2.39,P<0.05）。Hp感染时与肠化生、萎缩、不典型增生的发生率见表1。

表1 Hp感染与3种癌前病变发生率比较

Hp感染组癌前病变发生的平均年龄41.1±10.4岁，而无Hp感染组206例的平均年龄为43.4±11.5岁,两者比较,差异显著(t=2.46,P<0.05)。癌前病变发生的年龄Hp感染组较无Hp感染组提前。

3 讨论

慢性浅表性胃炎,萎缩性胃炎,肠腺化生，不典型增生到胃癌的演变过程已明确，Hp感染为慢性胃炎的主要原因，有理由将其视为胃癌发生的超始因子。胡品津等从流行病学角度对比胃癌高发区和低发区胃粘膜肠化生、萎缩及不典型增生的发生率，发现胃癌高发区以上3种癌前病变均较低发区为高。李瑜元等证实我国为Hp感染高发区，各地感染和胃癌病死率差异很大。本文1419例Hp感染胃粘膜活检标本中肠化生、萎缩及不典型增生发生率分别为17.5%、8.2%及4.4%，显著高于无Hp感染组，且发生年龄提前，提示Hp感染与胃癌前病变有关，从而产生胃癌的机会亦增加。

Hp感染如何在胃癌发生中起作用，目前尚未十分明了。可能与Hp致胃粘膜炎症，肠化生代替了功能性壁细胞，致使胃酸降低；Hp含有较多的尿不经酶，酶的作用使氨增加，中和胃酸有关。胃内酸度下降，细菌生长，促使硝酸盐降价到亚硝酸盐乃至亚硝胺而致癌。还可能Hp的代谢产物做为生物刺激物引起基因活化及表达异常有关。胃癌的发生是多因素、多步骤的过程，本文的结果表明，感染Hp后是导致胃癌前病变的原因之一，深入研究Hp感染与胃癌的发病关系有着重要的意义。

幽门螺杆菌感染与胃癌的相关性

自发现幽门螺杆菌（Hp）以来，已证明Hp感染与慢性胃炎及消化性溃疡的发生密切相关，但Hp与胃癌之间的关系至今尚未明确。本文对73例胃癌患者进行分析，采取经内镜活检组织的Hp培养及Giemsa染色确立Hp感染，同期检测血清抗Hp抗体水平，初步探讨Hp感染与胃癌之间的关系。

1 对象和方法

1.1 对象

选择73例经组织学证实为胃癌的患者。男61例，占83.6%，年龄为26岁～81岁，平均61.3岁。对照组选择年龄、性别与胃癌组匹配，并经内镜及组织学检查除外消化性溃疡、胃粘膜萎缩、肠上皮化生及异型增生者。

1.2 胃镜及活检

受检者于胃镜检查时取距幽门5cm区域内非癌组织2～3块，分别做Hp培养和组织学检查，同期抽取静脉血5毫升。

1.3 血清抗Hp抗体检查

采取酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清标本进行Hp IgG抗体测定,依照被检血清稀释1:300浓度阳性时为高水平抗体浓度界值。

1.4 确立Hp感染

每例均经Hp培养及组织学Giemsa染色，二者之一阳性即确立为Hp感染。

2 结果

2.1 Hp检出情况比较

胃癌组Hp检出率为58.9%（43/73），比较对照组的53.4%（39/73）差异无显著性（X²=0.44,P＜0.5），两组各年龄而增加，在50岁～69岁年龄段为最高，70岁以后有所降低，两组年龄区Hp检出率比较无差异。

2.2 血清高水平抗Hp抗体

胃癌组高水平血清抗Hp抗体检出率为67.1%(45/73)，高于对照组的57.5%(42/73),但统计学上差异无显著性(X²=0.26,P＜0.5)，两组各年龄区高水平抗体检出率比较亦无差异。

2.3 胃癌不同部位Hp检出率比较

癌肿位于胃窦部21例，检出率为66.7%（14例，）胃体14例，Hp检出率57.1%(8例),胃底部9例, Hp检出率56.5%(13例),混合6例, Hp检出率50%(3例).分析73例胃癌的分布部位及Hp检出率显示,各部位胃癌的Hp检出率差异无显著性。

2.4 比较胃癌不同组织类型及Hp检出率

结果为，肠型胃癌Hp检出率（65.3%）高于弥漫型(47.1%),(X²=2.21,P＞0.1),及混合型(42.9%).(X²=0.53%,P＞0.25)。

3 讨论

本研究显示胃癌组有较高的Hp感染及血清高水平抗Hp抗体检出率，其结果与有关报道接近，但此检出率与非癌组比较差异不显著，其原因可用Karnes提出的胃粘膜进展到萎缩性胃炎和继之癌变过程中伴有Hp的消失解释，或由于平均年龄超过60岁的对照组本身也存在高水平的Hp感染流行率。但是具有同样高Hp感染水平的对照组并未发生胃癌，提示Hp感染不是胃癌发生的唯一或必须因素，不同菌株，不同毒力的Hp感染及宿主的不同个体差异可能影响Hp的致病结果。

有资料显示，在胃窦、胃体、胃底癌较贲门癌与Hp感染关系密切，肠型胃癌与Hp感染有关，这种情况可用胃粘膜肠上皮化生，非典型性增生，最终致癌变的模式来解释。但本组结果，Hp感染率在不同部位的胃癌中比较无差异，肠型胃癌的Hp检出率虽高于弥漫型和混合型胃癌，但差异也不显著。由于本组研究例数较少，尚需进一步积累资料才能下结论。

4．儿童幽门螺杆菌感染的研究

幽门螺杆菌与儿童胃十二指肠疾病

近几年，有关幽门螺杆菌与儿童消化道疾病的研究论文日渐增多，发现了不少有别于成人的临床特点，涉及微生物、流行病、儿科临床、检验、免疫、药理等诸方面。这些研究成果不但可以指导儿童患者的诊疗，也有助于提示Hp在成人体内的作用规律，现做一简要介绍。

1 儿童Hp感染的流行病学

各年龄段儿童都可以发生Hp感染，较大样本的调查证实，儿童Hp感染与年龄呈正相关，儿童Hp感染率与年年呈正相关；而且，不同地区、不同人种儿童的Hp感染率也不尽相同。总的发病趋势是：在经济发达国家的白人儿童中感染率低，初始感染的年龄较大；而发展中国家的儿童Hp感染率高，初始感染的年龄较小。法国10岁以下儿童的感染率为3.5%，而阿尔及利亚为45%，科特迪瓦为55%。

我国儿童的Hp感染率也较高，胃癌高发区的儿童感染率更高，且寝感染年龄提前。笔者对陕北某县（胃癌标化死亡率54/10万一小学228名6岁-12岁健康学生进行了胃镜检查并同时活检夹取胃粘膜进行尿素酶试验，结果为111例（48.7%）呈阳性，其分布为：6岁7例（29.2%），7岁14例（43.8%），8岁14例（58.3%），9岁15例（60.0%），10岁75例（57.7%），11岁18例（42.9%），12岁28例（50.9%）。而该县成人感染率为65.2%。我国广东某县胃癌病死率仅为5/10万，对一小学181例7岁~12岁的儿童胃镜活检调查结果表明：尿素酶试验阳性者7岁~8岁25.6%,9岁~10岁34.2%,11岁~12岁37.5%。各年龄段均明显低于胃癌高发区。此外，儿童Hp感染也有家庭聚集现象。据Drumm等报道，感染了Hp的同胞兄妹80%以上有Hp感染的血清学证据，而年龄配对的对照组仅13%有Hp感染。父母感染了Hp的儿童比双亲未感染Hp的儿童检出率高。1986年Langenberg等证实夫妇间存在相同的Hp限制性核酸内切酶片断。Hp感染的聚集现象也见于低能儿童的学校中。这些证据似乎表明，Hp感染与遗传易感性无关。除极少数灵长灵动物，在与人类关系密切的哺乳动物体内和大自然中，尚未发现Hp的存在。有较多的证据提示，Hp主要以“人—人”途径传播。Hopkins等经多因素多元回归分析发现，在智利生食受Hp感染水浇灌的蔬菜可能是Hp传播的重要途径。内镜检查引起的交叉感染近年来也受到重视，一份对281例胃镜受检者的回顾报告称，估计1.1%的受检者有因内镜检查而感染Hp的可能性。有学者通过体内和体外试验证明，十二指肠液对Hp有强大的杀菌作用，使Hp难以在粪便中存活，从而提出，“人—人”传播主要通过“口—口”途径，而非“粪—口”途径。

2 Hp感染与儿童胃炎

系统的病因学研究已经证明，Hp与慢性胃炎的发病有明确的因果关系。经组织学证实儿童慢性胃炎病例中。Hp检出率阳性率在60%以上，而组织学检查未见异常者，继发性胃炎（药物性、胆汁反流性、嗜酸细胞性胃炎）、胃克隆氏病患儿未能检出Hp。若清除Hp感染，则儿童的慢性胃炎症状可获明显减轻。

Drumm前瞻观察了10例儿童Hp相关性胃炎，认为Hp主要侵犯患儿的胃窦部，内镜下见胃窦粘膜充血、水肿、糜烂以及胃窦部结节样改变。显微镜下可见粘膜固有层（少数为粘膜全层）以淋巴细胞和浆细胞为主的炎性细胞浸润。粘膜中的淋巴细胞和浆细胞为主的炎性细胞浸润。粘膜中的淋巴滤泡形成处，和胃镜下所见的小结节状改变有良好的相关性，被认为是小儿Hp感染的组织学特征。而成人Hp相关性胃炎中，极少见到粘膜小结节状改变和淋巴滤泡增生组织像。但在全部Hp感染的儿童中，均见到程度不同的慢性胃炎表现，其中77.8%为活动性，其中个别儿童已出现胃粘膜萎缩性表现，年龄最小者仅9岁。

3 Hp感染与儿童消化性溃疡

儿童消化性溃疡的病因不甚明了，发病率明显低于成人。以往的研究多集中于遗传等因素。Hp的致病性确认以后，学者们认识到，和成人一样，Hp同样是儿童溃疡病的促发因素和复发因素。一项对13例患儿十二指肠球部溃疡的前瞻性研究显示，在球溃疡发作前，所有患儿均有Hp相关性胃炎病史，而胃粘膜无感染的儿童十二指肠球溃疡极为少见。

在十二指肠球溃疡患儿的球部胃上皮化生灶可检出Hp，若将Hp清除则溃疡不易复发。推测球部粘膜上的胃上皮化生灶为Hp感染提供了适宜的生长环境，引致粘膜炎和粘膜破溃。有研究表明，儿童球溃疡的发病与成人相似，可能与高胃酸和高胃蛋白酶水平有关。实验室发现，儿童Hp相关胃炎与血清胃泌素及胃蛋白酶原Ⅰ及胃泌素水平下降。因此，Hp在消化性溃疡发病中，除可有直接作用外，还可能与“胃泌素—胃酸—胃蛋白酶原”分泌过多有关。

4 儿童Hp感染的诊断

一般认为，反复发作的上腹疼痛不适是儿童Hp感染的主要症状，且经治疗清除Hp后大多数患儿症状消失；但当73%的患儿Hp相关胃炎复发时，仅13%的患儿出现症状。这说明，感染了Hp的患儿在临床上常无症状，治疗的安慰剂效应起了作用。因此，儿童Hp感染的诊断，似比成人更需要依赖实验室检查。胃粘膜活检组织细菌培养是验证其它Hp诊断性检测的金标准，但因患儿难于接受内镜活检，且费时多，耗资大，不适宜临床应用。组织切片革兰染色、苏木精一伊红染色、改良姬姆萨染色均可部分地满足诊断需要，但其特异性和敏感性均逊于银染色法。而银染法繁琐、费时，不能常规使用。活检标本的快速尿素酶试验是临床上应用最广、最为便捷的成人Hp感染的诊断手段，但在儿童的敏感性低于成人，可能与活检组织内细菌数量较少有关。

尿素呼吸试验属非侵入性检查，¹³C尿素呼吸试验无放射性，结果准确，是诊断小儿Hp感染和鉴定治疗效果的良好方法。其缺点是费用大，难以广泛应用。以¹⁴C代替¹³C标记尿素可以大大降低费用，但因¹⁴C有放射性，应用于儿童尚有顾虑。在儿童用ELISA法检测血清HpIgG抗体，其特异性达99%，敏感性达96%，适于在儿童推广。值得注意的是，用ELISA法检测儿童Hp感染时，必须使儿童血清标准化，即以OD值超过正常儿童2个标准差为Hp感染的阳性标准，不宜使用成人血清标准对儿童检测结果进行评价。因为成人血清内抗体水平较高，很多Hp感染患儿有可能被漏诊。这一方法的局限是，不能确定现症感染，用于观察药物疗效时也不如其它方法反映及时。另外，小儿血清中HpIGA和HpIGM抗体含量较成人低，用于诊断小儿Hp感染敏感性差。

5 儿童Hp感染的治疗

目前，尚未找到可用于根除Hp感染的特异性药物。现阶段，主要采用2~3种药物联合治疗。儿童Hp感染的菌株一般耐药性低，治疗效果优于成人，常采用二联法，以避免增加药物反应的机会。铋剂常被用作控制Hp感染的核心药物，在多种治疗方案中，均有铋剂参加。一般认为，常规剂量的铋剂对儿童是安全的，医师们推荐最好选用次枸椽酸铋，因每服30mg次水杨酸铋剂相当于服了263mg的水杨酸，可对10岁以下儿童造成严重不良反应。个别超量服用者，还有可能造成肾功损害。

在1994年召开的第10届世界肠病学术大会和第7届欧洲胃十二指肠疾病与幽门螺杆菌大会上，对Hp的治疗推荐了两个基本治疗方案：

①以铋剂为基础的治疗：胶体次枸橼酸铋（CBS）+四环素+甲硝唑。连续服用10～14d，痊愈率可达80%～90%。如用于儿童，四环素应换用阿莫西林较为适宜。

②以奥美拉唑为基础的治疗：奥美拉唑+阿莫西林；阿奥美拉唑+阿莫西林+甲硝唑；奥美拉唑+阿莫西林+克立雷素。

以2周为一疗程，副作用少，尤适于胃酸分泌旺盛有溃疡病的患者。上述治疗方案如何应用于儿童，疗效如何，均有待于继续研究。值得注意的是：儿童Hp感染在治疗后的复发率可能高于成人。有人对清除Hp感染的患儿随访18个月，发现Hp感染的累积复发率达26%。这可能因Hp为“人—人”传播，小儿免疫系统发育不健全，可从家庭或其它密切接触者处受到再感染。因此，在对小儿治疗的同时，也应治疗与之密切接触的成人。

鉴于Hp感染是胃癌的始发因素已得到公认，人们推测：自儿童期即控制Hp的感染，不仅可预防治疗良性上消化道疾病，也有望降低胃癌的发生率。这正是我们应当重视儿童Hp感染诊疗研究的深远意义所在。

儿童幽门螺杆菌感染

1982年Warreh和Marshall将胃溃疡患者胃窦部在光镜下见到的细菌的活检标本接种在标准的非选择培养基上，经5d孵育，生长出一种未鉴定的弯曲菌，因为形态似弯曲菌，且与幽门炎症有关称其为幽门弯曲菌，1989年建议将幽门弯曲菌改名为幽门螺杆菌（Helicobater pylori, Hp），1990年悉尼举行的第九界世界胃肠病会议确认了这一命名；关于成人Hp研究较多，本人借助成人研究的某些资料，重点就儿童Hp感染的研究进展作一概述。

1Hp的生物学特性及致病机制

Hp为一种微需氧的螺旋形革兰阴性菌，一端带有数根鞭毛，由于此种特点使Hp易于定居在胃粘膜细胞表面，常聚集在细胞间的交界处，并深入到细胞间隙中。Hp能分泌高活性的尿素酶，将组织内渗出的尿素分解产生氨，中和胃酸，从而形成有利于Hp定居和繁殖的局部微环境。

Hp如何在强的胃酸环境下生存是致病的前提，Marshall等认为，Hp自身能分泌大量的尿素酶而尿素酶可分解胃液中的尿素而产生大量的氨从而使Hp周围形成“氨云”而起到一的抗酸保护作用。Hp致病机理：①Hp分泌的尿素酶，酯酶，蛋白水解酶和毒素等损伤胃十二指肠粘膜细胞，首先造成炎症，在胃酸，胃蛋白酶的作用下形成溃疡；②Hp的抗原激发免疫反应，局部的免疫应答可造成免疫性组织损伤；③Hp可阻抑胃酸对胃窦G细胞分泌胃泌素的负反馈作用，造成长期胃泌素增高和壁细胞增生，引起胃泌不经增多；Hp持续存在也是溃疡复发的基本因素。但致病机理尚未完全阐明：下列两种学说值得进一步研究加以证实：①Marshall提出，Hp—胃炎—溃疡的感染学说：初步感染Hp经过1周左右的潜伏期，约50%的人发生急性胃炎，如机体的免疫力不能清除Hp，则逐渐发展成癌；由于胃粘膜屏障破坏，易于遭受酸和胃蛋白酶的消化形成溃疡；②氨素毒性学说：Hp产生的大量尿素酶快速水解尿素生成氨，导致胃粘膜上皮细胞周围环境改变，形成跨膜氨梯度，并使Na+-K+-ATP酶活性降低，从而阻止H+由粘膜向胃腔内主动转运，促进胃腔H+逆向扩散形成炎症，进而粘膜发生自身消化，易于形成溃疡。

2Hp的流行病学

人群中的Hp感染非常普遍，其发生年龄较早，感染率随着年龄增加而上升，并与不同地域的社会经济，卫生状况和教育程度有关，Soollivoh报道：年龄＜20月龄的婴儿Hp抗体阳性率为15%，21月龄～39月龄为27%，40月龄～60月龄为46%；并且患慢性腹泻和营养不良的儿童阳性率为53%，明显高于年龄相匹配的健康对照组（26%）：Berkowie等观察某个弱智学校学员的Hp感染率，结果发现弱智者血清Hp抗体阳性率（60%～80%）明显高于智力正常者（20%）。但有关Hp传染源和传播途径尚不明了，Marshall（1988）认为家庭成员是Hp感染的直接来源。但在非人的灵长类猴胃中也分离出形态、DNA组成、超微结构与细胞脂肪酸成分均和Hp相似的弯曲菌，这究竟是自然感染Hp或管理人员的交叉感染尚不能定论。关于饮水作为传染源，因为不同的水源饮用生水的习惯在Hp阳性组和阴性组之间并无显著差别。关于传染途径，粪-口途径可能是Hp感染的主要途径，有一定根据。口—口传染途径也有报道；家庭成员之间的相互感染尚无一致性的结论。最近有报告猪和操作生猪肉是感染Hp的危性因素，这似从另一角度去支持粪—口途径传染的可能性。

3 儿童感染的临床特点和诊断

在成人和儿童CG和PV的胃粘膜中均检出Hp。现有资料表明，成人CG的胃粘膜Hp检出率为80%胃溃疡（GU）为60%～80%，十二指肠溃疡（DU）为80%～100%，儿童感染的情况与成人有相似之处，但还有其本身的特点，Drwmm等对67例儿童因胃肠道症状而作胃镜检查与活检中发现胃粘膜上有Hp移生，其中10例原发性胃窦炎中7例检出Hp，5例DU儿童的Hp均为阳性，49例组织学正常者均未检出。另据Bivbrdge等报道9例GV患儿仅1例检出Hp，可见儿童Hp与GU的关系不如成人显着。临床上值得注意的是，儿童Hp感染主要表现为腹痛，呕吐，甚至呕血，半数为急性发作，放射学检查多为胃膜皱壁增生；胃镜下以胃窦部微小结节为典型特征。

常用的Hp检测方法可分为两大类：第一类为有创伤的胃粘膜活检标本切片检查法：①细菌培养；需在微氧环境下，用特殊培养基3d～5d后观察结果较为准确；②组织学染色：以Warthin银染色效果最佳，但较烦琐；③尿素酶测定：采用试验盒，是一种快速、简便、较准确的方法。上述几种方法都必须经胃镜采取粘膜标本，因对小儿进行胃镜检查难度较大，往往不易接受。第二类为非创伤性检查法：①呼吸试验，用¹³C或¹⁴C标记的尿素呼吸试验，前者费用昂贵，后者费用较低，但有放射性，不宜用于儿童，②血清免疫学检测：常用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中的Hp抗体，敏感性好，特异性强，适用于儿童。

4 儿童Hp感染的治疗

目前用于治疗Hp感染的常用药物主要有：庆大霉素、铋剂、呋喃唑酮、羟氨苄青霉素、双氧水等，上述药物单独使用均达不到良好疗效，其根除率在50%以下，二联疗法则在40%～80%，而三联疗法可将根除率提高到90%左右。Oderde等对32例儿童Hp胃炎，每日口服羟氨苄青霉素50mg/kg和他咪唑20mg/kg共6周，于治疗结束后4周检查，结果Hp清除率为94%，Hp胃炎治愈率为84%。认为上述两药合用是儿童Hp胃炎最理想的治疗。还有报道对经雷尼替丁治疗后Hp阳性的小儿PU复发病例，采用上述同疗法，治疗4周～6周疗效也令人满意。目前，临床推荐成人Hp感染根除为三联治疗方案；即De-Nol120mg每天4次，加甲硝唑40mg每日2次，再加四环素500mg，每天4次，或羟氨苄青霉素500mg每天4次，疗程2周。认为铋剂是治疗Hp的核心药物，甲硝唑，四环素（羟氨苄青霉素）是最好配伍：但成人用的铋剂因其毒性而不适于儿童，但也有报道以枸橼酸铋每日7～8mg/kg联合羟氨苄青霉素治疗小儿Hp感染病例，取得较好疗效，无明显毒副作用，测定血清铋未达到毒性水平。另一问题是新发现Hp对甲硝唑有抗药性，很可能导致Hp根除失败。故儿童Hp感染的最佳方案有待进一步研究，从根本上根除Hp，提高疗效。

儿童幽门螺杆菌感染的特点

幽门螺杆菌（HelicobacterPylori, Hp）最初称为幽门弯曲菌（ Campylobacter Pylori,CP），由Warren及Marshall于1983年首先从人体胃窦粘膜活检标本中分离培养成功，并指出该菌可能是慢性胃炎（CG）和消化性溃疡（PU）的病原菌。最近对Hp的研究较多，儿童Hp感染病例中原发性溃疡或胃炎与Hp有密切关系，本文借助成人研究的某些资料，重点就儿童Hp感染的研究进展作一概述。

1Hp的生物学特性与流行病学

Hp为一种微需氧的螺旋形革兰阴性菌，一端带有数根鞭毛，由于此种特点使Hp易于定居在胃粘膜细胞表面，常聚集在细胞间的交界处，并可深入到细胞间隙中。Hp能分泌高活性的尿素酶，将组织内渗出的尿素分解产生氨，中和胃酸，从而形成有利于Hp定居和繁殖的局部微环境。

人群中Hp感染非常普遍，其发生年龄较早，感染率随着年龄增加而上升，并与不同地域的社会经济、卫生状况和教育程度有关。Sullivan等报道，年龄20个月的儿童Hp抗体阳性率为15%，21～40个月为27%。41～60个月为46%。并且患慢性腹泻和营养不良的儿童阳性率为53%，明显高于年龄相匹配的健康对照组（26%）。Berkowicz观察了某个弱智学校学员的Hp感染率，结果发现弱智者血清Hp抗体阳性率（60%～80%）明显高于智力正常者（20%）。但有关Hp的传染源和传播途径尚不清楚，现有资料提示，只有人和极少数动物如猴是Hp自然宿主，通过人与人或人与动物之间“口—口”或“粪—口”传播的可能性最大。还有学者对Hp的家庭进行了调查研究。Mitchell等对4例Hp阳性胃炎病人的家属包括祖母、父母、兄弟和姐妹共14人进行了血清Hp抗体检测，其中9人（64%）阳性，而年龄匹配的对照者仅13%阳性。Drumm等对有或无Hp感染儿童家庭成员检测血清Hp抗体，发现Hp阳性儿童的父母阳性率为74%，而年龄匹配的Hp阴性儿童的父母仅24%；Hp阳性儿童兄弟姐妹阳性率为82%，而对照者仅为14%。可见Hp感染有家庭聚集现象，通过家庭成员间的密切生活接触而存在“人—人”传播途径。此外，还存在胃镜检查和活检引起的Hp传染的可能性。

2Hp的致病作用

Hp是一有毒性和致病力的病原体，与各种慢性胃病有密切关系。Hp一旦粘附于胃十二指肠粘膜上皮细胞，可产生下列致病作用：①Hp分泌的尿素酶、酯酶、蛋白水解酶和毒素等损伤胃十二指肠粘膜细胞，首先造成炎症，在胃酸、胃蛋白酶的作用下形成溃疡；②Hp的抗原激发免疫反应，局部的免疫应答可造成免疫性组织损伤；③Hp可阻抑胃酸对胃窦G细胞分泌胃泌素的负反馈作用，造成长期胃泌素增高和壁细胞增生，引起胃泌素增多，Hp持续存在也是溃疡复发的基本因素。但致病机理尚未完全阐明，下列两种学说值得进一步研究加以证实：①Marshall提出Hp-胃炎-溃疡的感染学说：初次感染Hp，经过1W左右的潜伏期，约50%的人发生急性胃炎，如机体的免疫力不能清除Hp，则逐渐发展成CG，由于胃粘膜屏障破坏，易于遭受酸和胃蛋白酶的消化形成溃疡；②Hazell提出氨毒性学说：Hp产生大量尿素酶，快速水解尿素生成氨，导致胃粘膜上皮细胞周围环境改变，形成跨膜氨梯度，并使Na⁺-K⁺-ATP酶活性降低，从而阻止H⁺由粘膜向胃腔内主动转运，促进胃腔H⁺逆向扩散，形成炎症，进而粘膜发生自身消化，易于形成溃疡。

3 儿童Hp感染的临床特点及诊断

在成人和儿童CG和PU的胃窦粘膜中均检测出Hp。现有资料表明，成人CG的胃粘膜Hp检出率为80%，胃溃疡（GU）为60%～80%，十二指肠溃疡（DU）为80%～100%。儿童Hp感染的情况与成人有相似之处，但仍有其本身特点。 Drumm等对67例儿童因胃肠道症状而作胃镜检查与活检中发现胃粘膜上有Hp移生，其中10例原发性胃窦炎中7例检出Hp，5例DU儿童Hp均为阳性；49例组织学正常者均未检出。另据Kibridge等报道9例GU患儿仅1例检出Hp，可见儿童Hp与GU的关系，不如成人显着。临床上，值得注意的是，儿童Hp感染主要表现为腹痛、呕吐，甚至呕血，半数为急性发作；放射学检查多为胃粘膜皱壁增生；胃镜下以胃窦部微小结节为典型特征。

常见的Hp检测方法可分为两大类。第一类为有创伤的胃粘膜活检标本切片检查法：①细菌培养：需在微氧环境下，用特殊培养基，3d～5d后观察，结果较为准确；②组织学染色：以Warthin-Starry银染色效果最佳，但较烦琐；③尿素酶测定：采用试剂盒，是一种快速、简便，较准确的方法。上述几种方法都必须经胃镜采取粘膜标本，因对小儿进行胃镜检查难度较大，往往不易接受。第二类为非创伤性检查法：①呼吸试验：用1³C或¹⁴C标记的尿素呼吸试验，前者费用昂贵，后者费用较低，但有放射性，不宜用于儿童；②血清免疫学检测：常用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中的Hp抗体，敏感性好，特异性强，适用于儿童。

4 儿童Hp感染的治疗

治疗成人Hp感染的经验表明，根据Hp治疗后胃炎缓解，溃疡愈合且复发率低。所谓Hp的根除是指药物停用后至少4W无Hp。然而达到根除Hp这一目的颇为棘手。一些药物在体外对Hp有杀菌作用，但在体内却不满意。经过长期临床观察，目前疗效肯定的药物有三钾二枸橼酸铋（De-Nol）、甲硝唑、他咪唑(tinidazole)、匹氨苄青霉素（pivampicillin）、羟氨苄青霉素、四环素、庆大霉素、呋喃唑酮等。上述药物单独作用均达不到良好疗效，其根除率在50%以下，二联疗法则在40%～80%。而三联疗法可将根除率提高到90%左右。Oderda等对32例儿童Hp胃炎，每日口服羟氨苄青霉素50mg.kg^-1d^-1和他咪唑20mg. kg^-1d^-1共6周，于治疗结束后4W检查，结果Hp清除率为94%，Hp胃炎治愈率为84%。认为上述两药合用是儿童Hp胃炎最理想的治疗。还报道对经雷尼替丁治疗后Hp阳性的小儿PU复发病例，采用上述同一部法，治疗4周～6周，疗效亦令人满意。目前临床推荐成人Hp感染的根除为三联治疗方案，即：三钾二枸橼酸铋130mg，每日4次；加甲硝唑400mg，每日2次；再加四环素500mg，每日4次（或羟氨苄青霉素500mg，每日4次），疗程2周，并认为铋剂是治疗Hp核心药物，与甲硝唑、四环素（或羟氨苄青霉素）是最好的配伍。但也有报道以次枸橼酸铋每日7～8mg·kg^-1d^-1联合羟氨苄青霉素治疗小儿Hp感染病例，取得较好疗效，无明显毒副作用，测定血清铋未达到毒性水平。另一问题是新近发现Hp对甲硝唑有抗药性，很可能导致Hp根除失败。故儿童Hp感染的最佳治疗方案有待进一步研究，以从根本上根除Hp，提高疗效。

5．幽门螺杆菌与非溃疡性消化不良的研究

NUD幽门螺杆菌感染与慢性糜烂性胃炎的关系

非溃疡性消化不良non-ulerdyspepsia,NUD是由慢性胃炎、十二指肠炎及胃动力功能障碍所引起的常见症候群。约70%的慢性胃炎可伴有幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori Hp）阳性。本文着重分析Hp感染与胃粘膜炎症、糜烂的关系。

1 对象和方法

179例系本院1989-10～1991-04门诊经胃镜及粘膜活检有非溃疡性消化不良伴慢性胃窦部炎症糜烂的患者。其中男137例，女42例，年龄为28岁～78岁，平均为46.7岁。均有上腹部隐痛不适、嗳气、食欲不振、饱胀、恶心和（或）呕吐等症状。另外，30例慢性轻度浅表性胃炎患者作Hp检测。采用尿素酶快速诊断试剂。

2 结果

179例NUD伴慢性胃窦炎及不等程度糜烂者，包括萎缩性胃炎54例，表浅性胃炎125例，有75例（41.89%）Hp阳性。30例轻度慢性浅表性胃炎仅3例（10%）阳性，二组比较差异有显著性（P<0.05），说明NUD伴Hp感染者与胃粘膜炎症的程度有关。本组Hp阳性者，40岁以下者占45.2%(28/62例),40岁～60岁者为43.5%(40/92例),60岁以上者为28.0%(7/25例)。经统计学处理，3个年龄组的Hp阳性率差异无显著性（P>0.05）。

慢性胃窦炎伴糜烂者，属萎缩性胃炎者Hp阳性为40.7%(22/54例)，表浅性胃炎Hp阳性36.8%(46/125例)，二者之间差异无显著性（P>0.05），提示Hp感染与胃粘膜有无萎缩无明确关系。

病理检查在伴有不等程度的肠腺化生或不典型增生39例中阳性14例，不伴有的140例中Hp阳性54例。故伴或不伴有肠腺化生或不典型增生与Hp感染无关（P>0.05）。

3讨论

Hp感染与慢性胃炎、消化性溃疡及非溃疡性消化不良的关系已为大家所熟知。本组有NUD症状伴慢性胃窦炎及不等程度糜烂者Hp检出率为41.9%，提示胃炎活动及其程度与Hp感染有关，而年龄、症状轻重、胃粘膜萎缩程度、肠腺化生或不典型增生无一致性关系，与文献报道一致。Gad等报告186例NUD患者，内镜发现7.5%伴有胃炎和十二指肠球炎，其中83.5%Hp阳性，提示Hp感染在NUD伴胃、十二指肠炎的发病中有重要作用。

诊断胃肠道Hp感染有多种方法。晚近，Parodi等对NUD和溃疡患者各30例，测定胃窦粘膜内源性前列腺素E2和E2a含量，发现NUD伴活动性浅表性胃炎者的PGE2水平明显增高。Gad等应用细胞刷检测Hp，阳性率为67.2%，而活检阳性率为67.5%，认为刷检具有快速、简便和高度特异性。Loffeld等应用ELISA法检测70例NUD的抗HpIgG抗体，发现Hp相关胃炎的阳性和阴性预测值为100%，提示这一血清学检测有可能替代内镜检查。快速尿素酶检测法对活检标本中Hp数量越多，其反应时间越短，显色亦越明显，其灵敏度和特异性分别为62%和100%。

Hp感染可引起暂时性消化不良，但Hp清除后是否可改善症状尚未肯定。Karttunen通过107例本病患者研究Hp与胃部炎症及胆汁返流的关系，仅38%检出Hp，说明Hp的存在与否同胆汁返流无关。

本组NUD伴胃窦炎症、糜烂者75例Hp阳性。经用包括次枸橼铋、庆大霉素等药物治疗后，部分病例Hp转阴，内镜复查胃窦炎及糜烂明显改善，进一步说明二者之间的密切关系。但部分仍遗留NUD的某些症状。

NUD患者Hp慢性胃窦炎、糜烂之间的机理尚不清楚。Hazell等指出，Hp常聚集在胃上皮细胞连接部，在局部产生强活性的尿素酶，使粘膜上皮表面的尿素快速水解，产生的氨使局部区域的pH值升高，此种微环境的改变影响氢离子从胃腺腔经粘液层排泌入胃腔，刺激胃粘膜，导致胃粘膜糜烂和/或溃疡形成。Smith等提出，由于在胃腔至胃粘膜表面上皮之间存在一个可阻止氢离子逆扩散和Na⁺-K⁺-ATP酶控制的钠离子梯度，当Hp水解尿素后，高浓度氨使胃粘膜上皮细胞代谢率增高，消耗大量ATP，从而直接影响Na⁺-K⁺-ATP酶的转运功能。导致胃粘膜损伤和/或糜烂；或由于Hp合成的蛋白酶能裂解粘液中粘多糖聚合结构，从而影响胃粘膜表面粘液屏障的完整性，导致H⁺反弥散，使胃粘膜上皮易受胃内容刺激，发生糜烂或溃疡。而Hazell等认为，Hp对胃粘膜有特殊的亲和力，Hp有多根带鞘的鞭毛从菌体一端突出，以螺旋形式快速通过粘液层，吸附于胃粘膜细胞表面，产生毒素，导致粘膜损伤和炎细胞浸润。

对内镜诊断有糜烂性胃炎或十二指肠炎及Hp阳性者，应用次水杨酸铋及甲硝唑或羟氨苄青霉素治疗，可改善症状，但彻底清除Hp感染仍有困难，且可有复发。铋剂可促使胃粘膜增殖和释放PGE₂至胃腔。推测铋剂对胃粘膜的作用可能是通过粘膜前列腺素而发挥作用。部分NUD患者伴有胃肠运动功能障碍者应用Cisapride（西沙必利）治疗，可使胃窦及十二指肠动力改善，慢性消化不良症状明显好转。

幽门螺杆菌与非溃疡性消化不良

1988年国外一次消化不良工作会议将非溃疡性消化不良（NUD）定义为：“上腹或胸胃后疼痛、不适、烧心、恶心、呕吐或其他被认为与临近消化道有关的症状，持续4周以下，与运动无关，且排除局部或全身性疾病。”国内张锦坤提出的诊断标准为：①慢性上腹部疼痛、饱胀、烧心、恶心及呕吐等症状；②纤维内镜检查正常或排除了糜烂，溃疡或肿瘤等器质性病变；③实验室、B超及X线检查排除了肝、胆、胰器质性疾病；④追踪2～5年，2次以上胃镜复查 ，未发现新的器质性病变。其中1～3项为国际通用的标准，第4项为作者严格选择病例而制定的。1989年芝加哥国际专题工作会议提出NUD的分类为：反流样消化不良，运动障碍样消化不良，溃疡样消化不良，吞气症，特发或原发性消化不良5种类型。实际上包括了多种疾病，如慢性胃炎、十二指肠炎、胃神经官能症等。张氏对267例NUD病人和了胃镜检查结果正常17.6%；慢性浅表性胃炎35.9%，慢性体表萎缩性胃炎19.5%，慢性萎缩性胃炎19.5%，十二指肠球炎7.5%NUD在人群中的患病率20%～40%。临床上就诊者的2%～3%为消化不良，占胃肠病就诊者的20%～40%，国内消化不良症状行内镜检查的病人中约有一半以上（57%）为NUD。Hp感染流行病学研究显示，无症状人群中Hp感染率随年龄增长而增加，与胃炎发病随年龄增长而增多相似。因此Hp与NUD的关系自然受到国内外重视。从几个方面进行了Hp与NUD关系的研究，取得不少进展，但结果不尽一致，仍待深入研究。

1NUD患者Hp检出率

如Hp是NUD的病原，NUD是Hp的检出率应该明显地高于无症状的对照组。Lambert等收集6个国家11份研究报告，结果表明，成年NUD病人中Hp检出率为43%～87%。对照组为13%～36%。NUD患者阳性率在老年组为78%，儿童组为20～73%，对照组为4%～25%我们检测100例慢性胃炎，76%Hp（+）。李智等在广西用ELISA法对1194例城镇人口检查Hp的感染情况，发现有上消化道症状的Hp感染明显高于无症状者。但人群感染率亦高达40.2%，这些资料均支持Hp感染与NUD有关。但Hp感染亦与年龄、性别、地区、经济状况有较大的关系。如欧洲调查胃炎的发生率随年龄增长而增高，Hp感染也呈这一趋向。自然人群的Hp检出率也较高，如广州市区的56%，市郊为38.6%，兰州市区为55.3%。市郊为55.9%；哥伦比亚的调查甚至NUD时Hp的检出率低于对照人群。因此，NUD对Hp的检出率是否明显较高，两者有否确实的相关性，尚有待更多的深入细致的调查研究。

NUD的症状与Hp感染的关系也是受到关注问题之一，Shallcross搜集的10份资料中，5份认为Hp（+）与症状无关，另5份分别认为与返流症状，食后腹胀、打嗝等症状有关。我们研究的100例观察了腹胀，腹痛，反酸、嗳气，4种症状，其中Hp（+）75%有腹胀，Hp（－）为40%，两者有显著差异。夏华向等的结果也认为Hp感染与NUD患者腹胀，嗳气有高度相关性。为探讨这一问题，Talley搜集欧美发表的15份研究报道，其中两份资料（162例）认为Hp感染与腹胀有关，另外与打嗝（65例）返流（193例），溃疡样症状（200例），上腹痛（45例）有关者各1份。1份资料症状持续无改变（33例），与症状无关的报道7份（588例）。而由Borsh报道的49例认为腹胀予示Hp（－）。显然依据现有研究结果Hp感染与临床症状的关系难以确定。这也许与很多因素有关，如人群Hp感染率较高，NUD类型多，Hp 的不同菌株毒力不同，病人个体差异及其他因素，如约1/3肠易激综合征患者有消化不良症状。故这一问题也有待深入。

2Hp与胃粘膜炎症与功能

Tapken比较了胃粘膜中炎性细胞数量，结果表明，中性粒细胞浸润在有症状组明显高于对照组，并认为胃粘膜中性粒细胞绝对数增加为炎性反应，与NUD症状有关，Deluca甚至提出“无活动性胃炎，就消化不良”的概念，消化不良的症状是由胃、十二指肠活动性炎症与胃酸共同作用所致。目前多数资料表明，Hp感染与活动性炎症呈正相关。如夏氏报道NUD患者胃窦粘膜固有膜炎性细胞总数，Hp（+）者较Hp（－）者为高，且随Hp数量增加而增加，同时提示中性粒细胞及嗜酸性粒细胞计数只有在Hp数目达一定程度才有显着性增高，从而使炎症呈活动性改变。我们的研究结果也表明Hp的感染与胃粘膜的炎症程度正相关。因此认为Hp是不同程度慢性胃炎的主要病因。但也有认为Hp似乎为低毒性，几乎不产生炎症，Hp感染在许多人中几乎是一种共栖现象。目前淍缺乏更多的证据证明胃粘膜的炎症程度与NUD的临床症状密切相关。另外，NUD的临床表现时好时坏，而慢性炎症反应不可能波动得如此之快。因此，关于Hp与胃粘膜炎症的关系尚未定论。而且NUD临床炎型多样，Hp与哪种类型有关，那些因素决定病症状的出现与否，等等诸多问题尚待解决。

已有一些关于Hp感染对胃运动功能影响的研究，如Moord等认为胃窦胃炎的严重程度与餐后胃动力描记的结果呈相反的关系。因此认为胃粘膜炎症对胃运动有影响。Lambert搜集38份有关伴胃窦胃炎Hp（+）的NUD病人胃运动功能的研究报道，结果餐后胃排空减慢者有2份资料，口一盲通过时间Hp（+）与（―）者无差别1份资料，Hp（+）及Hp（―）组餐后胃排空减慢1份，Hp（－）也表现排空缓慢1份，排空正常者有2份资料，95%的NUD病人餐后窦部收缩减少1份资料。其结果不同也许与所有方法不同有关。如能进一步深入比较研究Hp根除或清除前后的胃运动功能，将有助于这一问题的阐明。

3 根除Hp对NUD的影响

如Hp是NUD的病原菌，那么根除Hp后NUD的临床表现应该明显改善。针对这一问题国内外进行了不少研究。如Larnbert搜集了来自美国、英国、斯堪的那维亚地区的13组计657例Hp（+）的NUD，经碱式枸橼酸胶状铋（CBS）或二联、三联治疗1周～8周，Hp清除率45%～90%，以分析清除Hp与组织学胃炎改变及症状转归。结果组织学胃炎均改善，486例临床症状改善88例治疗前后无不同，83全Hp清除与未清除者症状均改善Borody等用三钾二枸橼酸终合铋（TDB）治疗Hp（+）的NUD，并与安慰剂比较，观察4周，表明治疗组腹胀，烧心，腹痛诸症状明显改善。但Loffeld等报道55例Hp相关性胃炎，用CBS及安慰剂治疗，结果两组无差异。Patchett等也未证明根除Hp可使症状改善。Bamford等使用CBS或氨基苄青霉素治疗30例Hp（+）的NUD，并与安慰剂比较也未见明显差异。因此，根除Hp可否使NUD的症状改善这一问题，也有待于进一步确定。

4Hp的致病机理

学者们从不同角度提出两种不同假说。一是胃泌素相关假说，即Hp感染—胃泌素释放增多—胃酶增多—胃十二指肠粘膜损伤。一是漏屋假说，即上皮细胞和粘液胶组成的胃粘膜屏障代表屋顶，可保护粘膜下组织不受胃酸（丙）的侵蚀，粘膜完整性的破坏使H⁺离子反渗（水洼形成），导致了粘膜下层损害。Hp感染产生很多产物，包括酶类如尿素酶、氧化酶，过氧化氢酸，脂酶，磷脂酶，蛋白酶等，及炎症反应产物导致胃、十二指肠粘膜完整性破坏。尿素酶分解尿素成氨使局部Hp升高，为Hp产生的其他酶提供合适的Hp，氨还对胃粘膜有破坏作用，Hp感染的胃液内磷脂酶A2（PLA2）活性显著高于Hp（―）者，扫描电镜发现Hp感染者胃粘膜层中磷脂结构破坏和减少，Hp感染的胃炎胃粘膜疏水性降低，PLA2可使粘液层中的磷脂酸胆碱和磷脂酰乙醇胺转变为溶血卵磷脂及溶血磷脂酰乙酵胺。同时溶血磷脂酰胆碱可生成血小板激活因子，加剧胃粘膜损害。Hp滤液中含有蛋白酶，使粘液层中的粘蛋白多聚体解体，破坏粘液屏障。Hp可产生糖基硫脂结构中的硫酸酯，不但破坏了粘液层中的有机结构，也有利于Hp的定值。

Hp的侵入导致炎症反应，产生与炎症有关的介质，如前列腺素、白三烯、血管活性胺、氧反应介质，以及单核细胞，中性细胞趋化因子，细胞毒素，白三烯B2（LTB4）是一种化学趋化因子和胃粘膜毒性因子，Hp（+）者的胃粘膜较阴性者含有更高水平的LTB4，且在急性炎症反应的胃粘膜中LTB4水平也显著高于无炎症者。因此内源性LTB4至少是Hp相关胃炎的促进因子。Hp相关胃窦炎嗜酸性粒细胞浸润明显增加，且其数量与慢性胃炎的炎症程度相关，聚细胞局部分泌的IgA可刺激嗜酸细胞脱颗粒释放阳离子蛋白质，包括大分子碱性蛋白，可损伤胃粘膜屏障。

但不同菌株产物很不一致，通过质粒纵切（Plasmid-profile typing）等方法检查证明不同的菌株毒力不同，并非所有菌株均可引起感染，粘膜改变及可能出现的症状，是否是感染的个体间有很大差异，或不同菌株导致了不同的临床症状或反应尚不清楚。

总之，Hp与NUD的关系是一个值得深入研究的课题。也许Hp感染并非NUD的唯一病原，而是引起NUD的多种因素之一。就当前临床实际，对Hp（+）的NUD病人，除了进行严格的有对照的抗Hp治疗研究以外，不提倡积极杭Hp治疗。

基础篇

1．幽门螺杆菌的分子生物学研究

幽门螺杆菌的分子生物学研究现状

自从1983年Marshall和Wsrren报道从人胃粘膜活体标本中成功的分离出幽门螺杆菌（helicobacter pylori, Hp）以来，国内外学者对此进行了广泛深入的研究。近年来分子生物学技术初步显示了它在流行病学、分子遗传学学及其临床应用上的价值。

1Hp感染的诊断及Hp根除的评估

诊断Hp感染的方法很多，包括快速尿素酶试验、Warthin-Starry银染以及细菌培养，这些方法的共同缺点是不能达到足够的敏感性以确定治疗后细菌是否被彻底根除，也不能确定Hp感染的来源和传播途径。¹³C和¹⁴C呼吸试验方法虽然可靠，但费用较高。血清抗体的检测则不能确定是否有新近感染，也不以评价治疗的效果。而近年来发展起来的分子生物学技术简单、快速、可靠，不仅对Hp的诊断具有高度敏感性和特异性，而且还可以用于对Hp的分型。

最早的研究方法是用限制性核酸内切酶直接消化培养，鉴定后的Hp染色体DNA，经过琼脂糖电脉按大小分离所得的片段，来比较各株细菌的基因组DNA酶切图型。Langenberg等报道了用HindⅢ限制性内切酶分析Hp的全基因差异。Wetherall等用斑点杂交法评价了同位素与非同位素标记Hp全基因探针的实用性。Mortomi等通过DNA-RNA杂交方法，用人工合成的Hp特异性寡核苷酸探针，同16SrRNA序列互补，证实这种探针比较敏感，可以检出少至5000个～10000个Hp。

近年来聚合酶链反应（polymerasechain reaction，PCR）技术已经用于Hp的诊断，该技术的敏感性比寡核苷酸探针增加了100倍，可以检出少至100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的部分序列已经测出，为PCR特异性引物的选择提供了依据。我们以一对与16SrRNA基因互补的寡核苷酸为引物（CP₁/CP₂），建立了从胃粘膜活组织标本中检测Hp感染的PCR技术。用该方法检测Hp标准菌株NCTc 11637，NCTC11848及50株从临床病人胃粘膜活组织中分离的Hp菌株均产生450bp的片段，其敏感性为0.1pg的HpDNA，相当于100个细菌细胞，而对12株非Hp菌株（包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎双球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌及空肠弯曲菌NCTC11351）以及无Hp感染的人胃粘膜细胞呈阴性反应。我们还用PCR检测了96例因上消化道症状而行胃镜检查的患者，结果表明PCR检查的Hp阳性率高于常规检查法。我们还对17例经不同方案治疗后用常规方法检查（尿素酶试验、银染、及培养均阴性）而被认为Hp被根除的病人，用PCR检查发现4例Hp阳性。以往我们对一些常规方法未能检出而实际上还存在Hp的病人，误认为Hp被根除而放弃治疗，这些病人短期内Hp再现实际上是治疗不彻底，这对于指导Hp感染的治疗有十分重要的临床意义。

PCR还可以从石蜡包埋的胃粘膜组织中检测Hp，因此可以对胃及十二指肠患者进行回顾性研究。PCR的另一个优点是可以成功地检出人胃粘膜以外的用常规方法不能检测的Hp，包括胃液、唾液、牙菌斑及粪便中的Hp。用巢式引物（nested primer）双扩增(reamplification)或同时在引物扩增序列内部选择一寡核苷酸作探针，对PCR扩增产物进行southernblt检测，则可使敏感性增加10倍～100倍，可检出难以培养的球形Hp。

2 在Hp流行病学研究中的应用

因为PCR检测Hp的敏感性高、特异性强、检查快速；HindⅢ限制性内切酶可以分析Hp全基因差异，可以用它来鉴定Hp菌株，所以分子生物学技术作为Hp流行病学的研究工具，其敏感性和特异性远远超过Hp的常规检查法，因而有利于确定Hp感染的来源和途径。Langenberg等报道1例在前几次胃镜检查时经细菌培养和组织学检查证明为Hp阴性的患者，在进行另一次胃镜检查后则变为Hp阳性。经DNA内切酶分析发现其HpDNA酶切图型完全相同，证明了经内镜检查而引起人与人之间的医源性传播。宋敏等用巢式PCR从唾液中检出了Hp，说明口—口的传播可能是Hp在人与人之间传播的另一条途径。

3Hp的遗传学研究

近年来国外文献报道，Hp染色体DNA限制性内切酶分析以及Hp的核糖核酸型可以作为Hp菌株的鉴别。Langenberg等用限制性内切酶DNA分析法研究发现，从不同病人分离的Hp菌株酶切图谱各不相同，而从同一病人1年～2年内连续分离的多株Hp，其DNA酶切图型稳定不变，因此，利用限制性内切酶的DNA消化图谱（DNA digest pattern）可以鉴别抗Hp治疗停药4W后再次出现的Hp是复发（recrudescence），还是新菌株再感染（reinfection）。

我们最近建立了PCR单链构象多态（single-strand conformation polymoophisms,SSCP）技术。该方法简单快速、敏感性强、图型简单、易于比较。PCR-SSCP不仅可以用于大规模Hp流行病学调查，而且能准确评估治疗后再现的Hp是复发还是再感染。我们对10例Hp阳性患者采用抗Hp治疗，比较治疗前后分离的菌株染色体DNA203bp片段SSCP图型，发现9例病人治疗前后的菌株具有相同的单链构象，说明是治疗上的失败，而不是新菌株现感染。

利用分子生物学技术来检测Hp才刚刚起步，对于Hp的诊断、致病机理、遗传学、流行病学及其与胃癌的关系和感染治疗的研究中还存在许多问题需要用分子生物学去研究，证实和阐明。特别是PCR技术发展迅速，日臻完善，在Hp的研究中，将有着广泛的应用前景。

幽门螺杆菌生物学性状的研究

慢性胃病（B型胃炎、胃溃疡等）及十二指肠球部溃疡等一类常见病、多发病，长期以来，其病因尚未阐明。1983年澳大利亚学者Warren和Marshall从慢性活动性胃炎病人胃粘膜活检标本中发现并分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori Hp）后，引起了全世界消化病学与有关基础科学的普遍关注。几年来，各国对Hp的研究迅猛发展，其中主要为临床实用性研究，有关Hp生物学特征相对较少，至于Hp具体致病机理则更少。

我们是从1985年开始与上海市消化疾病研究所合作开展这方面研究工作的，我们开初的工作（1985～1986）主要有：①在国内最早分离培养成功了Hp；②对上海地区各种慢性胃病中的Hp检出率作了调查；③用双盲法探讨痢特灵、灭滴灵治疗Hp阳性慢性胃炎的疗效，并验证Hp感染与慢性胃病人发病关系。上述研究结果表明：①我国Hp感染率与各种慢性胃病的关系和文献报道的同样广泛和密切；②根据Hp的检出率与各种慢性胃病的高度相关性、Hp感染者经适当药物治疗后与临床症状缓解，以及病理表现改善的密切程度，支持慢性胃病的Hp感染学说。1988年，我们又用Hp超声粉碎的抗原以ELISA法测定了Hp感染的慢性胃炎及消化性溃疡病人、健康体检者和新生儿血清中的抗Hp-IgG抗体，结果表明：①B型胃炎及消化性溃疡病人的阳性率明显高于A型胃炎及健康体检组；②体检组中抗Hp-IgG阳性率随着年龄组的增长而升高，30岁～50岁组达最高峰，70岁以上又稍有下降，③新生儿组抗Hp-IgG阳性率反比1/2岁～10岁年龄组为高，接近成人水平。其抗体可能通过胎盘来自母体中，提示Hp是后天获得感染。上述人群中，抗Hp-IgG抗体水平调查的结果又增强了慢性胃病的Hp感染之说。

1987年我们微生物学教研室以“弯曲菌样细菌(Campylobacter-like organisms,CLOS)的生物学地位及致病物质的研究”课题名称申请得到国家自然科学基金的资助。由此对Hp的生物学性状作了比较全面系统的研究，企图对Hp的生物学地位及致病机理作一些探讨。

1 材料和方法

1.1 材料

①标本1985年5月～1989年10月分别取自上海市仁济医院、纺二医院、新华医院有上消化道主述病人的内窥镜检查标本。②菌种Hp均分自病人。除药敏试验和与空肠弯曲菌的交叉反应者外，都以88065，88073，88082，88109，88152五个菌株作为代表进行试验研究。

参考菌种：空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni,CJ）CJ-3276株和结肠弯曲菌F（Campylobactercoli,CC）CC-3278株由法国Borbeaux儿童医院Megraud博士惠赠，空肠弯曲菌CJ-S131由苏州医学院微生物学教研室提供。胎儿弯曲菌（Campylobacter fetus,CF）日本大阪大学微生物学研究所三轮谷俊夫教授惠赠。

1.2 方法

1.2.1 光学显微镜检查 取胃粘膜活检标本或菌种培养物在洁净玻片上涂薄膜。自然干燥，加热固定，革兰染色后油镜检查。另取胃粘膜活检标本作石蜡包埋切片，四苯胺兰（touidine blue）染色镜检。

1.2.2 分离培养 空肠弯曲菌选择性基础琼脂（上海市卫生防疫站生产）中补充以10%羊血和1%可溶性淀粉，并每1000ml培养基中加入1ml万古霉素（10mg/ml），1mlTMP(5mg/ml)和1mloctidione(5 mg/ml)制成平板后，置Queue三气培养箱（美国产），气体调节至5%O2，85%N2和10%CO2，37°C培养3d后观察。

1.2.3 生化鉴定 主要参考 Cliodna等方法：①氧化酶反应 用竹签挑取血平板上可疑菌落至已被1%盐酸二甲基对苯二胺（E.Mer-ck,Darmstadt产品）溶液浸透、并预先干燥过的滤纸上，10s内出现深紫红色为阳性。②触酶反应 用含3%H2O2液的毛细玻管碰触血平板上菌落，有气泡升起为阳性。③尿素酶反应 将含有菌落棉拭插入尿素肉汤中，30s内棉拭呈粉红色为阳性。④DNA酶试验 在含有甲葳胺兰核酸琼脂的平皿上打孔后，将细菌悬液加于孔中，37°C培养2h后观察结果。小孔周围出现透明小圈者为阳性。⑤碱性磷酸酶反应 用0.02mol/LpH8.0Tris-HCL洗下细菌菌落。加入0.5ml1%磷酸对硝基苯脂（Beckman产品），37°C水浴1 h ,观察结果。呈黄色者为阳性。⑥亮氨酰胺肽酶反应 取小试管2只，1只测定管加待测菌液（约3×1010cfu/ml）0.05ml，另1只空白对照管加H2O0.05ml。然后各加0.2M磷酸缓冲液（pH7.2）0.45ml和基质液（亮氨酰-β-萘胺盐酸20mg溶于H2O25ml，加入0.2mol/LpH7.2的磷酸缓冲液25ml，充分混匀）0.5ml。37°C水浴30min后各加入40%三氯醋酸0.2ml。充分混匀后4000r/min离心沉淀10min。从测定管和空白对照管中各取上清液0.5ml分别装入另2只试管中，并分别加2NHCI0.5ml和0.2%NaNO20.5ml。充分混匀，室温（20°C）中静置10min。再各加0.5%氨基磺酸胺10ml。混匀后，室温（20°C）静置10min 。最后各加N-萘乙烯二胺二盐酸盐溶液[称取N-（1-萘）乙烯二胺二盐酸（分析纯，瑞士，Lichtemptindicht生产）100mg，溶于95%乙醇200ml中，冰箱保存可稳定1个月。临用时，以95%乙醇稀释10位后使用] 2.0ml。20min后观察结果。呈紫色为阳性。⑦马尿酸盐水解试验 接种1环48hCJ/CC培养物或72hHp培养物于0.4ml含1%马 尿酸盐水溶液的小试管中，混匀，放置37°C水浴2h，再轻轻倒入0.2ml茚三酮试剂（3.5g茚三酮溶于100ml丙酮:丁醇=1:溶液）于各管。置37°C水浴，经10min后看结果。深紫色为阳性反应。

1.2.4 抗菌药物敏感性试验 用琼脂稀释法测定13种抗菌物（青霉素G、链霉素、庆大霉素、红霉素、先锋霉素V、四环素、痢特灵、灭滴灵、TMP、洁霉素、次硝酸铋、多粘菌素B、万古霉素）对30个（Hp）菌株（Hp菌株号：85025，85084，85114，85117，85120，85143，85187，85485，85507，85508，85524，85553，85558，85560，85562，85568，85596，85595，85621，85623，85625，85629，85634，85639，85643，85647，85648，85660，85663，85677）的最小抑菌浓度（Minimal inhibitionConcentration,MIC）。①菌液准备：待测菌株落分别用生理盐水洗下，比浊调整至108fu/ml。②药敏平板制备：分别取200ul不同种类、不同浓度的抗菌药物稀释（抗菌药物的浓度为0.05μg～100μg/ml的对倍稀释液的对倍稀释系列）置于空的无菌平皿（φ9 cm）中。每只平皿加入加热融化的血琼脂10ml，轻轻摇动使培养基与抗菌药物均匀混合。待琼脂凝固后备用。③细菌拉种：用多点接种器（M2T-P）将菌液点种于上述每只药皿平板上。每个平板点种25个菌种。置微需氧环境中培养3d后观察结果。如Hp在某个抗菌药物浓度的培养基上生长，而在前一个大一倍的尝试的培养基上不长，则以此前一个平板中的抗菌药物尝试为该菌的MIC。

1.2.5 菌种保存 挑取3～5环分纯的Hp菌种（菌号：88064，88065，88073，88075，88077，88082，88099，88108，88109，88152，88223，85289，85682，85688）于装有灭菌脱脂牛奶的Eppendorf塑料离心管，置-70°C冻存。经1年后复苏鉴定。

1.3 超微结构的研究

以Hp88065，88073，88082，88109，88152菌株及CJ-3276，CJ-131、CC3278参考菌株制成负染和超薄切片，置H-500透射电镜下观察。取新鲜采集的胃粘膜活检标本经固定后在临界点下干燥，真空涂金。在JEOLJSM0S40扫描电镜下观察。

1.4 Hp的DNAG+Cmol%与菌体脂肪酸组成测定

1.4.1 细菌DNA中G+Cmol%含量的测定 主要参赞丁鉴等高压液相色谱测定。①Hp DNA的提取；将细菌悬液经4000e/min×15离心沉淀，用0.15mol/LnaCI-0.1M EDTApH8.0 溶液（SE液）洗一次后，重悬浮于10mlSE液中。加溶菌酶，使终浓度为2％的SDS，放60°C水浴15min。用等体积酚／氯仿·异戊醇（体积之比为3/1）抽提二次后，再用等体积氯仿/异戊醇（体积之比为24/1）和等体积乙醚各抽提一次。水相在pH7.8,10mmol/LTris-HCI,1mmol/L ED-TA中透析4°C过夜。透析后的抽提液中加入经100°C、15min处理的Rnase，使终尝试为200ug/ml，37°C,2h。加蛋白酶K，终尝试为200ug/ml，37°C轻摇2h。用等体积酚/氯仿（体积之比为1/1）和等体积氯仿·异戊醇各抽提一次。水相加NaCl和0.1M，溶解后，加入2倍体积的冷无水乙醇。混匀后，①-20°C，13000g×30min，得DNA沉淀。②游离碱基的制备：在DNA沉淀物中加入100μl72%高氯酸，使完全溶解后，移入安瓿中，熔封管口。100°C水解1h，放入4°C冰箱待用。③高压液相色谱测定：用Shimadzu LC-4A高压液相色谱义；柱为不锈钢制，4.6mm×250mm；填充材料为Nucleosil C18,5um。流动相为0.1mol/L pH3.9甲酸钠，流速0.8ml/min。压力120kg/cm2,柱温40°C检测器为UV254nm,0.02AuFs。④标准溶液的配制：用电子称（Sartorius research）分别准确称取腺嘌呤（A，,英国BDH产品），嘌呤（G，Sigma产品），胞嘧啶（C，中科院生化所产品）和胸腺嘧啶（T，上海市化学试剂公司产品）。加数滴磷酸，以高压液相色谱仪标定出峰位置。⑤碱基物相对克分子样正因子的测定和G+Cmcl1%的计算：

表1 四种碱基的分子量、毫克/分子浓度及相对克分子较正因子

a..相对克分子校正因子（f′m）的测定标准A，T，G，C混合溶液，在上述色谱条件下进样，测定每个峰面积。按下式计算A、T、G、C的相对克分子样正因子（fm）。

式中A峰为面积，m为进样量，M为分子量，下标S为内标物（本实验以A为内标物），i待测碱基。

b.G+Cmol%计算：10μl各样测样品进样后，测出峰面积，乘上相对克分子校正因子（f′m），然后归一化，用下式

计算，求得其分子百分数。

1.4.2 细菌菌体脂肪酸组成分析 主要参考I toh等方法①标准品的处理 在脂肪酸标准品(Sigma产品，EC10A偶炭链脂肪酸，OC-9奇炭链脂肪酸，UN-10不饱和脂肪酸)中加入4ml25%盐酸-甲醇后，再加入1ml NaCl溶液。用4ml已烷：乙醚=1:1（体积比）溶液萃取3次。有机相用N2吹干，最后用0.5ml已烷定量。取1μl作色谱分析，标定各峰位置。②样品的处理：在干重为10mg～20mg的细菌中加入生理盐水1ml，混均后转入磨口玻璃管中。加入含15%NaOH的水-甲醇（体积比为1:1）溶液2～4ml后，在100°C水浴中加热30min。稍冷后，加入6NHCl,使溶液pH达2.0。加入25%HCl-CH3OH溶液5ml，100°C水浴加热15min。冷却后，用N2吹干HCl至原体积的一半。加入1ml饱和NaCl溶液。用12ml1:1的乙醚-已烷溶液分三次萃取，萃取后的有机溶液放入有塞磨口离心管中。70°C水浴蒸发溶液至1ml左右。用N2吹至0.5ml左右，加入少量Na2SO4去除残余水分。4000r/min离心15min后，取上层有机相，加入1ml已烷溶解。取1μl作色谱分析。③气相色谱测定条件：色谱仪为日本岛津公司的GC-9A，色谱柱为2%的OV-101，80～100目，ChromosorbAW，W，DMCS。操作条件：柱温180°C～230°C，程序升温，升温速率4°C/min，进器温度和检测器（FIS）温度为260°C，RANGE=102。氮气压力为0.4kg/cm2，速度为30ml/min，空气压力为0.3kg/cm2。

1.5 Hp菌体蛋白电泳与与CJ间抗原交叉反应

1.5.1 Hp菌体蛋白电脉 ①样品的准备:将细菌菌苔用生理盐水洗下.在超声粉碎仪上粉碎(dute cycle 50%,time 6min。Output Control8,pulse)。然后10000r/min离心10min，4°C。上清蛋白定量。用0.01ml/LpH7.2磷酸缓冲液稀释至2mg/ml，-20°C保存。②SDS-PAGE：主要参考Blaser的方法。用pH8.3 Tris-甘氨酸作电泳缓冲液：分离胶浓度为10%；每份样品加20μl；以低分子量标准蛋白（MV17500～94000，中科院上海生化所东风试剂厂产品）作标准蛋白；在10mA恒流下电泳；考马斯兰G～250染色。

1.5.2 用Hp耐热抗原致敏的红细胞与CJ的Penner分型血清作间接血凝，测定Hp与CJ之间的交叉反应。①CJPenner分型血清的准备：CJ的Penner分型血清（由卫生部药品生物制品检验所、上海卫生防疫站及苏州医学院微生物教研室联合研制）由苏州医学院微生物学教研室提供。先将25个免疫血清分别根据特异性较强或交叉反应较多的血清组合在同一多价血清内。共分6组（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ），Penner5，29，45，52型不包括在多价血清内，每种血清使用时效价稀释成1:1280二种浓度备用。②Hp耐热抗原致敏的红细胞的制备a.Hp耐热抗原制备：将血平板上洗下的28种Hp菌株（菌号：85135A，85158，85130，85132，85155，85138，85084，85067，85031，85070，85093，85120，85157，85071，85123，85141，85113，85134，85070，85117，85142，85134B，85085，85114，85118，85030，85111，85117）的菌液，均调整至9×109／ml浓度，100°C加热1h，3000r/min离心沉淀20min。取上清备用。B.羊红细胞制备：取新鲜脱纤维蛋白羊血，离心沉淀，弃上清用pH7.0磷酸缓冲液洗3次后，3000r/min离心沉淀10min，弃上清。用PBS配成1%红细胞悬液。C.致敏：分别将28种1ml的耐热抗析与等量1%羊红细胞悬液混合均匀置37°C水浴1h。3000r/min离心10min。弃上清。用PBS洗三次，最后配成0.5%致敏红细胞悬液。③交叉凝集反应：用96孔U型塑料板，纵向分别加入Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ组多价血清及5，29，45，52型的单价血清。横向单行为1:640浓度的血清0.25μl，双行为1:1280浓度的血清0.25μl。如此准备好8块已添加CJ分型血清的96孔塑料板。然后在每两行为一组的CJ分型血清中加入一种Hp耐热抗原致敏的红细胞悬液，每孔0.25μl。待28种Hp耐热抗原致敏的红细胞悬液均加妥后，将96孔塑料板均置微型振荡器上振荡1min～2min ,使充分混匀。置37°C孵育2h后观察结果。根据凝集程度，以++++、+++、++、+、± -符号记录结果。以血清最高稀释度呈现“++”以上程度凝集者为阳性。如上交叉凝集反应中先以多份血清进行粗筛，若效价超过1:1000者，再以单价血清进行分型，效价≥1:1280者作为阳性。

2 结果

2.1 Hp的基本生物学性状

2.1.1 光镜下形态结构 Hp为“S”形、“U”形或弧形杆菌。菌体宽0.3～0.5μm,长1.5～5.0μm。大多大小均匀，形态典型，革兰染色阴性。Hp较CJ/CC稍粗，两端钝圆。在陈旧培养物中，Hp常变成圆球体，在革兰染色下呈现大小不一、染色深浅不均，周围界较模糊的特征。在胃粘膜活检标本直接涂片中，多数存在于着色较浅的粘液带中，常呈鱼贯状排列，在Hp密集处，甚少杂菌混杂，在着色的组织液背镜下，Hp菌全周围常呈现有微荚膜样结构。在病理组织切片中可见，Hp多数存在胃粘膜上皮细胞表面，特别是在胃小凹。在病理切片中尚可见到在胃粘膜表面有Hp存在的附近部位常有大量中性粒细胞、浆细胞等炎症细胞的浸润。在胃的肠腺化生区域很难找到Hp，但是在十二指肠的胃化生区域却能找到Hp。

2.1.2 菌落特征及细菌动力 在微需氧条件下，经37°C72h培养，Hp形成较小菌落，直径＜1mm，呈灰白或灰色，边缘整齐，隆起的圆形菌落。打开平皿有一股特异的气味。新鲜的菌落制成湿片在暗视野下可见Hp呈螺旋状迅速向前的运动。亦可见翻滚运动。

2.1.3 生化反应特征 Hp的生化反应特征见表2。Hp均有氧化酶、触酶、尿素酶、DNA酶、碱性磷酸酶和亮氨酰酞酶，而马尿酸盐试验均阴性，CJ和CC仅有氧化酶和触酶，而CJ-S131能分解马尿酸盐。

2.1.4 Hp对抗生素的敏感性 25株Hp对13种抗菌药物的药敏性见表3。

表2 Hp、CJ和CC生化反应

表3 25株Hp对13种抗菌药物的药敏结果

从表中可知所有被检的Hp菌株对红霉素、链霉素、四环素、庆大霉素、青霉素G及痢特灵敏感，其中特别是四环素、青霉素G和痢特灵的敏感性尤甚，MIC90分别是0.2,0.1及0.2。MIC50均＜ 0.05。Hp对TMP、多粘菌素B、万古菌素及灭滴灵耐药，大部分菌株的MIC均＞100。

2.1.5 菌种保存 15株Hp菌株，经-70°C冰箱保存一年后复苏，14株存活，对存活的14株作直接涂片革兰染色，油镜检查，其中的13株形态不变，1株成圆球体。我们又对这13株进行了氧化酶、触酶、尿素酶、DNA酶、碱性磷酸酶试验，13株Hp阳性，这与保存前相同。

2.2 Hp的超微结构

从不同病人胃粘膜上分离得Hp的形态结构基本一致,呈”S”形弯曲、弧形或稍直，偶见分枝状。一般表面较光滑，一端或二端（多数为一端）具有2～6条带鞘鞭毛，长度稍长于菌体。带鞘的鞭毛直径在30mm左右。每一鞭毛基部与菌体细胞膜上直径约50mm的圆球状结构相连。菌体末端鞭毛基础结构内侧，有一宽达200mm～400mm的电子密度明显降低区域，其基底部无明显的细胞膜结构界限。在Hp负染标本中，部分菌株在菌体周围可见大小均一、排列整齐的上百个“指”状突起，似直接为外膜的组成部分，与菌体内部结构无明显直接关系。在参考菌株中，CJ与CC末端呈圆锥体样，稍尖，顶端明显地呈吸盘样结构。CJ与CC均有单根无鞘端鞭毛从顶端的吸盘样凹陷的中心伸出。鞭毛根部均未见电子密度明显降低区域。

在胃粘膜活检标本的超薄片中可见：一般情况下，胃粘膜上皮与粘液层间不存在细菌。若出现细菌，常为大小、形态较统一的、都呈弯曲样特征的菌群。多聚居在胃小凹中或上皮细胞与上皮细胞连接处，亦常常镶嵌在微绒毛之间。偶见Hp在局部的胃粘膜上皮上定位似有明显的方向性。Hp与粘膜上皮的粘附方式有三种：Hp通过鞭毛顶端直接插入或粘附在胃粘膜上皮细胞表面；Hp菌体怀胃上皮细胞间保持一定的间距，借无数的细丝状菌毛样网状结构使两者互相粘附；Hp菌体的部分细胞壁与胃上皮细胞的细胞膜直接相贴粘附，二者间几无间距。最多见的是第二形式，有时同一细菌可同时出现两种或以上粘附形式。Hp粘附聚居外的上皮细胞除微绒毛明显减少或消失外，多数情况下很少发现有明显的细胞病理学变化。胃粘膜上皮表面有Hp粘附的邻近区域，往往有炎性细胞的浸润和渗出。胃粘膜上皮细胞中尚可偶见对Hp的吞噬现象。

2.3 Hp的DNA+Cmol%和菌体脂肪酸组成

2.3.1 Hp的DNAG+C MOL%含量测得的Hp、CJ/CC DNA G+Cmol%含量见表4

表4 Hp CJ/CC DNA G+C mol%含量

2.3.2 Hp ,CJ/CC菌体脂肪酸的组成 Hp 的脂肪酸组成主要是十九碳环丙烷酸(19:0cyc)、十八碳酸（18:0）、十八碳烯酸（18:1）和十四碳酸（14:0），CJ/CC的脂肪酸组成主要是十六碳酸（16:0）、十六碳烯酸（16:1）和十八碳烯酸（18:1，表5）。

表5 Hp,CJ/CC菌体脂肪酸组成

2.4 Hp菌体蛋白电泳与CJ分型血清间的交叉反应

2.4.1 CP菌体蛋白SDS-PAGE Hp的主要条带Mr约为25100，28200，44700，62000，70800，81900，12600七条。CJ/CC条带相似，其主要条带Mr约为63000，89100和100000。

2.4.2 CP与CJ抗原交叉反应可见除CJ-22502免疫获得的Penner45型血清与绝大部分Hp菌株（28株中的19株）及PennerV组多价血清与Hp-85607有较强的交叉反应外，其余几乎无免疫学上的交叉（表6）。Hp-85067与V组多价血清的因子血清的反应结果见表7。

表7 Hp-85067与V组因子血清间的抗原抗体交叉反

3 讨论

3.1 Hp的生物学地位虽然Hp引起的世界性关注及人们对其广泛研究是在1983年以后，但早在1847年Bottcher已在人胃中发现了螺形的细菌，随后人们又从许多动物-狗、大鼠、猫的胃中发现类似细菌。1906年又从溃疡性胃癌病人的胃内容物中找到这类细菌。其他一些报告证实在健康人中不易发现它们。1939年 Doenges在242例人胃尸检的染色标本中发现有43%存在数种不同类型的螺形菌，但不明确这些菌与各种胃病间的相互关系。1954年Palmer在1000例胃活检标本中未能证实上述报告，认为前人发现地螺形菌系吞入或死后污染所致。1975年Steer和Colin-Jones报告了胃溃疡病人胃粘膜上出现细菌，经分离培养，结果是绿脓杆菌。后人仔细观察该文图片，认为胃粘膜上的细菌是一种与绿脓杆菌无关的螺形菌。在同一时期，许多学者发现多种动物胃中存在有内源性尿素酶活性。最早是1924年有Luck和Seth描述的，后在1955年Korngerg和Davies的综述中断定胃的尿素酶主要存在于胃体部，且是细菌源性的。在人类胃的研究中证实了这种酶的存在与溃疡病之间的关系，有些病人还成功地利用了尿素进行了治疗。

1983年Warren从慢性活动性胃炎活检标本的胃粘膜上皮表面发现了一种未经鉴定的弯曲状细菌，Marshall又用弯曲菌属的分离培养技术从幽门的活检标本中分离培养成功了该菌。由此，曾先后命名为GCLOs和Hp。1984年Langenberg并发现原先认为的胃中内源性尿素酶即由此菌产生。因此在1984年以前人们对Hp的生物学性状了解得比较少，只知它在光镜下呈螺形，分离培养需微氧条件，与弯曲菌属的代表菌种-空肠弯曲菌相似，只是它有较强的尿素酶活性与空肠弯曲菌不同。此后这种细菌与各种慢性胃病间的密切相关性为世界各地的学者所进一步证实。由此掀起了一股对Hp研究的热潮。

在国内，我们对Hp表型特征—生物学性状的系统研究是比较早的，其结果已如前述。根据这些结果，Hp确实与弯曲菌属的代表菌种——CJ有一些共同或相近之处，例如光镜下的形态相似，都需要微氧的条件分离培养，营养要求大致接近。培养的最适温度虽有差别，但都能在37°C生长，都能产生触酶、氧化酶，均不能利用糖类，能产生微量的H2S。对各种抗生素的敏感谱与CJ相比，绝对值虽有一些出入，但总趋势大致相仿。Hp的DNAG+Cmol%与CJ基本相同，甚至重叠在同一范围内。从这些特征，Hp与CJ同归一属似乎无可置疑。

俟后，进一步的研究发现Hp与CJ间存在着更多的本质上差别：①有一些重要的生化反应与CJ明显不同，例如尿素DNA酶，碱性磷酸酶、亮氨酰胺酞酶等，Hp均为阳性，而CJ/CC均为阴性，这与国外文献报道是一致的。②更重要的是在超微结构上Hp与CJ/CC存在着不同，特别是鞭毛、鞭毛的根部和菌体末端的外形其内侧具有“极膜”，曾提出它可能与水螺菌（Aquaspirillum，AS）同属。但不久发现AS为双极丛毛菌，一般每端只有1～2根鞭毛，Hp虽偶也可见双极鞭毛，但多数情况下只有一端有鞭毛，且为有鞘鞭毛，数量多到6根。更重要的原因是因为AS的DNAG+Cmol%为49～66，与Hp相关甚大。很快就不再有人提及。③从所测的Hp菌体脂肪酸组成来看，Hp与CJ/CC之间亦存在着明显差别，它们的主峰是各不相同的，这一特征与国外文献报道基本一致，只是我们Hp的几个主峰间的相对值与国外报道者略有上下，推测可能是地方菌株之间的差异。④按菌体蛋白电泳的主要蛋白条带，Hp与弯曲菌属的主要代表菌种之间亦存在明显的不同，Hp有7条主要条带，CJ/CC仅有3条，其中只有分子量为63000与89100的2个条带基本相同。⑤根据Hp耐热抗原与CJ的Penner分型血清的交叉反应，它们之间亦不存在有明显的交叉抗原，其中有一个值得讨论的问题是由CJ22052菌株免疫得的Penner45型血清与28株Hp菌之间有18株发生明显交叉反应。我们深感这一现象奇特，特地对22052菌株作了深入一步的研究，发现它在基本生物学性状方面确实与CJ类似，但在电镜下其菌体末端及鞭毛的特征与C明所不同。更重要的是DNA G+Cmol%仅有27.8，明显地超越弯曲菌属范围。因此，若22052菌株不属于弯曲菌属，则Hp与CJ之间基本上不存在耐热抗原的交叉。至于Hp85067菌株与的Penner26，34，35型血清之间的交叉凝集原因未明，有待进一步作出解释。

表8 Hp与CJ/CC.CF菌体末端扩鞭毛的超微结构比较

*国外文献中亦有同样报道，其他特征尚未见文献报道。

综上所述，从Hp的各方面的表型特征来看，Hp与弯曲菌属的代表菌各：CJ22052菌株菌体末端超微结构（×60000）－CJ、CC之间，差异性多于共同性，且其差异点比共同点更具有本质性。因此，我们赞同国外个别学者提出的Hp不归入弯曲菌属，而宜另立一个新属的主张。

至于Hp究竟应归入哪属细菌，Romaniuk从分析Hp，多种弯曲菌属细菌和产琥珀酸沃林菌(Wolinellasuccinogenes,WS)等的16s rRNA核苷酸序列得出结论，认为Hp与弯曲菌属关系较远，而与WS关系较近，似乎应与WS同归一属。但Hudson则认为Hp在DNAG+Vmol%(36%～38%对46%～49%)，脂肪酸组成，极性脂质（polar lipid），总蛋白电泳谱和它同时具有MK-6及TPQ-6方面与WS不同，因此不宜归入沃林氏属，他认为根据Hp的培养和形态的基本特征仍应归入弯曲菌属为宜。遗憾的是迄今还没有一个比较统一的能够应用于所有细菌的细菌学命名原则，因此对有一些难于命名的细菌免不了会引起一些争论。虽然现在对有一些细菌的研究已经开始迈入了分子遗传学的领域，但是当前以表现型特征作为分类的主要依据仍然无可置辩地具有更现实的意义。虽然几乎收集了当今世界上弯曲菌属所有的15种菌种，甚至包括Hp和WS，进行了16s r RNA核苷酸顺序的分析 。根据同源性的程度不同将它们分成三群，可是他不得不承认由于缺少对弯曲菌属各种菌种表现型特征的全面了解和也由于没有将所有的细菌都用同样的试验和同样的方法比较过，因此难于对三群细菌作出适当的专门的描述。Good-win认为由于Hp在临床上的重要性，急需把它命名学地位及早地确定下来，他对Hp、WS和弯曲菌属细菌作了超微结构和形态、菌体脂肪酸组成、甲苯醌、生长特征和酶的活力五个方面的表现型特征作了研究，他的结论是Hp不应归入沃林菌属，他提出给它命名为Helicobacter pylori（暂译为幽门螺杆菌）。我们的意见偏向于赞同他的意见，因为我们亦对一部分细菌作了系统的表现型特征的研究，除了甲苯醌我们没有做以外，我们还做了DNA G+Cmol%，菌体蛋白蛋电泳分析和与CJ的Penner分型血清之间交叉反应的研究，大部分结果都表明，Hp与CJ之间有明显的不同。

3.2 Hp的致病性自从Warren和Marshall发现Hp后，世界各地学者相继从各种慢性胃病及十二指肠溃疡病人的活检标本中找到了Hp，且检出率都很高，从而初步确定了Hp与各种慢性胃病的密切相关性。1985年Marshall按照Koch的病原体致病性原则，吞服了Hp菌液作了自身感染实验。二位学者先后都找到了Hp在自身引起急、慢性胃炎的证据。1987年Krakowka又以悉生小猪(Gnotobioticpiglet)口饲Hp菌液液造成Hp感染的动物模型。至此，Hp直接或间接与各种慢性胃病有关已得到大多数学者的认可。但Hp的致病物质和致病机制，迄今尚未阐明。我们从超微结构研究中发现了一些在国内外文献中尚未作报道的现象，并结合光镜下的观察所见和一些有关文献，对Hp的致病机制或致病过程作出如下推断。

胃是人们对摄入的食物彻底消化前进行预处理的重要器官。在预处理过程中，伪造胃壁肌肉收缩和舒张的物理和机械作用使食物在胃中受到胃酸和胃蛋白酶的强烈化学作用而得到初步消化。本来胃的这种强力的缩舒运动及强酸，酶类作用对胃壁本身就可能造成损伤作用，但由于在胃壁粘膜表面有一层较厚的、且在不断代谢更新的不溶性粘液连续层存在，且在其表面尚有可溶性粘液层起着滋润作用，因而保护了胃粘膜。为何经口入胃的过路细菌很多，而独有Hp能透过不溶性粘液层定居于胃粘膜上皮表面？为何Hp对人胃的感染率这么高，而在不溶性粘液层下胃粘膜上皮表面几乎找不到有第二种细菌的大量存在？为何一个人一旦被Hp感染后，Hp能长期在胃中持续存在？为何用有效抗生素治疗常不能彻底杀灭胃粘膜上的Hp？所有这些问题都说明Hp的感染有其独特性。根据我们所观察到的Hp与胃粘膜之间有关系特别是Hp的三种粘附现象，我们提出Hp感染过程的假说如下。

第一步，Hp利用其特征性的菌体和鞭毛结构穿透不溶性粘液层，当Hp随食物进入胃中，首先伪造其鞭毛与胃粘膜表面的不溶性粘液层发生亲和性吸附。在不断运动着的胃壁上初步找到了一个落脚点。然后借其菌体的螺形结构，以及一端有数根象推进器样活泼运动的鞭毛使它在粘稠的不溶性液层中自由泳动。Venables报道，胃粘膜上的不溶性粘液层的化学结构是由二硫键连接的四个同等大小的亚单位组成的多聚体糖蛋白构成的。每一个亚单位以蛋白质为核心，四周围绕有碳水化合物的侧链，形似“瓶刷状”。 Hp利用其菌体及鞭毛结构上的特点可在这种平行排列的“瓶刷状”结构中作螺旋形的向前运动。

Hazell曾在模拟的粘稠环境中发现Hp比同样具有鞭毛的大肠杆菌的泳动速度快10倍。这就说明了在食物经过胃的短暂时间内，为何几乎只有Hp能透过不溶性粘液层，而其它细菌很难通过的重要原因。

第二，Hp依靠其菌体表面菌毛样网状结构稳定地定居于胃粘膜上皮细胞表面，Hp透过不溶性粘液层后首先仍然通过鞭毛在粘膜上皮表面“抛锚”。然后菌体迅速向粘膜上皮表面靠拢。伪造其菌体表面菌毛样网状结构（或称糖萼Glycocalyx）与胃粘膜上皮细胞表面紧密相连，达到比较稳定地固定在胃粘膜上皮的局部。这Hp特异性地只在胃粘膜组织或肠及食管胃化的组织上定居，而不在其他组织上定居的原因，可能在胃粘膜组织上存在有Hp的特异性受体之故。正由于它存在着特异性的较强的粘附机制，因此尽管不溶性粘液层和胃粘膜上皮以较快的速度不断代谢更新，一部分Hp随着表面的粘膜上皮和不溶性粘液层的更新而脱落，但总还是有一部分Hp在胃的不断运动中在就近的新生的粘膜表面或不溶性粘液层找到继续定居的场所。这就是造成人类的胃粘膜一旦被Hp感染后，Hp就较难以彻底消除的缘故，结果易形成持续感染的状态。这也是人胃的Hp感染率为何这么高的原因。

第三步，Hp部分细胞壁与胃粘膜上皮细胞直接相贴，依靠其脂多糖与细胞毒素等引起胃壁的病变，Hp的感染还不等于发病，只有在某种尚待探明的因素影响下，Hp菌体的部分细胞壁与胃粘膜上皮细胞直接相贴的第三种粘附机制过渡后，才由于细胞壁（这时Hp已失去包在菌体外面的一层外膜样结构）脂多糖的内毒素样作用引起局部粘膜样结构）脂多糖的内毒素样作用引起局部粘膜的炎症。另外，粘膜上皮表面大量Hp还可能由于所产生的强有力的尿素酶分解尿素后产生的氨离子阻挡H⁺从胃腺向胃腔通过。胃蛋白酶对粘液素的降解，细胞毒素对细胞的毒性作用等导致粘膜的溃疡。胃炎可能是溃疡的基础，反过来，溃疡又可能促进胃炎，因此慢性胃病中的胃炎和溃疡两种基本类型都与Hp感染的直接或间接作用密切相关。Hp在体外对许多抗生素是敏感的，但是由于种种原因真正能用于胃部疾病治疗的抗生素是有限的，即使有效的抗生素，由于不溶性粘液层的保护作用，亦很难将Hp彻底消灭干净。

幽门螺杆菌的生物学特性的研究

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与胃炎和胃溃疡的发生有关联。众所周知，胃炎与溃疡属于多发病、常见病，其病因不明。自从Warren和Marshall于1983年首先从胃炎患者的胃粘膜上皮组织中观察螺杆菌和分离到Hp，他们认为胃炎或溃疡病的发生与Hp的感染有密切的关系。近年来国外在这方面进行了不少研究工作；国内亦发现本菌在慢性胃炎及消化性溃疡的病人中检出率较高。但有关Hp的生物学特性及致病性的研究则很少。现将我们对这方面的研究结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料 各型胃病患者共200例。年龄19岁～80岁，平均46.9岁。男222例，女78例。患者经胃镜检查时，均在胃窦部或求部钳取粘膜组织两块，置于含10%灭活小牛血清的布氏肉汤中放于4°C冰箱中保存，送检。

1.2 方法

1.2.1 尿素试验 参考Christtensen尿素肉汤培养和mlorris等快速诊断法,先用2%液体尿素常规法,后用10%液体尿素1min检查法及5%尿素滤纸片法,进行了对比研究。

1.2.2 直接涂片镜检 用保存液将胃粘膜研磨成匀浆后，取一滴推成涂片，甲醇固定后用0.3%碱性复红单染，于显微镜下直接检查。

1.2.3 幽门螺杆菌培养 以布氏琼脂培养基为基础，加入6%脱纤维新鲜羊血及联合抗生素（TmP5mg/L、万古霉素6mg/L、两性霉素2mg/L），制成血平皿，放置4°C冰箱中保存、备用。从送检的Hp保存液中用白金耳取出胃粘膜组织块放入玻璃研磨器中，加入0.5ml保存液，研磨成匀浆，用1ml吸管吸取0.2ml于血平皿中涂匀，将平皿置于10%CO2，5%O2及85%N2混合气体培养箱中，37°C培养72h后观察培养结果。剩下 液体匀浆于尿素酶快诊及直接涂片镜检。

1.2.4 药敏试验 抗菌药物敏感试验所用试纸系参考WHO建议的药敏试验质量控制标准及国内外有关资料制备而成，由大连生物试剂厂生产，专供用纸片扩散法来检测细菌对抗菌药物的敏感度。试验中所用菌液为用0.1%胨生理盐水洗下的37°C48h培养物，浓度为2×109cfu/ml。用1ml吸管取0.1ml菌液于血平皿上，涂匀，之后将药敏片按适当的间距平贴于平皿上，一般9m直径的平皿上贴6张药敏片。最后将平皿置于混合气体培养箱中37°C培养48～72h，观察试验结果，测量抑菌环直径。

1.2.5 杀螺杆菌抗体检测 原理：氧化酶反应阳性的细菌，由于氧化酶的作用，可使TTC用灭菌蒸馏水配成0.5%的溶液；指示菌用Hp295 37°C48h的培养物，其浓度为107cfu/ml；补体一指示菌悬液的制备：补体取4只豚鼠的新鲜分离血清，用生理盐水作1:20稀释，再加入最终浓度为1%（V/V）的指示菌，即为浓度相当于105cfu/ml的补体—指示菌悬液；微量定量板用4×10孔板。方法：①每孔先加入0.1ml生理盐水。②第一孔加入1:5被检灭活血清（取自胃病患者）0.1ml，之后顺序作从1:10～1:5120的对倍稀释。③每孔加补体—指示菌悬浮液一滴，约0.05ml。④最后每孔加入含0.01%TTC布氏肉汤0.1ml（0.5%TTC用布氏肉汤作50倍释稀。混合后盖上塑料盖，于37°C培养20～24h后观察结果。以无红色出现的孔内的血清稀释度作为被检血清的杀螺杆菌抗体的最高滴度。

1.2.6 动物试验 实验选用小鼠C57、BALb/c和金黄色地鼠（由本所动物室提供）用布氏肉汤将新培养的Hp菌洗下，浓度大约配成2×109cfu/ml，每只小鼠一次灌胃约0.5～1ml菌液，每周2次，共4次～6次，末次灌胃后3～7d，处死动物，解剖后取两块胃粘膜组织作尿素酶快诊和Hp菌培养及组织切片。

1.2.7 统计学方法 统计学方法采用X2检验。

2 结果

2.1 尿素酶快速诊断 Hp能产生大量的尿素酶，分解尿素产生氨，使pH值升高，据此将尿素酶液全培养基颜色由桔黄色变为粉红色的反应定为阳性反应。试验结果如表1所示：

表 1 不同时间尿素酶快诊结果

从表中看出，4h和24h尿素酶快诊的阳性率分别为55%和62%。在300份胃病患者的胃粘膜Hp培养中，有195例为阳性。阳性率为65%，与4h尿素酶快诊阳性率之间无显著性差异，（P＞0.05）。尿素酶快诊阳性结果与Hp培养阳性结果之间的对应关系良好，培养出的195例Hp菌株作尿素酶快诊，在1min内均呈阳性反应，特异性达100%。而4h和24h尿素酶快诊的敏感性分别为84.6%(165/195)。因此用尿素酶作Hp快诊，在早期及Hp培养后进行，均有其非常特异而重要的意义。

2.2 直接涂片镜检 对其中21例作了直接涂片镜检，结果有4例镜下可见成簇Hp（+++）占19.0%；有1例镜下易找到Hp（++），占4.8%；有9例镜下可见Hp零星存在（+），占42.9%；6例镜检为阴性。镜检阳性率为66.7%。21例Hp 培养阳性为16份，阳性率为76.2%，与镜检阳性率之间无显著差异（P＞0.05）。镜检阳性符合率为87.5%(14/16)。

2.3 Hp的运送、培养及生化反应

2.3.1 运送Hp生长的营养条件很高，而从采样到分离培养需要一段时间，送检中保存问题当然重要，有文献报道将胃粘膜标本浸在20%葡萄糖液体内送检，5h之内不会影响阳性率。为了探索一条保存时间长、效果好的方法，我们试用含10%小牛血清的布氏肉汤作标本保存液，4°C冰箱保存，用冰壶送检，随机对300例胃粘膜标本进行了不同时间的分离培养，所用平皿是新配制或在密闭条件下保存备用的，增养结果是保存1～8h的标本阳性率为47.5%～78.6%，有1例标本不保存液中存放了17d后Hp培养仍阳性。

2.3.2 培养300例胃粘膜标本，培养Hp结果有195份阳性，阳性率为65.0%。菌落形态：37°C微氧条件下培养72h后，可见0.5～1mm直径大小、圆形、扁平、湿润、半透明的灰白色菌落，偶尔可见菌落周围有β微溶血现象。菌体形态：显微镜下菌体呈弧型、S型或海鸥展翅状，与空肠弯曲菌相类似。72h镜检菌体呈弧形或弯曲状，比空肠弯曲菌要大，着色较好。五日以上菌体呈多形状，有直杆形、微弯曲型或球形，着色不均匀。

2.3.3 生化反应 Hp的氧化酶、过氧化酶、尿素酶均为阳性反应。其中尿素酶反应的时间与细菌浓度成反比。葡萄糖发酵、硝酸盐还原、及3.5%NaCl反应均为阴性。马尿酸水解反应84.1%为阴性，15.9%为弱阳性。1%甘氨酸反应87.0%为阳性。0.04%2、3、5TTC反应8.6%为阳性。

2.4 药敏试验 选取22株生长良好的Hp菌作药敏试验,结果如表2所示.从表中可以看出：Hp对链霉素、四环素、氯霉素、先锋霉素、利福平、卡那霉素、红霉素、新霉素及大霉素较为敏感。而对复方新诺明、萘啶酮酸和多粘菌素B有耐受作用。另外，选用8株Hp对中医研究院研制的五种中药即Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ号及胃丹C进行了药敏试验，结果表明作用减弱，抑菌环直径分别为16～20mm，20mm，10～20mm，0mm及10～14mm。

表2 22株Hp的药敏试验结果

注：( )内敏感百分比

2.5 杀菌杆菌抗体 对40份受检胃病患者的血清进行了杀Hp抗体的检测试验，结果见表3。根据诊断标准 ，杀Hp抗体滴度≥1:160时为阳性，则杀Hp抗体检测试验的实际阳性率为57.5%。对应40份患者胃粘膜标本Hp培养阳性者为29份，阳性率为72.5%，与杀Hp抗体试验的阳性率之间无显著性差异（P＞0.05）。

2.6 动物试验结果 ①尿素酶快诊仅BALb/c小鼠呈阳性反应，其他小鼠均为阴性。而正常BALb/c小鼠胃粘膜的尿素酶快诊也偶尔呈阳性反应，因此推测尿素酶阳性者不一定是Hp感染，由何引起有待进一步研究。②Hp培养均为阴性。③尿素本科阳性的BALb/c小鼠的胃粘膜病理组织切片检查，可见粘膜上皮中有嗜酸性染色的杆菌存在，在大量白细胞，偶尔可见形态类似螺杆菌的细菌的存在。

表3 杀幽门螺杆菌抗体试验结果

3 讨论

幽门螺杆菌所含脂肪酸种类含量与其它弯曲菌及肠道菌不同。在DNA杂交试验中，其DNA与螺旋菌或弧菌不相溶，而只与螺杆菌的DNA相容。此菌可使人罹患慢性活动性胃炎。电镜观察该菌表面粗糙，且具有许多单孔有鞘的鞭毛，且鞭毛鞘细胞壁外膜相连。Hp菌形为弧形、D型或海鸥展翅状，革兰染色阴性，碱性复红单染效果较好。尿素酶、氧化酶和过氧化氢酶反应性阳性。微氧条件下生长，在血平皿上及含10%小牛血清的布氏肉汤中生长良好。195份Hp培养阳性的胃粘膜标本中，4h尿素酶快诊的阳性检出率为84.6%，特异性为100%。直接涂片镜检能查出较为典型的Hp菌，阳性检出率为87.5%。因此，这两种方法对于Hp菌的快诊都具有重要的意义。为了配合临床的诊断粘膜标本应尽快送检。但如送检条件受限，标本可保存在含10%小牛血清的布氏肉汤液体保护中。在4°C冰箱中，Hp一般可存活1W左右，最长者可存活17d。更好的保护液有待进一步研究。由于Hp的存活、传代保存问题尚未解决，致使各实验室出现不尽一致的结果，所以需要有一个适合于Hp菌生长的统一的阳性对照，如培养基中加入血清、活性炭、玉米淀粉、猪胃粘蛋白、甲基纤维素的mlueller-hinton琼脂、布氏琼脂、胰酶消化大豆琼脂等等，以适合于Hp生长、吸收或抑制毒性因子。

目前，国内外对Hp的研究尚处初期阶段，多数学者认为Hp与慢性活动性胃炎和消化性溃疡有关，用敏感的抗生素及TDB治疗，随着病变的恢复，Hp消失，溃疡的复发率也随之降低。除应用一些敏感的抗生素之外，中草药的研究、治疗也不可忽视。

对Hp动物实验的研究，国外报道用无菌动物及悉生动物（SPF），主要有幼年小猪、水獭、雪貂及恒河猴等。国内探索用大白鼠研究胃炎及溃疡的动物模型，观察Hp感染组与非感染组的不同药物疗效。我们实验室用不同种的小白鼠进行Hp感染，没能形成明显的病理改变，推测其原因可能是受试动物对Hp不敏感而形成自身保护，Hp菌不能长期滞留胃内，对胃粘膜不能构成威胁。因此，为了研究Hp的毒力，致病性，为了研制一种疗效高、副作用小的中、西药物，一种适宜的动物模型是非常重要的。

幽门螺杆菌与胃粘膜上皮超威结构的关系

自1983年澳大利亚的Warran和Matshall从慢性活动性胃炎病人胃粘膜活检标本中找到幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）后，先后已有英国、荷兰、德国、美国、加拿大、日本、秘鲁及我国从慢性胃炎和消化性溃疡等病人中分离到此菌。这此些报道普遍反映了胃粘膜中Hp检出与慢性胃炎、消化性溃疡的存在两者之间有高度的相关性。Matshall(1985)和Morris(1987)先后还用Hp作自身感染实验，均证明能引起急慢性胃炎，Morris并观察到能发展成慢性胃炎，这进一步证实了Hp对人类胃粘膜致病的可能性。但Hp如何致病？Hp是否属于弯曲菌属？目前仍存在着争议。为此，本文用透射和扫描电镜对Hp形态结构及其与胃粘膜上皮的关系进行了观察，旨在为阐明Hp的生物学地位及致病性提供某些线索。

1 材料和方法

1.1 活检标本及菌种

33例活检标本采自经内窥镜诊断为浅表性或萎缩性胃炎患者近幽门部位的胃粘膜。Hp菌种31株，从慢性胃炎或消化性溃疡患者胃粘膜活检中分离而得。空肠弯曲菌（Campylobacterjejuni,CJ）菌株：CJ（CF-1）由上海市卫生防疫站提供：CJ（82-56）由苏州医学院生物学教研室提供。胎儿弯曲菌（Campylobacter fetus,CF）及结肠弯曲菌（Campylobactercoli,CC）菌种各两株，其中CF（GIFu 8735）及CC（GIFU 8733）由日本大阪大学三轮各俊夫教授提供，另有CF及CC各一株由法国巴黎第五大学Berche教授提供。

1.2 电镜检查

1.2.1 透射电镜标本制备活检标本在含2.0%戊二醛的二甲砷酸钠缓冲液（pH7.3）中固定2h～4h，二甲砷酸钠缓冲液洗2次后在1%四氧化锇中作后固定、包埋、超薄切片。菌株超切片标本取自血平板上培养2d～3d的菌落。无菌生理盐水轻轻洗下，3000r/min20min离心沉淀，弃上清，以无菌生理盐水重复洗涤一次后，取沉淀作透射电镜标本制备，方法同上。

细菌悬滴标本制备：于清洁蜡块上滴一滴新鲜培养的细菌悬液，以喷涂炭膜的铜网覆盖其上，静止15min，取下铜网，用滤纸吸去残剩液体。再覆盖在一滴20%的磷钨酸上负染15min，取下铜网，吸去残剩液体，自然干燥后待检。上述各标本在日立-500电镜下观察。

1.2.2 扫描电镜标本制备活检标本（用生理盐水洗去表面杂菌及粘液）在戊二醛二甲砷酸钠固定液中固定2h～3h，经二甲砷酸钠缓冲液洗2次后，直接在乙醇中作梯度脱水，然后移入100%醋酸异戊酯，在临界点下干燥，真空涂金。菌落标本制备：取经2d～3d培养的Hp血平板，选择菌落生长良好区域，节下约1cm2琼脂块，轻轻浸入上述电镜标本固定注中固定。随后制备步骤同上。上述标本均在JEOlJSM-840扫描电镜下观察。

2 结果

2.1 Hp的形态结构从不同病人胃粘膜上分离得Hp的形态结构基本一致，呈“S”形弯曲、弧形或稍直，偶见分支状。一般表面较光滑，末端或二端（多数为一端）具有2～6条鞭毛，长度稍长于菌体。鞭毛外均有明显的鞘，带鞘的鞭毛直径约50nm的圆球状结构相连。菌体末端鞭毛基础结构内侧，有一宽达200nm～400nm的电子密度明显降低区域，其底部无明显的细胞膜结构为界。在光滑的菌体表面有进呈现大小较均匀、排列整齐的突起。在参考菌株中，CJ与CC末端呈圆锥体样，稍尖，顶端明显地呈吸盘样结构。GF亦见较小的吸盘样凹陷。CF，CC，CF均有单根无鞘端鞭毛从顶端的吸盘样凹陷中伸出。根部均未见圆球体状基础，CJ与CC均未见电子密度明显降低区域。

2.2 Hp与胃粘膜上皮的关系活检标本包括胃粘膜及其表面的粘液两部分。一般情况下，胃粘膜上皮与粘液层间不存在细菌。若出现细菌，常为大小、形态都呈弯曲样特征的菌群。多聚居在胃小凹的细胞与细胞间连接处部位。偶然尚可见Hp存在于壁细胞的分泌小管中。Hp与粘膜上皮细胞间保持一定的间距，借众多的细丝状网状结构使两者互相粘附。另一种是细菌的部分细胞壁与上皮细胞的细膜膜直接相贴粘附，二者间几无间距。以前者较为多见，有时在同一细菌可出现两种粘附现象。在粘膜上皮表面有Hp粘附的区域附近，往往有炎性细胞的浸润和渗出。Hp粘附处的上皮细胞除微绒毛明显减少或消失外，很少发现有明显的细胞病理学变化。胃粘膜上皮细胞中偶见对Hp吞噬现象。粘膜上厂表面的粘液层分不溶性粘液与可溶性粘液两部分。正常情况下不溶性粘液层为包裹在粘膜上皮表面的连续层，可溶性粘液为其周围的流动滋润层。在超薄切片下，出现Hp的标本中，Hp在不溶性粘液层中大致呈散在的分布状态，且大多呈同方向排列。不溶性粘液中的Hp主要呈横断面，而在其外侧的可溶性粘液层中则随意排列，还可见到纵断面、横断面甚至斜断面等不同的切面。经用无菌生理盐水充分冲洗的活检标本，在扫描电镜下可见Hp不规则地粘附在不溶性粘液层表面。

3 讨论

目前弯曲菌属的分类，主要根据光镜下的形态特征、培养特性、生化反应及其DNA的G加C百分比含量等。这些性质与螺菌族中其他细菌有很多交叉，以致造成对Hp归属的意见不一。我们用透射电镜和扫描电镜进行了形态结构的观察，并参考有关文献，发现Hp与CJ，CC，CF在鞭毛源出部位，数量及结构等方面存在着明显的不同。例如，Hp与CJ，CC，CF均有端鞭毛。我们从Hp中看到每一根鞭毛有一只镶嵌在细胞膜和细胞壁中的，圆球体为基础，其内侧尚有一明显的电子密度降低区。而其他弯曲菌属细菌却未找到此结构，仅CF亦见有电子密度降低区。由此可见Hp鞭毛及共结构的特征与弯曲菌属其他细菌有所不同。而Hp的末端钝圆等与水螺菌中的一个种（Aquaspirillum serpens,AS）却相似，因此有人认为它很可能属水螺菌属。Hp与弯曲菌属其他细菌间的区别除了鞭毛及其有关结构外，Hp能分解尿素，而其他主要的弯曲菌属细菌均不分解尿素，亦是一重要特征。另外还在分类学上有重要意义的菌体脂肪酸组成、16rRNAHp的部分核苷酸顺序分析、菌体蛋白质电泳图谱方面Hp与弯曲菌属的主要代表菌种之间都有明显差别。因此Hp是否应属弯曲菌，还值得商榷。

Hp致病机理，虽然有 Marshall和Morris等作了自身感染实验，但它的具体致病机理仍然缺少解释。从我们在电镜下观察，Hp进入机体后侵入的途径很可能是：Hp首先粘附在不溶性粘液层表面，然后藉其螺旋状菌体特征及特殊的鞭毛运动方式迅速钻入不溶性粘液层中间，继而与粘膜上皮细胞接触，并大多在胃小凹及粘膜上皮细胞连接处粘附定居。胃中寄生菌虽然不多，但过路菌是很杂的，且胃酸比较强，粘膜表面有不溶性粘液层作屏障，胃粘膜上皮及其分泌的粘液代谢又很快，为什么仅有Hp能在胃粘膜上寄生？这一方面可能由于Hp螺旋状的菌体特征和它鞭毛的特殊运动方式，促使它比一般肠道杆菌更容易穿透不溶性粘液层。由于不溶性粘液的分子结构呈索条状，当Hp钻入其间时，易呈相对平行状态，这与光镜下所见Hp在粘液中呈鱼贯状分布相符。另一方面可能由于Hp对粘膜上皮细胞有特殊的亲和结构。正如我们所观察到的那两种粘附现象，它们很可能在这中间起着重要的决定作用。这种特异性粘附现象从胃的肠化生组织找不到Hp，在肠的胃脂有利于组织却能找到，从而间接得到了证明。这种有高度特异的亲和机制促使Hp能克服胃粘膜上皮的不断代谢更新过程，而继续在新生的粘膜上皮上定居寄生。然后可能再通过其生产的细胞毒素及尿素酶直接和间接作用，造成胃粘膜上皮的局部病损。

Hp表面出现有规则的突起、在CF、AS中已有报道，Kist认为是菌体外膜蛋白层的组成部分，而Winter认为是微荚膜。光镜下所见Hp的微荚膜样结构可能就属之。McCoy认为这类结构具有抗吞噬作用。但我们将Hp加入新鲜抗凝人血作吞噬实验，发现Hp很容易被吞噬。这亦可使胃上皮细胞对其有吞噬作用得到解释。从目前观察到的慢性胃炎病人胃粘膜活检中出现的一些主要特异性组织病理学表现，例如炎性细胞的浸润和渗出等，很可能是因Hp在胃粘膜上皮细胞上粘附或被上皮细胞及炎性细胞吞噬后释放的趋化因子所引起，至于Hp是否有其他致病因子，尚待进一步研究。

幽门螺杆菌长期保存后染色体DNA酶切图谱的分析

幽门螺杆菌是近年来从人体胃组织中发现的一种细菌，与胃和胃溃疡的发生有密切关系，而空肠弯曲菌则是近十年来国内外学者较为注意的腹泻致病菌，这两种细菌营养要求及培养条件均较高，特别在菌株保存方面，至今还存在不少问题，为了更好地开展这些疾病的基础研究，我们对不同种类的弯曲菌，在20%小牛血清布氏肉汤和全羊血中保存，于不同时间检查了存活情况、生物学特性及染色体DNA的酶切图谱，实验证明，用这种方法保存，在存活率、菌体形态、生物特性保持较好，染色体DNA酶切带型前后保持一致。

1 材料和方法

1.1 菌株 幽门螺杆菌自各型胃病患者的胃粘膜中分离，共15株。空肠弯曲菌由国内不同地区分离，共34株（其中人源菌11株，鸡源菌8株，鸭源菌6株，鹅源菌4株、猪源菌2株、羊源菌3株），另外从比利时引进空肠弯曲菌3株（Cj22，32，26），结肠弯曲菌2株（Cc25，29）及海鸥弯曲菌3株（Cl34，35，36）和分子量测定用经过HindⅢ酶解的标准γ噬菌体DNA。

1.2培养基 试验用培养基用改良布氏琼脂及布氏肉汤均按参考文献配制。

1.3 染色体DNA提取 弯曲菌经37°C48h在混合气体（10%CO2，5%O2，85%N2）条件下培养，每个平皿20mlT.E洗菌，置30ml的离心管，经5000rpm/分离心10min，弃上清，沉淀用10mlT.E悬浮，加10%SDS1.5ml于65°C水浴中1h；用酚抽提3次，酚/氯仿异戊醇抽提5次以上，再用氯仿抽提2次；然后透析）T.Hp8.0)24h以上，换T.E4次，用玻棒缠绕经异丙醇沉淀的DNA，再用75%乙醇浸泡2次，每次10min，将坡棒倒插，DNA向上，室温中凉干；用800μlT.E将玻棒上的DNA洗入小离心管中，于-20°C中保存。

1.4 弯曲菌染色体DNA酶切 用PstⅠ,HindⅢ E.coRI,Bg1Ⅱ,XbaⅠ五种酶进行试验，各种酶均购自中国医学科学院基础医学研究所。

2 结果

2.1 过氧化氢酶阳性弯曲菌的生物学特性

对于-70°C条件下保存不同时间的弯曲菌主要生物学生物学特性：生长温度，1%甘氨酸的生长，对萘啶酮酸敏感性，尿素酶活必以及马尿酸水解，进行了检查与比较，基本特性与初分离时相同，其结果见表1。

表1 过氧化氢酶阳性弯曲菌经-70°C保存后生物学特性

以上结果表明在-70C条件下保存，弯曲菌复苏快，性状稳定。

2.2 弯曲菌于低温（-70°C）条件下存活检查

各种弯曲菌在布氏血琼脂中，经10代以目上传代稳定后，一般在混合气体条件下，于37°C经24h～48h培养后，均能见到较为丰富的生长，经涂片作0.3%复红单染色，镜检一般均能见到生长典型的弯曲菌，然后用Eppendorff离心管加1ml20%小牛血清布氏肉汤（或全羊血），将培养物用白金耳直接刮到小管内，形成浓厚的菌液，以后将小管在-20°C中预冻，次日再保存在-70°C中，经不同时间检查存活情况，结果如表2。可见在3～10个月内于-70°C条件下，全部存活，以上保存方法简便，易行，可作为弯曲菌保存。

表2 各种弯曲菌经-70°C低温保存后检查

2.3 经传代冷冻保存后，弯曲菌染色体DNA酶切图谱检测

2.3.1 空肠弯曲菌染色体DNA酶切 实验分两步进行 ①取空肠弯曲菌E3、E4（鹅源菌），G891（鸡源菌），流羊27（羊源菌）的染色体DNA，分别用三种内切酶进行消解（HindⅢ、PstⅠXbaⅠ）各管于37°C水浴中，作用1.5h，然后进行电泳，电泳在稳压下进行，电压为50V，电泳完毕后将琼脂糖凝胶（E.B加在凝胶中）置紫外灯下观察，并照像。②经初步试验后，又取适宜的PstⅠ进行消解，获得前后对比较好的结果。

2.3.2 幽门螺杆菌染色体DNA酶切 幽门螺杆菌自三种不同胃病患者的胃粘膜中分离，Cp397（慢性胃炎、溃疡病），Cp400（十二脂肠球溃疡），Cp407（浅表萎缩性胃炎），提取染色体DNA后，用Bg1Ⅱ进行酶解，各管于37°C水浴中，作用2.5h电泳40V.2h后30V17h，电泳后将琼脂糖凝胶（E.B加在凝胶中）置紫外灯下观察照像。可以看出用HindⅢPstⅠey XbaⅠ对不同弯曲菌酶切图谱有所不同，但其中以PstⅠ酶切的带型较清晰，还可看到四株不同来源的空肠弯曲菌及三株幽门螺杆菌，在较为长期保存后，染色体DNA酶切图谱带型完全一致。

3 讨论

弯曲菌菌种保存，对于深入开展对本菌的研究，有着非常重要的意义，文献上介绍的方法不多，幽门螺杆菌用全血或加20%小牛血清布氏汤或加入各种添加剂进行保存，但时间均不太长，Drum等用10%小牛血清布氏汤液体培养物，经24h培养后，添加50%甘油及小牛血清，于-70°C中能存活6个月；空肠弯曲菌用50%卵黄盐水，使用时，接种一白金耳菌苔，置微氧罐内，增殖24h，换上橡皮塞，置35°C温箱中，可保存5个月之久，在布氏肉汤内于-20°C中可存活2个月；15%甘油布氏肉汤中，在-70°C中可存活半年，但以上方法所保存的菌株，均不能获得完全存活；而我们所用的10%的小牛血清布氏肉汤，将24h～48h的新鲜菌苔，直接刮到保存的Eppendorff离心小管中，每管加培养基1ml，不需重新培养，可直接置-20°C中预冻，过夜后，再于-70°C中作长期保存，细菌染色体DNA限制性内切酶分析，可应用于流行病学调查及菌型的鉴定，同型的菌株应该有完全相同的染色体DNA酶谱；实验证明经这种方法对弯曲菌保存后、其生物学特性及染色体DNA酶切图谱的检查，均获得性状的前后一致，因此，这是一种比较简易可行的保藏方法，但对更为长期的保存，仍需作进一步的研究

胃上皮化生和幽门螺杆菌超威结构的观察

为研究和证实十二指肠胃上皮化生(GM）与幽门螺杆菌及（Hp）十二指肠溃疡的发生之间关系作者进行了如下超显微结构的观察，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料 均为我院内镜检查的患者，内镜检查结合病理切片观察严格选材，18例球部标本，其中十二指肠溃（DU）13例，慢性十二指肠炎3例，正常十二指肠2例；1例窦部标本（有活动性炎质）作透射电镜观察，8例球部标本，包括DU5例，慢性十二指肠炎2例，正常十二指肠1例作扫描电镜观察。球部标本一块放入4%戊二醛固定液内做电镜观察，另一块放入10%福尔马林液固定，作组织化学染色。

1.2 方法

1.2.2 透射电镜观察 采用日立牌H700型透射电镜。标本常规在4%戊醛内固定和在1%四氧化锇（OsO4）的1h后脱水，包埋，先制备1μm厚的半薄切片，1%NaOH溶于酒精作软化剂，软化树脂20min至1h，常规HE染色后在光镜下定位，制500nm超薄切片，醋酯双氧钠，柠檬酸铝双染色后电镜观察。

1.2.2 扫描电镜观察 为上述透射电镜之扫描附件。固定同上；丙酮梯度脱水；醋酸异戊脂置换；CO₂临界点干燥；立体显微镜下定位；离子喷镀仪镀铂后观察。

1.2.3 复染色方法 将数块活检标本放入盛有1～2ml生理盐水的无菌试管内，以3000转/分 转速离心后取悬液，用Formvar-碳沫酮附上述悬液2min,1%～2%磷钨酸水溶液（pH6.5～7.4）染色1min～2min后，立即在透射电镜下观察。

2 结果

用AB（pH2.5）/PAS染色，根据十二指肠绒毛上皮形态，分化程度将其分为正常、胃上皮化生（Ⅰ型-分ⅠA和ⅠB两亚型和不表现明显上皮化生（Ⅱ型无奇不有类，见表1。

A表现为绒毛萎缩、粘膜表面呈波浪状，粘膜表层上皮完全由化生的胃表面粘液细胞（即GMC）组成。GMC胞浆内含大量的PAS阳性物质，化生区无杯状细胞（图略）。18例DU有6例呈ⅠA表现，内镜下大多有明显溃疡灶，边缘有瘢痕组织形成，底部无明显苔膜覆盖，甚至溃疡被瘢痕组织填平（即H期和S期）。ⅠB型表现为绒毛形状在萎缩到正常之间，可见正常杯状细胞和吸收细胞点缀在GGM之间，GMC胸浆内只有少量的PAS阳性物质（图略）。10例DU和2例慢性十二指肠炎表现为ⅠB型改变，内镜下表现有明显溃疡灶及周边明显充血、水肿，底部有较厚的苔膜覆盖（即A期）。Ⅱ型表现为杯状细胞、吸收细胞和绒毛形状正常，在吸收细胞胸浆内见PAS阳性小滴，杯状细胞数量可轻度增加。2例DU表现为Ⅱ型改变，内镜下表现粘膜明显充血、水肿和渗出及浅表溃疡的形成，为溃疡早期阶段。3例内镜下正常十二指肠粘膜组织学上亦正常。

表1 DU边缘粘膜表面形态学分型

^△GMC：the metapiastic gastric surface mucus secreting cells

透射电镜观察，正常杯状细胞游离面是由大量指状微绒毛密集平行排列形成纹状缘，微绒毛表面覆以质膜及分支状多糖-蛋白质复全物（glycocaluyx,GX），胞质内含有各种细胞器，如丰富的滑面内质网，许多粗面内质网，发达的高尔基复合体以及线粒体和溶酶体，胸质内无粘原颗粒。光镜下表现为Ⅱ型的吸收细胞表面策绒毛排列紊乱、断裂，相邻微绒毛互相融合增宽，有时微绒毛受侵，在质膜下仅见一个完整的微绒毛核心，微绒毛外层的多糖-蛋白质复合物中断、变薄甚至消失。胸浆内无明显粘原颗粒，细胞器形态及排列正常；ⅠB型的吸收细胞除表现为上述微绒毛改变外，胞浆内见大小不等，分布不均和电子密度不同的粘原颗粒。细胞器萎缩，消失或被挤压在胸浆两侧。在GMC之间可见到正常的杯状细胞；ⅠA型吸收细胞除表现ⅠB型外，胞浆内粘原颗粒更为密集、丰富，有时在细胞表面可见到粘液层。GMC形态与胃表面粘液柱门面细胞相似；扫描电镜观察，GM区表面绒毛萎缩，紊乱甚至平坦，表面粗糙呈颗粒状。

3例DU边缘粘膜组织和1例窦部组织光镜下和电镜下发现Hp。透射电镜下，球部及窦部所见Hp形态特征相似，胞壁具有双层膜结构，在两层膜间常见局部加宽，在菌体一端可见1～4条有鞘鞭毛，有时可见箍缩分裂相。Hp均局限在胃上皮化生区，与GMC膜间常以垂直方向的丝状物相连，此丝状物附着处及其附近微绒毛断裂、消失或增宽，菌体周围组织被溶解，并可见游离的细胞碎片、粘膜破坏，失去连续性等现象（图略）。两例DU边缘活检组织复染样本中，1例检出Hp，其形态特征与窦部检出的Hp相似。

3 讨论

十二指肠胃上皮化生（GM）是指十二指肠粘膜，特别是球部膜出现了胃粘膜表层粘液柱状上皮细胞，化生区上皮细胞PAS反应阳性。本文结果提示，GM主要发生在有明显炎症的球部，特点常见于DU边缘部，正常十二指肠球部和十二指肠降段粘膜很少见。本文认为，GM是DU的组织学特征，组织形态上表现为ⅠA、ⅠB和Ⅱ型的改变是粘膜表面上皮在向胃上皮化生过程中分化程度不同的结果，因而能客观地反映溃疡的进展程度和愈合程度。即Ⅱ型为粘膜遭受损害后溃疡形成的早期阶段；ⅠA型为溃疡周围陈旧的具有保护作用的愈合阶段；而ⅠB型为介于Ⅱ型和ⅠA型溃疡愈合过程中的中间阶段，与Greogery的结果一致。部分无明显溃疡灶但有GM发生的十二指肠炎实际是DUⅡ型或ⅠB型阶段，性质不同于慢性十二指肠炎，治疗应按DU治疗。

Patrick等的研究发现，十二指肠粘膜上皮的形态学改变（即GM）更容易发生在胃酸过多的病人中，即胃酸和GM的发生有关。本文结果显示，十二指肠内的幽门螺杆菌和胃窦部中的幽门螺杆菌形态特征相似，与冯瑞娥等用透射电镜观察到的Hp和胃粘膜上皮细胞间的连接方式和细菌的形态特征相同。Hp通过特殊的丝状物与GM细胞相连，并观察到Hp可损害十二指肠粘膜，可能是直接或是其分泌的蛋白水解酶等作用的结果。认为Hp是DU的致病细菌，同时发现组织学上有GM的DU并非均有Hp感染，说明Hp仅仅是引起DU的原因之一，DU发病的原因是胃酸和Hp共同作用的结果，即在胃酸的作用下，十二指肠发生胃上皮化生为Hp提供了感染条件，Hp的感染可能加速了溃疡的形成，并可能影响溃疡的愈合和预后。因此，对DU的治疗应该是以抑制胃酸分泌和中和胃酸为主，辅以抗菌药物治疗，可以达到促进溃疡愈合和预防复发和目的。

用PCR-SSCP 区分不同来源的幽门螺杆菌

幽门螺杆菌（Hp）感染在人群中广泛存在，Hp的分型鉴定对其感染的临床及流行病学研究具有重要意义。国外文献报道的几种基因型技术使Hp的分型鉴定成为可能，而PCR及单链构象多态性（Signle-strand conformationpolymorphisms,SSCP）分析在菌株分型鉴定中的应用则尚未见报道。作者采用PCR-SSCP分析区分不同来源的Hp，并探讨其应用价值。

1 材料和方法

1.1 菌株来源 Hp标准菌株NCTC11637，NCTC11848来自英国伦敦国家标准培养物收藏中心，由本院传染科保存并提供；112株临床分离鉴定的Hp来自97名因上胃肠症状在本院行胃镜检查的病人，经内镜及病理诊断证实十二指肠溃疡49例，胃溃疡5例，慢性胃炎43例。所有病人在内镜直视下于胃窦取粘膜活组织一块做细菌培养，其中包括1例未经治疗相融8个月复查胃镜者，4名病人还另于胃底或十二指肠球部取粘膜活组织一块做细菌培养，10例十二指肠溃疡伴Hp感染者于抗生素治疗停药4周复查胃镜，取胃窦粘膜活组织两块分别做细菌培养及PCR方法直接检测Hp。

1.2 模板DNA的准备培养细菌或研碎的活检胃粘膜以1%SDS100μg/ml蛋白酶k，55°C消化1h，以等体积苯本分氯仿-异戊醇（25:24:1）抽提，12000rpm离心10，吸取上层水相，加2.5倍体积冷无水乙醇12，000rpm离心10min沉淀DNA，以100μl无离子溶解DNA，1μl用于PCR扩增。

1.3 PCR扩增Hp基因组 DNA203bp片段PCR引物CAM-2:5’-CATCTTGTTA-GAGGGATTGG-3’CAM-4:5’-TAA-CAAAAAGATAATGGCGC-3’，已证实对HpDNA特异，扩增片段长度为203bp。50μl含10mMTris(pH8.3),50mM KCL,1.5mMMgcl2,0.01%明胶，各200μdNTP，各0.5μMCAM-2/CAM-4引物，1.25U TaqDNA聚合酶（中科院遗传所产品）。反应条件：94°C5min,1个循环；94°C1min,55°C1min,72°C1.5min,35个循环；72°C10min，1个循环。以HpNCTC11637DNA为阳性对照，去离子水做阴性对照。

1.4 PCR产物的SSCP分析 PCR产物2μl以0.1M NaOH 2mM EDTA37°C变性10min,加3μl电泳加样缓冲液（95%甲酰胺、0.5×TBE、0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯腈蓝）混匀，于7.5%聚丙烯酰胺胶室温电泳300V，3.5min，以0.19%硝酸银染色30min，经显色液（1.5%NaOH,0.5%甲醛，0.0085%硼氰化钠）显色后观察结果，比较不同Hp菌株两条单链DNA片段的迁移情况。

2 结果

2.1 PCR-SSCP方法的重复性 相隔半年转种得到5对Hp菌株，每对菌株203bpPCR产物的SSCP分析均显示完全相同的单链构象；同一菌株203bp PCR产物在不同聚丙烯酰胺胶上都呈现相同的单链构象，使不同凝胶上菌株的PCR-SSCP分析具有可靠性。

2.2 Hp基因组DNA203bp片段SSCP分析 不同Hp菌株203bp片段变性后的两条单链，在中性聚丙烯酰胺胶中电泳的迁移率不同，从而形成不同的单链构象。来自97名病人的分离菌株及2株标准菌株产生7种不同的单链构象。通过比较不同的单链构象。通过比较不同Hp菌株的单链构象，将这97名病人的菌株分成6组（见表1）。同一病人相隔8个月分离培养的菌株，其203bpPCR产物的单链构象稳定不变；4个病人不同培养部位的4对Hp菌株分别具有相同的单链构象。

表1 Hp标准菌株来自97名病人的临床分离菌株的分组情况

2.3 治疗前后菌株的PCR-SSCP分析10例Hp感染者抗生素治疗后停药1月或1月以上复查，发现6例细菌培养仍为阳性，4例细菌培养阴性而PCR检测仍为阳性。对这10例病人治疗前后菌株的PCR-SSCP分析，发现9例病人治疗前后的菌株具有相同的单链构象，1例病人治疗前后的单链构象不同。对其中2例治疗后仅PCR为阳性的患者，于停药5个月～6个月复查时发现细菌培养转为阳性，并与治疗前菌株具有相同的单链构象（表2）

表2 10例Hp感染者治疗前后菌株的PCR-SSCP分析

**B-治疗前菌株；A-治疗后菌株；a-治疗后仅PCR阳性

表2中同时列出不同组别菌株的疾病来源，未发现不同组别的菌株与某一疾病有确定的关系，未发现与十二指肠溃疡或胃溃疡密切相关的Hp菌株。

3 讨论

不同Hp菌株DNA分子具有多态性，PCR-SSCP分析作为检测DNA多态及基因突变的方法，有可能检出这一多态性，从而区分不同来源的Hp菌株。本研究用PCR-SSCP分析鉴别不同Hp菌株方法简单、可靠、重复性好，通过比较97名病人的临床分离菌株及2株标准菌株基因组DNA203bp片段的两条单链DNA，在聚丙烯酰胺胶中的电泳迁移率，将这些被检菌株分成7组，表现出中等度的分辨力。它虽然不能将所有不同病人来源的菌株逐一区分，但可对流行病学上某特定人群的菌株分组从而可以比较不同人群中感染的Hp有无差异。

本研究中显示74%的菌株具有相同的单链构象，推测可能是北京市区人群Hp感染的主要菌型。本结果还证实同一病人相隔8个月分离的菌株，其203bp片段的单链构象稳定不变，这与文献中报道的同一病人2年内连续分离的多株Hp，其染色体DNA酶切图型保持不变的结果相似。对来自4名病人不同部位的4对Hp菌株的PCR-SSCP分析，未发现同一病人有不同类型Hp菌株的混合感染。Petwett等用Southern印迹法对来自15个病人的胃窦、胃体及十二指肠球部的64株Hp核糖型分析，发现2个病人分别感染了两株不同的Hp。本文观察的病人数不多，尚难做结论。

对10名病人治疗前后菌株的PCR-SSCP分析，发现9名病人治疗前后的菌株具有相同的单链构象，认为是治疗后同一菌株的复发。1名病人治疗前后的菌株单链构象不同，可能是治疗后获得了新菌株的再感染，或药物治疗导致原来感染的菌株变异但也不排除两株不同类型Hp菌株混合感染的可能。PCR-SSCP分析用于治疗后Hp复发和再感染的鉴别与文献报道相类似，但由于不同Hp菌株也可有相同的SSCP图型，使该方法对治疗前后菌株的鉴定不够精确，进一步研究可通过选择扩增DNA多态性更为显著的片段，或许可以对治疗前后菌株复发及再感染做出更精确的判断。PCR-SSCP方法用于治疗前后菌株的鉴定，可以从活检胃粘膜中直接增出DNA片段用于SSCP分析，省却了细菌培养的繁琐耗时的过程，特别适用于那些治疗后细菌培养无法检出，而实际上仍然少量存在的Hp菌株的鉴定，这是其它菌相提并论鉴定方法难以达到的。研究表明，Hp存在着致病力不同的两组菌株，它们致病力的不同表现在与不同的病症的关系上。Tee等用Southern印迹法对Hp核糖带型的研究，未发现Hp的核糖型或核糖型的某条带与临床疾病有对应关系、Yoshimara等用DNA-DNA杂交技术证实，十二指肠溃疡和无症状胃炎病人感染的Hp有明显的遗传学差别。本研究对不同Hp菌株基因组DNA203bp片段的SSCP分析，未发现与临床某一疾病相关的细菌DNA单链构象，可能由于该片段编码的信息与Hp的致病力无关，对Hp毒素相关基因的分析或许可以发现与不同疾病表现相关的菌株，有待今后进一步研究。

2．幽门螺杆菌的基础实验研究

大鼠实验性幽门螺杆菌感染

研究表明，幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,Hp）与胃炎、消化性溃疡等胃部疾患密切相关，为此，我们对某些实验性动物进行实验，结果发现Wistar大鼠经口感染Hp，可导致实验性感染。从其胃组织中检查到并分离出Hp，粘膜组织亦显示某些病理变化。从而为研究Hp实验性感染提供较为合适的一种动物模型。

1 材料和方法

1.1 菌株 幽门螺杆菌Hp379及Hp404株，系北京市积水潭医院消化内科就诊的胃病患者，经由内窥镜取得的胃粘膜进行细菌培养分离到的。经过鉴定，由本室传代保存。

1.2 动物 Wistar大鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所。新西兰种家兔，C57和BALB/小鼠，由本所动物室供给。

1.3 感染方法 Wistar大鼠的实验分2次进行。第1次用出生5个月（体重175g～254g）的成年鼠，第2次用出生两个月（体重152g～174g）的幼龄鼠。动物先禁食12h～14h，用胃管喂以5%Na2HCO32ml,15min后用胃管注入Hp379或Hp404株的菌液1.5ml(1010CFU/ml,30min后给食。每周感染1次，共4次。对照组动物不感染Hp，饲养条件与实验组相同。用以感染的家兔为幼龄兔（体重1200g～1500g）。C57小鼠为4周龄幼鼠（10g～12g），BABL/C用成年鼠（18g～20g）。感染方法同大鼠，家兔每次感染量为2ml，小鼠为0.5ml(1010CFU/ ml)，每周感染1次，共5次。动物在最后1次感染后的第7d～10d，禁食12h～14h后，乙醚麻醉处死，无菌操作取出胃，用灭菌PBS洗去胃内容物，从靠近幽门端的不同部位剪取胃粘膜3～4小块，加含10%小牛血清的布氏肉汤2ml，用组织研磨器制成浆，用以做尿素酶试验，直接涂片检菌和细菌培养。其余的胃组织用10%甲醛（PBS配制）固定，供病理学检查。

1.4　 细菌学检查　①尿素酶试验基本参考Morris等的方法。②胃粘膜直接涂片检菌法：取粘膜匀浆滴推成涂片，用甲醇固定10min，0.3%碱性复红染色，镜检Hp菌。③Hp菌培养：以布氏琼脂为基础，加入6%脱纤维羊血及脱氧胸苷酸（TMP）5mg/L，万古霉素6mg/L，两性霉素2mg/L，制成血平板后，置4°C保存备用。取胃粘膜匀浆0.2ml于血平板后，涂匀后放入含10%CO2、5%O2及85%N2的混合气体培养箱中，57°C培养72h后观察结果。

1.5 病理学检查 　甲醛固定的胃组织,石蜡包埋，切成6μm厚的组织切片。分别用苏木素-伊红和Warthin-Starry镀银染色，观察病理改变和检查组织切片中的Hp。

2 结果

2.1　尿素酶试验　经口感染Hp的8只大鼠，其胃粘膜做尿素酶试验，多数在4h内，个别的24h出现阳性反应。对照组大鼠的胃粘膜呈阴性反应。经哭喊Hp的家兔、C57和BALA/C小鼠的胃粘膜，均呈阴性反应。

2.2 　涂片细菌检查　 感染Hp的8只大鼠的胃粘膜匀浆，制成涂片染色后镜检，均检查到Hp。未感染的大鼠胃粘膜涂片未找到Hp。感染Hp的兔、C57和BALB/C小鼠的胃粘膜涂片亦未检查到Hp。

2.3 细菌培养 各组动物的胃粘膜组织都做了Hp培养，结果只有感染Hp的大鼠胃组织，分离出Hp。其他各组均款培养出Hp。

2.4 组织切片细菌检查 胃粘膜组织切片用Warthin-Starry染色，背景为淡黄色，Hp染色成黑色。感染Hp的大鼠，无论是幼龄鼠或是成年鼠，其胃粘膜切片中均可找到Hp，它们主要分布于粘液层。粘膜上皮细胞的表面和粘膜的隐窝处。切片中的Hp形成呈半圆、S或螺旋状，未感染Hp的正常大鼠，胃组织中未找到Hp。感染Hp 的家兔、C57和BALB/C小鼠的胃切片中，亦未检到Hp。

2.5 病理组织学检查 感染Hp大鼠的胃组织切片中，可见粘膜上皮细胞变性病灶，细胞肿胀而变得不规则，胞浆内结构不清或消失。粘膜层见有单个核细胞浸润病灶。

3 讨论

上述结果表明Wistar大鼠对Hp易感。经口感染Hp，可从其胃粘膜中检查到并分离出Hp，胃粘膜亦出现病变。与之相反，家兔、C57和BALB/C小鼠，示能引起Hp的实验性感染。Ehler曾用Lewis大鼠，C57BL/6和BALB/C小鼠做实验，试图建立Hp的动物模型，未获成功。他们的小鼠实验结果与我们的结果相同，都是阴性。但大鼠的实验结果不同。可能是因为实验条件不同的缘故。

自从1983年首先从人胃中分离到Hp以后，相继从水貂和恒河猴的胃组织中分离出Hp样细菌。那么，我们从感染的Wistar大鼠胃组织中分离到的Hp是否亦是自然存在的呢？看来，这种可能性不大。因为，如前所述，未感染的对照组大鼠，用各种方法检测，都没有检查到Hp菌

最近报道悉生仔猪经口感染Hp，可从胃组织中分离出Hp。但用悉生仔猪做实验，不但费用昂贵，而且不方便。根据本实验结果，我们认为Wistar大鼠，尤其是幼龄鼠，是研究Hp菌较为理想的动物模型。但是，多次感染是必要的。

幽门螺杆菌在双相培养基中生长的特性

幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori, Hp）的发现被认为在人类胃炎病原学中具有重要的作用，此菌1982年首次发现，由Marshall等所描述并命名为Campylobacter Pyloridis，后来根据国际细菌命名规则（ICNB）改正为C.Pylori。1989年Goodwin等建议把Hp从弯曲菌属划出来，而成立一个新的属，称为幽门螺杆菌（HelicobacterPylori, Hp），目前已在国际性刊物和国际会议上应用此名称。幽门螺杆菌为微需氧菌，地氧较敏感，此菌营养要求高，在普遍蛋白胨水或肉汤中不能生长，在固体培养基上Goodwin（1985）推荐以脑一心浸液琼脂为基础，加入7%马血清，1%Isovitalix(BBL)，万古霉素2mg/L，萘啶酮酸20mg/L，两性霉素2mg/L。该菌最适宜生长温度37°C，42°C条件下则不能生长，37°C下培养，细菌生长缓慢，培养3d～4d后在微氧条件下，固体培养基上可0.5mm～1mm直径灰白色透明的菌落，在血平皿上有时可见菌落周围有轻度溶血，该菌培养时要求温度高，尤其初代分离时，相对湿度至少要在98%以上，为此我们用布氏琼脂液体一固体双相培养基，对幽门螺杆菌的生长曲线进行了研究，现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 菌株 幽门螺杆菌89404株自北京市积水潭医院球溃疡病患者的胃粘膜中分离；菌株鉴定结果：氧化酶试验阳性，过氧化氢酶试验阳性。1%甘氨酸生长，马尿酸水解为阴性，37°C生长（+），25°C生长为（－）。在3.5%NaCl中不生长，对庆大霉素、四环素、痢特灵等敏感，对万古霉素抗药，在布氏血琼脂上生长良好，有轻微溶血。

1.2 液体—固体双相培养基的制备取25cm3组织培养瓶，高压来菌后加入6%脱纤维羊血布氏琼脂20ml，平放，待凝固后，将瓶子垂直，再加入新鲜配制的布氏肉汤9ml，置4°C冰箱内保存备用。

1.3 生长曲线的测定 将全羊备注中加89404的菌株自-70°C冷冻保存的幽门螺杆菌融化，取0.2ml菌液接种在6%布氏血琼脂平思虑中，于5%O2，10%CO2，85%N2的混合气体条件下于37°C培养3d后观察，选取新培养的Hp89404用10%小牛血清布氏肉汤（pH7.2）洗下，作1:10稀释，每个尝试各换1支吸管，再经充分混匀后，取10^-4及10^-5两管进行活菌计数，然后取10^-4菌液1ml(10.15×10²cfu/ml)，直接接种在液体—固体双相培养基中，此时按0h培养的菌数计算，即在双相布氏血琼脂培养中，每毫升含菌液浓度为1.02×10²/cfu/ml，然后将双相培养物置混合气体培养箱中，经不同时间（24h～144h）在布氏血琼脂平皿上进行活菌数测定。

1.4 pH值测定 将不同时间的菌株液取出，用精密pH试纸测定培养液的pH值，在测定前预备试验用数字式电pH样校正。

2 结果

2.1 幽门螺杆菌在固体培养基上生长特点

在固体布氏血琼脂平皿上，经37°C48h混合气体培养后，用10%小牛血清布氏汤洗下，菌液浓度掃标准比浊管18亿/ml菌配制，按10倍稀释法，取10-4管接种子固体布氏血琼脂上，经37°C72h培养后，菌落计数为1.02×10²cfu/ml，同样以10-4接种在双上培养基则为1.14×10⁴cfu/ml，而且在双相培养基上菌形弯曲较固体培养基上典型，球状菌体数量也较少。

2.2 Hp89404在双相培养基上的生长特点

为了解幽门螺杆菌生长特点，选择自胃病患者胃粘膜标本中分离的菌株（Hp89404），采用布氏琼脂双相培养基进行培养，于不同时间各取培养物进行活菌计数，同时还进行pH值测定，实验结果见表1。

表1 幽门螺杆菌（89404）在布氏血双相培养基上生长

从附表可见，幽门螺杆菌经培养0～24h，上潜伏期到缓慢生长期，在血双相培养基中，于37°C培养12h～20h开始出现浑浊，24h～48h以后，即可出现迅速对数生长期，并持续到120h，达到生长高峰，此时菌落数最高达2.87×10⁵cfu/ml，以后随着培养时间的延长，菌落单位形成数则渐次下降，在144h时菌数为9.75104cfu/ml。从显微镜下观察菌体形态，培养24h～48h,见菌形呈较为典型的弯曲形、螺杆状或海鸥展翅样，到72h～96h为多形态性，有球状菌形出现。从液相培养液pH测定中24h～144h表明pH上原来7.2下降到6.4～6.9。

3 讨论

幽门螺杆菌的生长营养条件要求较高，胃粘膜培养物在固体培养基布氏血琼脂条件下，经37°C24h～48h微氧培养，细菌生长缓慢，在固体培养基上可见成睛集落细小 的灰白色透明的菌苔，初代培养经镜检形态为典型海鸥展翅样或S形弯曲菌，但经继代培养，特别是72h以后的培养物菌体常可变成多形态性，微球形则尤为多见，用双相培养物菌液均匀混浊，菌生长较快，保存时间相对也较长，这是否由于液体—固体双相培养基，其营养及温度均有利幽门螺杆菌的存活，有待进一步研究。

幽门螺杆菌感染的动物模型

十余年来，幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,Hp）与各种慢性胃病（慢性胃炎，消化性溃疡，胃癌等）之间的关系，基本上已取得了一致认识。可是仍然有许多问题有待解决。例如：Hp的致病及致癌机进、Hp感染的免疫预防治疗问题；抗Hp治疗方案及药物的改进、是否所有Hp感染者都需要用抗Hp治疗等。这些问题的解决除了靠临床资料的累积外，免不了需要在实验动物模型上作更深入的研究。然而，制备与Hp感染有关的慢性胃病的动物模型比较复杂、比较困难，因此尚未能普遍采用。问题在于Hp是一种人类胃部的寄生菌，它并不能在任何动物胃中定居。另一方面许多动物消化道中自然寄生着一些类似于Hp的细菌，这给在实验动物中识别Hp与类似菌造成困难。下面我们来看一看已经发现的Hp类似菌在自然动物中感染情况和已建立的Hp感染动物模型及其应用的现状。

1Hp类似菌的自然感染

早在19世纪末有在狗、猫、棕色的挪威鼠胃中发现了螺形菌。但未在人、猴、牛、猪、小鼠、鸽子、乌鸦中找到。由于当时仅凭形态学判断，因此这些结果都未能肯定下来。直到1983年Marshall从人胃中分离到幽门弯曲菌（Campylobacter pylori,CP)后，才引起人们注意到此菌与慢性胃病的关系。同时亦引发人们对各种动物胃中类似菌的兴趣。1989年Goodwin对CP作了深入研究后，认为CP不同于弯曲菌属细菌，提出了一个新属名螺杆菌（Helicobacter），并确定Cp是这一属中的代表菌种，称作幽门螺杆菌（H.pylori, Hp）,同时亦把从雪貂胃中分离到的类似菌H.mustelac(Hm)，包括在这一属中，H属最主要的特征是指这一类细菌属革兰阴性、螺旋形、有带鞘的鞭毛。微需O₂尿素酶^（+）。有特殊的脂肪酸组成等。自此以后，人们从不同种类动物的消化道中发现了不下10余种H属细菌。最早分离到的可能是大鼠和小鼠肠道中分离到的H.muridarum.已知有6种H菌从不同动物胃里分离到。除Hp与Hm外。尚有猫狗中的H.felis(HF)，卷尾猴中的H.nemetrinae，猎豹中的“H.acinonyx”和狗中的H.bizzozero。原来归在Campylobacter属里的与人类胃肠炎有关的类似菌，H.cinaedi、H.fennelliac和H.heilmanii亦已归入此属。“Flexispira rappini”最早是在流产羔羊中分离到的细菌，最近亦在胃肠炎的病-人和小猎兔犬胃中发现。虽然这一细菌表现型上与Hp有差别，但根据产生尿素酶和基因型的特征已归入此属，称作“h.rappini”。除此之外尚有一些在动物下消化道中发现的，例如，引起小鼠肝炎的H.hepaticus等。

在人类或动物胃中除了Hp类似的细菌外，还有一些紧密螺旋形的细菌。例如：人胃中的人胃螺菌“Gastrospirillum bominis”，由于它们尚未能分离培养，对它们的生物学性状尚未充分了解，因此有的尚未正式命名。Henry就曾报告在小猎兔犬的胃粘膜电镜下曾显示三种形态的细菌：第一种是H.rappini，第二种H.felis，第三种是 “G.hominis”，用特探针发现三者有明显的差别。还有一些未曾命名的H属细菌已经在燕鸥、家雀和猪中发现。有人还在雪貂中发现不同于Hm的H属细菌。在这同时亦有人报道从猴类动物及猫中直接分离到Hp。由此可以想像研制Hp感染动物模型的复杂性。

2Hp感染的动物模型

1983年后许多学者企图在常规实验室动物包括小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、无菌（Germ Free,GF）级无菌大鼠中用口服攻击法建立Hp感染的动物模型，结果均未成功。1987年krakowka考虑到猪的杂食性及其胃的解剖结构生理功能与人类相似，另一方面为了尽可能避免有可能干扰Hp感染成功的种种因素，他们成功地用GF级小猪口服接种Hp，建立了Hp感染的悉生（kontbiotic)动物模型。他们除了在此动物胃中重新分离到Hp外，亦观察到了由Hp感染引起的类似于人类感染Hp后引起的疾病的特征。接着亦有人用无特种病（specific-pathogen-free）,SPF）级的小猎兔犬中用口服Hp，亦建立了悉生犬类动物模型。由于建立较大型动物的悉生动物模型条件较困难，较难于推广应用。有人企图口服接种Hp于GF级的BALB/c小鼠和GF级的Sprague-Dowley大鼠建立动物模型，但未能成功。后来Lee用HF接种于GF级的Swiss Webster小鼠，2周内出现了急性炎症反应，3周后转为在人类感染Hp后出现的类似的慢性炎症过程。由此，第一次在小动物中建立了类Hp感染的悉生动物模型。1992年Karita用BALB/c裸鼠口服接种Hp获得成功。用这一裸鼠的动物模型，不仅能维持20周，而且能观察到胃炎、十二指肠炎及所有感染动物中所能观察到的一切病理学证据。雪貂是一种产于北美、北欧、与南太平洋地区的动物。它的胃的解剖生理学特征与人类相似，且饲养管理较方便，价格并不很贵。成年貂几乎100%感染了HM（它的生物学特性与Hp近似），且亦能引起胃炎、溃疡等病变及相关的免疫反应。因此，Fox推荐亦可把它用作替代Hp感染的动物模型。尽管前面已经介绍了几种不同类型的动物模型，但是迄今仍然可以说尚没有能普遍被接受。因为由GF级动物制成的动物模型，不仅需要有昂贵的设备的设备条件、复杂的饲养管理、操作手段。因此用这类动物模型亦仅能解决某些特定条件下的问题。裸鼠也是一种有免疫缺陷的小动物，饲养管理当然比GF级动物容易一些，但由于较小，实验观察亦有它有便的地方。而且它只对Hp的新鲜分离株敏感，对实验室株不敏感。有Hm和Hf株建立的动物模型，尽管与Hp感染相似，但毕竟不是Hp，因此用这类细菌感染的实验动物亦有它的局限性。Dubois等根据现有的文献资料通过表现型与基因型分析从恒河猴胃中分离到Hp样细菌与人类的Hp高度同源，因此观察了26只族群繁殖的猴群的自然感染史，取胃粘膜活检作病理切片及细菌分离培养。发现13只感染了Hp，9只感染了（G.hominis样细菌，GHLO），其中3只兼有两种细菌。而4只未感染上述两种细菌，未感染和只感染了GHLO的动物中胃炎的比数≤1:5，在所有感染了Hp的动物中胃炎的比数≥2.0。在13只Hp感染的动物中有12只具有相应的IgG，13只Hp阴性的动物中仅有2只具有IgG比例≥0.5（P＜0.001）。在实验观察期间，一只猴子感染上了Hp，同时发生胃炎和血浆IgG水平的升高。在未感染的动物中，感染胃炎、血浆IgG水平保持7～15个月不变，在6个月时6只猴子用三联疗法根除了Hp，随之降低了胃炎和血浆IgG的浅水水平。Dubols从他的实验中认为隐匿Hp的恒河猴伴有持续的感染、胃炎及特异性抗体水平的升高。所有这些都对适当的治疗作出反应。而GHLO感染很少有炎症相伴，因此提出自然感染Hp的恒河猴亦可作为人类Hp感染的动物模型。

3 动物模型的应用

3.1 抗Hp疗法疗效研究 在前述Dublos用自然感染Hp的恒河猴做实验。不仅证明了它可以用作Hp的动物模型，亦是用Hp感染动物模型研究抗Hp疗法疗效的典型例子。他在第一个试验中用溶介在Tang溶液中的Amoxicillin+Metronidazole+BismuthSubsalicylate给6只恒河猴、2只感染Hp，4只感染GHLO治疗4周。在两组中均未观察到可以检测到的变化。作者的结论认为这一疗法对根除Hp毫无疗效。在另一试验中，同样药物对6只恒河猴每天胃内给予2次，连续10d，在第5d和1个月时都已证明清除了细菌，2个月后有2只猴子又发现了Hp感染表明可能是复发或再感染。其他4支动物直到治疗后6月仍然保持阴性，由此被认为，感染是被根除了。3个动物在治疗前也有GHLO感染，治疗5d后GHLO转为阴性，但是，一个月后，3只动物重新发现GHLO感染的证据。在第3个月时，另一个动物也出现GHLO。直到第5和第6个月时，所有4个猴子虽然都清除了它们的Hp感染，但增保持了GHLO的感染。治疗后一月胃炎程度比开始时下降，在4个根除Hp的恒河猴中的胃炎比≤1.0，而在2个复发Hp感染的动物中胃炎比恢复到＞2.0。经过治疗后在Hp根除的动物中血浆IgG比例逐渐下降。在2个未根除Hp的动物中保持不变。由此，它像在人类中一样，根除Hp后，胃炎和免疫抗体逐渐消失了。

3.2 在研究Hp致病机理方面的应用Eaton等用来自四窝23只悉生小猪以有动力和无动力的Hp株攻击。发现动力最强的感染率最高，达100%，动力最弱的感染率最弱，仅有17%，动力居中间的感染率达40%，从悉生小猪分离的Hp，动力比攻击株更强，攻击株产生的细胞毒素亦不相同，动力最弱的株产生最小量的细胞毒素，而其他两株均产生较高水平的细胞毒素，而其他两株均产生较高水平的细胞毒素。由此，悉生小猪中Hp的毒力与动力相一致，而与细胞毒素的产生不完全一致。

Tsuda等从病人身上分离到的Hp野生株CPY3401，用一个耐卡那霉素的决定簇基因插入到其尿素酶的基因中，使其变成一个无尿素酶活性的Hp突变株Hp173。然后，用CPY3401与Hp173两个同源株去攻击裸鼠，企图证明尿素酶的致病性。结果在CPY3401攻击的胃出现了胃炎，且由此动物分离到的Hp与原来攻击株地区别。而Hp173攻击的动物不发生胃炎，而且不能分离到Hp在裸鼠胃中定居的重要因子。

3.3 在研究免疫反应中的应用 为了说明Hp尿素酶亚单位作为粘膜免疫原的效率。Ferrero等用相当与Hp和Hf的尿素酶亚单位（UreA和Urab）编码基因克隆到表达载体（pMAL）中去使大肠杆菌表达出转译的合成蛋白质。重组的UreA和UreB蛋白质与粘膜佐剂（霍乱毒素、CT）结合，经口免疫小鼠。然后取胃粘膜活检作尿素酶试验和病理组织学检查。结果证明不管是同源性还是异源性的UreA均能在小鼠中引起抗HF感染的保护性反应。Ferrero认为通过本实验能证明重组亚单位抗原能引起抗H属细菌感染的免疫保护反应。

Lee为了确定低剂量的CT或它的B亚单位（CTB）在H属细菌口服疫苗中作为一个佐剂是否有效。他在下述三组免疫的APF级BLAB/c小鼠中完成对活的HF攻击的明显的保护作用。①HF抗原+0.5μgCT和10μgCTB(96%)；②HF抗原+0.5μgCT(45%)；③HF抗原+10μgCTB(85%)。单独用HF抗原或单独用佐剂免疫小鼠无任何保护作用。用HF抗原+10μgCT免疫小鼠对HF攻击只有26%的保护作用。这预示无毒的CTB佐剂将可用于人类的免疫中。

猪胃螺杆样细菌与幽门螺杆菌的比较研究

1983年,Warren和Marshall在患慢性胃炎和消化性溃疡病人的胃粘膜中发现一种弯曲状细菌。现称之为幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori, Hp）。此后，各国学者相继进行了大量的研究。证明幽门螺杆菌很可能是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病菌。据报道幽门螺杆菌感染悉生仔猪获得成功，表明猪可能是一种敏感动物。那么，在自然条件下，猪是否有幽门螺杆菌的感染并并发胃粘膜的病变呢？为此我们对正常猪胃做了微生物学和病理组织学检查。结果发现在猪胃粘膜中存在有螺杆菌样细菌（Heliocbacter-like organisms,HlO）其形态和某些生物学性状与幽门螺杆菌基本相同，而且HLO阳性的猪胃粘膜，呈现与人慢性胃炎相似的病理变化，现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 猪胃10个,从北京沙河肉联厂新屠宰的健康猪中随机取出,有70%酒精消毒后沿胃大弯剪开,清除内容物用无菌操作分别从胃窦、胃底和胃体部剪取胃粘膜组织各4块，其中2块用缓冲的10%福尔马林固定，供病理学研究，另2块组织供细菌培养用。

1.2 螺杆菌培养 将从胃窦、胃底和胃体部取得的粘膜组织，分别置于无菌玻璃研磨器中，加0.5ml含10%小牛血清的布氏肉汤，研磨成匀浆后，取0.1ml接种于含6%羊血的布氏培养基平板中，放置于混合气体（10%CO2，5%O2，85%N2）培养72h后观察结果。另取胃粘膜匀浆一小滴于载玻片上，推片凉干用甲醇固定，0.3%复红染色后，直接镜检。

1.3 全菌蛋白电泳分析 用SDSPAGE技术，对幽门螺杆菌（菌株号为NCTC14126，CAPM00112-5），空肠弯曲菌（菌株号为Cj22，Cj26，流G15），结肠弯曲菌（菌株号CC29）和分离到的猪胃螺杆菌作了全菌蛋白电泳图谱的比较。实验条件为浓缩胶5%，分离胶11%，各菌体蛋白样品20μl+2×buffer20μl 100°C水浴5min且加样，50V恒压2h时，75V恒压12h，考马斯亮蓝R-250染色。

1.4 药敏试验 抗菌药物敏感试验所用试纸，系由大连生物试剂厂生产，被试菌株为猪胃螺杆样菌37°C48h培养物，用0.1%胨生理盐水洗下，制成2×10⁹cfu/ml菌液，取0.1ml菌液均匀涂于布氏培养基表面贴药敏试纸7张，然后置于混合气体培养箱中，孵育48h～72h，测量抑菌圈直径。

1.5 病理学检查 经福尔马林固定的组织标本，用石蜡包埋作5μ厚度的切片，每个标本4张。2张用苏木素一伊红染色，作病理组织学观察；另2张用Warthin-Stsrry镀银染色，检查弯曲菌。

2 结果

2.1 猪胃螺杆样菌的分离 在10例猪胃标本中，有8例分离到HLO。若按不同部位猪胃粘膜的分离阳性率来看，以胃底部为最高（8/10），其次为胃窦部（4/10），胃体部最低（3/10），结果见表1。猪胃HLO的菌落较小，约0.5mm～1mm直径，呈圆形、扁平、湿润、半透明，偶或可见菌落周围有β微溶血。菌体较纤细着色良好，呈弧形，S形或海鸥展翅状。其中第5例标本，除典型的弯曲菌外，还发现一种螺旋状菌，该菌螺旋较致密，螺旋数由数个至十数个不等，其形态与从猫中分离的螺旋菌十分相似。

2.2 幽门螺杆菌与猪胃螺旋杆菌的生化特性 我们将分离到的猪胃HLO，包括致密螺旋菌与幽门螺杆菌做了生化特性的比较，结果见表2。如表2所示，猪胃HLO，除尿素酶试验较迟缓外，其他各项生化反应均与幽门螺杆菌一致，而猪胃致密螺旋菌除尿素酶试验较迟缓外，H2S产生为阴性。

2.3 全菌蛋白的电泳图谱分析 两株幽门螺杆菌（NCT11637，CAPM112）的电泳电谱相似；空肠弯曲菌（Cj22,Cj26,流G15）和结肠弯曲菌（CC29）的图谱相似；各株猪胃HLO（6B，6C，7B，7C，10B，10C）之间的图谱亦相似，但明显不同于Hp与空肠弯曲菌的图谱。从同一动物不同部位分离的猪胃HLO，其图谱相同，而从不同动物分离的猪胃HLO，其全菌蛋白图谱有微细的差别。

2.4 药敏试验 猪胃HLO（1a,9a）的药敏试验结果表明，这些菌株对呋喃唑酮、红霉素、氯霉素和庆大霉素均敏感，而对羟氨苄青霉素、先锋霉素、萘啶酮酸等耐药。

2.5 病理组织学研究 在10例猪胃标本的组织切片中，有7例检查到螺杆样细菌（表1），这些细菌往往成群或散在地存在于粘液层，粘膜上皮表面或粘膜腺体内。这些细菌，有的呈弧形，有的呈S形，其形态与在慢性胃炎病人胃粘膜中所见到的幽门螺杆菌十分相似。这7例细菌阳性的胃粘膜组织都呈现中等度到较严重的慢性炎症病灶，主要表现为粘膜和固有层大量的单核细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润，间或有少量嗜伊红细胞和多形核白细胞浸润。有些病灶伴有淋巴滤泡形成。有意义的是这些病变，只见窦部和底部的粘膜而胃体部组织则无一例出现上述病变（表1）。

表1 猪胃粘膜HLO培养和病理组织检查结果

表2 幽门螺杆菌与猪胃中HLO的生化反应比较

3 讨论

在某些哺乳动物的胃粘膜中，也曾发现有幽门螺杆菌样细菌，但除雪貂外，一般不引起病变。我们从在自然条件下生长的普通猪胃中分离到螺杆菌样细菌，而且阳性率相当高（80%）。猪胃HLO的菌落和菌体形态与Hp十分相似，某些生化反应特性两者形态也基本一致，但HLO的尿素酶活性较低。SDS-PAGE全菌蛋白图谱表现猪胃HOLO和Hp的图谱差别也较明显。两者的种属关系如何有待进一步研究。在HLO培养阳性的8例猪胃中，有7例在其组织切片中发现为数较多的HLO，同时伴有慢性胃炎病变。就其病变的性质而言，与人的慢性胃炎基本相同，但是，其发生病变的范围较广，累及窦部和底部，而与Hp感染相关的人的慢性胃炎，多发生于窦部，正常猪出现胃炎病变，看来产不少见，例如Kathryn在其作为对照组的某些猪的胃组织中曾观察到慢性炎症病变，对此作者未作解释。猪的胃肠系统在解剖学和生理学上类似于人类，而且近来在人和猪的胃组织中均检查到甘油脂（glycero lipid），后者被认为是胃粘膜上的幽门螺杆菌的受体。

综上所述，我们认为猪胃HLO与猪慢性胃炎的关系，犹如Hp与人慢性炎的关系。在Hp不易感染其他动物的情况下，研究HLO对猪慢性胃炎的致病作用，或将有助于阐明Hp对慢性胃炎和消化性溃疡的致病机理。鉴于猪能自然感染螺杆菌样细菌并有慢性胃炎，因此用猪做幽门螺杆菌感染试验，在分析结果时应审慎。

氨水长期作用对大鼠胃粘膜屏障的影响

由于幽门螺杆菌（HelicobacterPylori,Hp）具有很强的尿素酶活性，导致Hp感染患者胃液中的氨浓度明显增高。这种增高的氨对胃粘膜的影响目前尚未见报告。本实验使用Hp阳性例胃液中所测平均浓度0.01%及较高值.02%的氨水长期饲养大鼠，探讨了氨对胃粘膜屏障功能的影响 。本文就其对胃粘膜血流、胃粘膜电位差（potential dif ferece,PD）及胃粘膜前列腺素（PG）的影响报告如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物及分组 本实验选用250～300g的Wistar系雄性大白鼠150只，随机分成3组，以自由饮水和形式分别饮用自来水、0.01%和氨水和0.025的氨水。每组分为1个月、3个月和6个月饲养组，即0.01%的氨水1个月饲养组，3个月组，6个月饲养组；0.02%的氨水1个月组，3个月饲养组，6个月饲养组及相应月份的自来水对照组，共计9组。隔日换一次自来水、0.01%及0.02%的氨水。

1.2 胃粘膜血流的测定法 本实验胃粘膜血流的测定是肛用吸及式氢气清除率法。使用日本UniqueMedical公司产的pHG-201型氢气清除率式组织血流计和UHE-201型血流测量电极。每组取大白鼠5～10只，禁食24h后腹腔注射乌拉坦麻醉下开腹，将测量电极从大白鼠胃的浆膜侧刺入，参堦电极连接鼠尾，分别测定胃中前壁及幽门前壁的胃粘膜血流。

1.3 胃粘膜PD的测定法 每组各取大白鼠5～10只，禁食24h后，腹腔注射乌拉坦麻醉下开腹，从膜胃部开一小口，把自制琼脂PD测定电极置于胃粘膜面将参比电极置于对应的浆膜面，用数字式毫伏表分别测定胃体前壁及幽门前壁的胃粘膜电位差。

1.4 胃粘膜PG的测定法 每组取大白鼠5～10只,禁食24h后，将各组大白鼠断头致死，迅速在冰水中取出全胃，分别从胃体前壁及幽门前壁剪出0.5cm×0.5cm左右的胃组织块，立即放入事先装有EDTA-2Na、消炎痛（tndomethacinum）和抑肽酶（trasylol）的专用试管内，然后以RLA（PEG）法测出胃组织中的前列腺素。

1.5 统计学处理 采用多因素多个均数间的两两比较法。

2 结果

2.1 胃粘膜血流 与对照组比较，实验胃体、幽门部胃粗膜血流匀有减少趋势，而且氨水浓度越大血流越小。3个月后胃体部0.02%氨水组的胃粘膜血流79.4±10.27ml/(min.100g)，与同月对照组的123.74±16.11ml/min.100g)相比，差异非常显著（P＜0.01）。

2.2 胃粘膜PD 1个月时，3组胃粘膜PD无明显差异，此后随着饲养时间的延长实验组的PD无减少，其中尤以胃体部的变化更明显。3个月时两实验组与对照组相比均有非常显著的差异，并且0.01%的氨水组与12个月对照下降显著。

2.3 胃粘膜PG 3个月后胃体部、幽门部实验组办粘膜PG均有增高趋势，6个月后与对照组比较明显减少，6个月后幽门部0.02%氨水组胃粘膜PG34.24±19.32pg/(mg.min)，与相应对照的65.6±12.55pg/(mg.min)比较，明显减少（P＜0.05）

3 讨论

胃粘膜具有对抗H⁺侵蚀的防御机构。这种阻止H⁺再吸水的生理机制，被称为胃粘膜屏障。胃小膜屏障系由胃粘膜上皮细胞及其分泌的粘液层两种成分组成。即胃粘膜屏障可分为粘液屏障和粘膜细胞屏障，将胃的粘膜面做负极，将膜面做正极，就会在其间产生约30mV的电位差，称为胃粘膜PD。新的认识，认为膜电位差PD下降即是粘膜屏障受损伤的标志之一。粘膜血供因素在清除过量的H⁺反扩用，维护粘膜屏障功能上，极为重要。胃泌素、前列腺素等体液调节因子，也是参与调节胃粘膜屏障功能和重要体液因素。

胃粘膜屏障可由药物等物理或化学因素而被破坏。自从发现Hp与慢性胃炎及消化性溃疡有着密切关系后，目前有人已主张将Hp列入胃粘膜攻击因子。Hp具有较强的尿素酶活性，可命名来自血液中的尿素及来自食物中的尿素分解产生过量氨。就氨水对胃粘膜屏障功能的影响国外已有人进行了一些急性试验，如村上等将0.1%,0.5%，1%的氨水分别直接注入大鼠的胃内，发现胃粘膜电位差显著降低。1%氨水注入后胃粘膜血流先增加随即显著性减少。但以往的急性实验使用的氨浓度都较高，实际上Hp慢性患者胃液中的氨浓度只有0.01%左右，与1%比较相差百倍，且Hp长期存在于胃粘膜上，所产生的氨也必然会成为一处长期刺激因素。本实验采用临床上所测出的Hp慢性患者胃液中的氨浓度，观察这种低浓度的氨水对胃粘膜慢性作用的影响。发现饲养3个月后，无论0.01%还是0.02%的氨水，均可使PD明显减少，其中胃体部的减少更加显著，几乎降至对照组的1/2。饲养1～6个月以后氨水组胃粘膜血流均比对照组为少，而且0.02%氨水组的血流量更小，3个月时0.02%氨水组胃体部的血流量与对照组相比差异非常显著。PD的下降和粘膜血流的减少标志着粘膜屏障的防御能力受到破坏，从而导致大量的H+⁺反扩散，H⁺进入胃粘膜，Na⁺则反流至胃腔内，致使胃粘膜发生一系列病理生理的改变。本实验组织学上发现形成了萎缩性胃炎和胃溃疡，我们考虑与氨水导致的粘膜屏障破坏有着直接的关系。由胃粘膜上皮细胞不断合成和释放的内源性前列腺素具有抑制胃液分泌、抗溃疡和细胞保护作用。PG减少时，其细胞保护作用减弱，就会使粘膜的“粘液——碳酸氢盐”屏障受损，引起氢离子逆扩散，破坏物现性保护作用，破坏上皮细胞的完整性，使溃疡易于形成。本实验氨水饲养3个月时，胃粘膜PG均有增高趋势，6个月时与对照组比较明显减少。3个月时PG的增加可能是因为氨水对胃粘膜长期的弱刺激，促使胃粘膜增强PG的合成和释放，以完成其适应性保护作用。6个月时由于氨水导致了大白鼠的萎缩性胃炎，使表面上皮层萎缩，上皮细胞减少及表面上皮脱落破坏，使PG明显减少。这可能是导致胃溃疡的一个重要因素。

本实验结果表明：Hp阳性例胃液中所测浓度的氨水长期作用于胃粘膜，可导致胃粘膜血流和PG减少，PD降低，即可破坏胃粘膜的防御机能。可以推论，由Hp分泌的尿素酶所分解产生的作用，可能是Hp破坏胃粘膜屏障的功能、产生慢性胃炎和胃溃疡的一个重要因素。

本实验选用的是Hp阳性例胃液中测出的氨浓度，Hp实际存在于病变胃粘膜之粘液层下，附着在粘膜上皮细胞上或集中于上皮连接处。因此实际上存在于粘膜上及细胞间隙氨的浓度，目前尚不清楚。另外大白鼠的胃粘膜虽然与人有很多相似之处，但能否用本研究的结果，去具体解释Hp阳性例临床问题等还都有待进一步研究和探讨。

人胃螺旋菌的分离培养研究

人胃螺旋菌(Gastrospirillumhominis,GH)是近来人们认识到的除幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）外的另一类与人胃炎有关的微生物，国内报道人群感染率明显高于国外。由于目前国内外对GH尚未分离培养成功，对Gh的研究仅限于组织学及形态学观察，影响了对Gh本身及其致病性方面的深入认识。我们自一接受胃镜检查的病人中，观察到有Gh和Hp混合感染存在，并最终纯化分离到了Gh和Hp。在对Gh的传代培养中，我们较系统地观察了不同培养条件及冷冻保存对其形态等的影响。现简要报告如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源

实验标本来源于一位在首都医学院附属天坛医院接受胃镜检查的50岁的男性病人，病理学检查证实其胃粘膜是中度慢性浅表性胃炎伴中度活动性胃炎表现。胃镜检查时在胃窦部钳取胃粘膜组织2块，置于含10%小牛血清的布氏肉汤中，放于4°C保存4d后进行以下实验。

1.2 胃粘膜组织尿素酶试验

参考Christensen尿素肉汤培养和Morris等快速诊断法，采用2%液体尿素常规法，于4h及24h观察结果。

1.3 细菌分离培养及纯化

在灭菌研磨器中将胃粘膜组织研磨成匀浆，涂于含6%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板（含TMP5mg/L，万古霉素6mg/L及多粘菌素B4mg/L）中，将平板置于含10%CO2₂、5%O₂及85%N₂的混合气体培养箱中，37°C培养3d后涂片，在光镜下观察培养结果。在含10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中进行Gh菌单菌落纯分离，并测定其尿素酶、氧化酶及过氧化氢酶活性。

1.4 不同培养条件下Gh生长情况

①将纯化的Gh菌分别接种于含6%与10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，置混合气体环境，37°C培养3d，涂片检查细菌形态。②将纯化的Gh菌接种于含6%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，局部分别滴加灭菌的布氏肉汤、新鲜脱纤维绵羊血及冻融脱纤维绵羊血，并分别加盖一片灭菌的盖玻片，使覆盖部位呈厌氧状态。放37°C培养3d，观察细菌菌落生长情况及涂片观察细菌形态。③将纯化的Gh菌接种于含10%小牛血清的布氏肉汤小管中（管口加灭菌绵塞），放混合气体环境，37°C培养3d后，直接涂片及离心沉渣涂片观察细菌形态。④将置于保存液（含10%蔗糖和50%小牛血清）中，-70°C保存30d后的Gh菌，接种于含10%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板中，37°C培养3d后，观察菌落生长情况、涂片观察细菌形态、测定其尿素酶、氧化酶和过氧化氢酶活性，并继续传代观察其形态变化。

2 结果

胃粘膜组织尿素酶试验4h及24h均为阴性。细菌初代培养物涂片发现含有Gh和Hp两种菌。经单菌落分离分别得到Gh和Hp菌的纯培养，其中分离到的Gh菌株命名为Gh32。对Gh32的测定发现其氧化酶与过氧化氢酶均为阳性。并含有很强的尿素酶活性。Gh32在含有6%脱纤维绵羊血的布氏培养基上生长较差，菌落呈针尖状。光镜下可见细菌呈球形、肾形及短螺旋形，多数菌仅一个弯曲。在含10%脱纤维绵羊血的布氏培养基上生长良好，可长成1mm～2mm直径单个菌落，光镜下可见细菌呈多螺旋状，螺旋数目在1～6个之间，且螺旋较密。Gh32在盖玻片下生长不良；在滴加布氏汤和未滴加任何液体的对照部位，细菌菌落较小，呈针尖状。在滴加新鲜血或冻融血而未被盖玻片覆盖处，菌落形态及光镜下细菌形态与在含10%脱纤维绵羊血布氏琼脂平板上生长的情况相似。Gh32在液体培养时生长较慢，3d后液体仅轻度混浊，涂片发现细菌数目较少，但菌形良好，螺旋数在3～14个不等，长度可达17μm左右。经3，000r/min（台式离心机上）离心3min后沉渣用少许生理盐水悬浮涂片发现，多数细菌螺旋数在4～6个左右。将低温保存Gh32初代复活时，菌落生长良好。酶活性检查发现，其尿素酶、氧化酶及过氧化氢酶均为阳性。涂片发现几乎所有菌体均发生了球形变。连续传代2次后，70%左右恢复典型形态，连续传代3次后细菌几乎全部恢复其典型形态。

3 讨论

人们对胃螺旋菌的认识已有一个较长的历史过程。早在1881年Rappin就报道在狗胃粘膜中观察到螺旋形细菌的存在，此后又有许多在其它哺乳动物胃粘膜中观察到螺旋形细菌存在的报道。1906年Krienitz首先观察到人胃粘膜中有3种不同类型的弯曲或螺旋细菌存在，但此后胃螺旋菌未能引起人们的足够重视。随着对幽门螺杆菌与胃炎及消化性溃疡的关系的深入研究，人们开始重新对人胃螺旋菌进行认识。目前认为此菌可能为除Hp外的又一类与胃炎有关的细菌。自1987年来世界各地已有近百例有关Gh感染的报道，国内杨海涛等也曾报道14例Gh感染病人。人们自猪等动物已成功地分离到了胃螺旋菌，近年来国内外多位学者曾对Gh进行分离培养，但至今未见有关Gh培养成功的报道，对Gh的研究也仅限于对病理组织学的观察。我们自人胃粘膜组织中成功地分离到一株Gh，为对Gh的深入研究创造了必要条件。

虽然目前我们只分离到一株Gh菌，可能不能完全反映所有Gh菌所需要的培养条件，但我们在实验中观察到了Gh菌形态的易变性。在不同培养条件下，Gh可呈1～14个螺旋不等，甚至呈肾形或球形。Gh在培养条件不完全适合时，不能表现出其典型形态，而胃粘膜标本中往往有多种细菌存在，在选择性培养基上也可能不止有一种细菌生长，对形态不典型的Gh菌，很容易被当成杂菌或Hp菌处理。我们在分离猪胃螺旋菌(Gastrospirillumsuis)时也曾发生类似情况，一度将一株猪胃螺旋菌作为幽门螺杆菌样细菌（Helicobacter pylori like organism,hpLO）处理过，后来在半固体及液体培养时才观察到其典型形态。Gh在人群中的感染率相对较低（仅1%左右），更增加了Gh分离培养成功的难度。我们认为以上因素可能是造成以往分离培养Gh失败的主要原因。这提示人们，在作Gh分离培养时，如观察到可疑Gh菌存在时，应增加培养基中含血量或进行液体培养，以便使Gh表现出其典型形态。由于Gh在固体培养基中菌形较短，而在液体培养时，虽菌形良好，但菌量较少，有关Gh的最适培养条件问题，仍需进一步探讨。

实验表明，Gh为微需氧菌，氧化酶和过氧化酶均为阳性，且有很高活性的尿素酶，而在胃粘膜组织直接尿素酶活性检测时则为阴性，这可能与胃粘膜中Gh菌量较少有关。提示胃粘膜组织尿素酶阴性的依据，也不能反映Gh产生尿素酶活性的强弱。

实验发现本病人胃粘膜中有Gh与Hp混合感染，两菌同时感染的机会较少，目前仅有数例报道。病人经组织学证实胃粘膜呈中度慢性浅表性胃炎伴中度活动性胃炎表现。Gh在胃炎发生过程中所起的作用如何，有待进一步研究。Gh的传染和传播途径问题、Gh与猪、狗、猫胃螺旋菌间的关系，以及在胃内这一特定微生态环境中Gh与Hp的关系等均有待于进一步探讨。Gh的培养成功，使对这一系列问题的研究成为可能。

人胃螺旋菌致胃炎1例

幽门螺杆菌（简称Hp）与人类慢性胃炎的病因关系，已为多数学者承认，且动物不受其感染。1987年，Dent等从人胃内发现另一种与Hp不同的螺旋状微生物，同时伴有慢性活动性胃炎表现，但其致病性尚未肯定，1989年,McNulty等建议将其命名为“人胃螺旋菌”Gastrospirillum Hominis,简称Gh）。国内迄今尚未见有关报道，最近我们在对Hp的研究中，从1例残胃患者胃内发现了此菌，现报告如下。

1 病例报告

患者男，68岁，太原市人。1963年因上腹部疼痛经上消化道造影诊断为胃溃疡。1975年行胃大部分切除及胃空肠吻合术。术后诊断为复合溃疡。术后患者间断出现上腹剧痛、呕吐，偶觉烧心，有时吐胆汁。1986年10月首次胃镜检查，吻合口充血，有胆汁返流。患者嗜烟，每日10支，近10年来养有一猫，但接触不甚密切。查体：一般情况好，心肺正常，肝脾不大，上腹无压痛。1990年5月胃镜随诊：食管下段充血，有胆汁返流，吻合口及残胃体充血水肿，胃底色泽正常。胃液外观呈黄绿色，pH6.3，胆汁酸浓度135.9μmol/L。病检吻合口呈重度浅表性胃炎，有大量中性白细胞浸润。Warthin-starry及Wright-Giemsa染色可见一种与Hp不同的大的螺旋状微生物，长4～8μm，宽0.5μm，有3～7个紧密螺旋，两端钝圆。着色较Hp浅。改良Goodpusture染色呈紫红色，尿素酶试验阳性。该菌成群或单个分布于胃小凹、上皮细胞表面和粘液之中。细菌密集处有大量中性白细胞浸润，并可在胃小凹内见到该菌与脓细胞并存。在壁细胞内、腺腔底部和间质中未见该菌存在。口服庆大霉素治疗，每次8万U，每日2次，连服20d。停药两个月后再次胃镜复查，病检吻合口炎细胞浸润程度明显减轻，偶见中性细胞浸润。Gh消失。对患者1975年手术切除胃窦及1986年胃镜活检组织存档蜡块重新切片检查，均未发现有Gh存在，而在1975年手术切除胃窦及1986年胃镜活检组织存档蜡块重新切片检查，均未发现有Gh存在，而在1975年手术切除胃窦标本上发现有大量Hp存在，同时伴有慢性活动性胃炎。

2 讨论

从本例患者胃内检出的螺旋状微生物，其形态特征与Hp有根本区别，而与Dent等在人胃内所见的Gh相同。此类细菌，在哺乳类动物胃内广泛存在。1987年，Dent等在3例患者胃中发现此菌，到1989年，他们共检出6例，同时Dye等也报道2例。上述8例，连同本例共9例患者均伴有慢性活动性胃炎。

本例特征：①原胃窦切除标本呈慢性活动性胃炎，有大量Hp存在。术后残胃Hp转阴。1990年发现残胃炎伴Gh阳性，但未见Hp与Gh同时并存。②术后胃酸分泌减少，胃液呈中性，是大量胆汁返流，伴返流性食管炎。③Gh和慢性活动性胃炎同时并存。④经庆大霉素治疗后Gh消失，胃炎好转。

Gh为革兰阴性菌，尿素酶试验阳性。电镜可观察到有光滑的细胞壁，菌体两端钝圆，每端有8根直径为28nm的带鞘鞭毛，无轴丝。与上皮细胞接触不紧密与猫螺旋菌有交叉抗原性。除在鼠胃内接种成功外，体外培养均未成功。Gh的感染率远较Hp低，约为0.4%。我们在137例患者中检出一例。Munulty和Dye对Gh阳性患者的存档胃粘膜标本进行了回顾性检查，未发现有Hp感染。而本例患者存档的胃粘膜标本未见Gh，但HP阳性，此点与其结果不同。报道的8例患者中5例伴食管炎，但食管粘膜活检未见Gh。他们应用抗菌治疗3例患者，其中2例Gh转阴，一例Gh明显减少，胃粘膜组织像转为正常或明显好转，与本例结果相同。由于例数太少，目前尚难肯定Gh与慢性胃炎的病因学关系，其分类学地位亦待进一步研究。

3．幽门螺杆菌的免疫学研究

幽门螺杆菌的免疫学研究进展

自从Warren和Mashall从人胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pyloi,Hp）以来，国内外大量的研究资料表明它与非自身免疫性慢性胃炎和十二指肠溃疡病关系密切。对该菌的免疫学研究也已有不少进展，这对弄清其致病机制、诊断和治疗均有重要意义。我们仅就近年来国外对Hp的免疫学研究现状作一综述。

1 局部和系统免疫

Hp做为一种致病菌，可引起人体特异性和非特异性免疫反应。Wyatt等应用免疫过氧化物酶染色法研究了非溃疡性消化不良病人Hp感染时的局部免疫反应，在所有活动性胃炎病人及部分非活动性胃炎病人均可见细菌被IgA包裹，并且发现IgG和IgM包裹和胃炎的活动性有关。被包裹的细菌多位于粘膜表面，位于胃小凹深部的有些细菌则未被包裹，从而提示这一部位的细菌可以保存下来，免受抗体的伤害。

Kazi等用免疫过氧化物酶染色法对53块胃窦活检标本进行了细胞和体液免疫反应的研究，发现Hp相关性胃炎与无菌的慢性胃炎和正常对照间有明显差异。IgA、分泌成分和补体C₃包裹的细菌可见于所有慢性活动性胃炎病人。C₃总是与IgA、IgM或两者共同包裹有关，这种现象罕见于没有中性多形核粒细胞浸润的病人，在26例Hp相关性慢性胃炎中，有18例出现上皮内单个核细胞浸润。这些上皮内单个核细胞对T淋巴细胞和组织细胞染色阳性。研究结果提示Hp相关性慢性胃炎时的细胞和体液免疫均显著增强。

Attar等用免疫组化技术研究了21例胃炎的胃粘膜活检标本，发现Hp阳性胃炎组的总T细胞和抑制性T细胞出现例数的比率显著高于该菌阴性组；辅助性T细胞的检出率、自然杀伤细胞的存在与否和B细胞的分布在2组间无差异；粘膜中的IgA，IgG，IgM浆细胞出现于所有病人，但3种产生免疫球蛋白的浆细胞有较高的密度在Hp阳性胃炎则高于阴性者。研究表明有Hp阳性胃炎胃粘膜中浆细胞有较高的密度，且炎症主要是由于过多存在的总T细胞尤其是抑制T细胞所介导，结果提示：Hp在胃粘膜中既引起体液免疫反应，又引起细胞免疫反应。

Das等比较了不同来源的人血清对Hp的调理素活性， 发现不论是没有胃炎或消化性溃疡病症状的对照组或是分离出或未分离出Hp的有症状病人的血清，对Hp有同样好的调理素作用。同时发现调理素作用取决于补体激活的旁路途径而不取决于抗体。上述发现提示：特异性抗体并无防御Hp的作用，血清中抗体仅具有诊断价值。

Bernatowska等用化学荧光系统和电镜检查法研究了三种不同弯曲菌和Hp对中性粒细胞的调理素作用，发现胎儿弯曲菌、结肠弯曲菌和空肠弯曲菌的调理素作用是由抗体介导，由补体增强，而对Hp的吞噬作用则由于它能直接激活补体活化的经典途径而不需要抗体。我们认为这一不寻常的特性在Hp相关性胃炎和十二指肠溃疡的发病机理中可能起重要作用。

2 细胞毒性因子

现有资料提示：Hp可能分泌有一种或多种可使细胞发生变性的细胞毒性因子，这在其致病机理中可能具重要作用。Cover和Blaser于1989年在Hp的肉汤培养上清液中发现一种能使培养细胞发生空泡变性的细胞毒素，并证明这个Mr132000的细胞毒素相关性蛋白在活体内可为Hp感染的病人所识别。他们推测这种蛋白质的表达可能在消化性溃疡病的发生机理中起重要作用。

Figura检验了77株Hp细胞毒素产生情况，其中24株来自消化性溃疡病（和慢性胃炎）病人，53株来自慢性胃炎但无溃疡的病人，前者有16株（66.6%）、后者亦有16株（30.1%）产生细胞毒素。两者间差异有显著性，提示该毒性物质在消化性溃疡病的发生上起着病因学作用。Morgan给3窝小猪分别口服2株产毒和1株非产毒的Hp，仅产毒株在胃粘膜中定居并出现炎症、粘液减少、细胞内空泡形成和免疫反应，Hp的细胞毒性因子可能是其致病的重要因素。

3 单克隆抗体的制备

国外已有数篇Hp单克隆抗体研制成功的报道。Negrini等把从培养皿中分离的6株Hp混合后免疫小鼠，32d后将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P₃X63.Ag8.653融合，细胞融合悬液于96孔板上培养生长杂交瘤细胞集落，用整个Hp作靶细胞的间接ELISA法筛选抗体，共获得21株阳性单克隆抗体，其中以CB-26为最好。

研究证明单克隆抗体CB-26具有很强的特异性，它不与人红细胞、粒细胞、胃窦腺细胞和胃小凹细胞起反应，也不与非弯曲菌属的Gram阴性菌、甚至空肠、结肠和胎儿弯曲菌起反应。作者等还对60名经内镜检查的病人鉴定了单克隆抗体CB-26辨认胃粘膜刷片中Hp的能力。用间接过氧化物酶染色法在所有32名培养阳性病人中均观察到大量Hp，而在28名培养阴性的病人中也有8例观察到少量细菌，可能是这些病人的活检标本中细菌量过少，不足以培养出来的缘故。这些研究提示单克隆抗体CB-26可能在Hp的快速和特异性检出中具有较高的价值。

4 尿素酶的分子结构

Hp是突出的特点之一是具有活性很高的尿素酶，有人认为它同该菌的致病性和耐酸能力有关，而尿素酶的分子结构则与其免疫学特性密切相关。

Hu和Mobley研究了尿素酶的分子结构，将经柱层析纯化的尿素酶进行分析，证明纯化的尿素酶所占Hp菌体粗提取物可溶性蛋白5.9%,Mr为550 000,由两个Mr分别为66000和29 500的亚单位组成,两者在分子中的比例约为1:1，6对这样的亚单位构成一个基本的酶分子。并推测Hp强大的尿素酶活力是由于大量的尿素酶分子作用的结果，而不是单一酶分子活性特别高。

N-末端分析显示29 500亚单位氨基酸顺序上同刀豆尿素酶亚单位的氨基末端以及奇异变形杆菌和摩氏摩根菌（Morganella morganii）尿素酶3个亚单位中最小者具有很高的相似性。66 000亚单位同奇异变形杆菌、摩氏摩根菌和产生气克雷白杆菌尿素酶3个亚单位中最大者具有相似的内顺序（氨基酸271～285）。再者，摩氏摩根菌和刀豆的尿素酶亚单位可被Hp66000亚单位的特异性抗血清所识别。从而表明至少有部分相同的抗原决定簇留在不同种系的尿素酶中。

目前国内外已有用粗制尿素酶提取物做ELISA的包被抗原检测血清中的Hp抗体。由于分子结构的相似性及存在相同的抗原决定簇，用尿素酶提取物作抗原在临床上诊断Hp感染，有可能同含有尿素酶的其他菌群发生交叉反应，如泌尿道菌群等。但这种交叉是否严重到影响临床诊断、以及交叉频度、范围等问题，尚有待进一步的研究。

5 免疫学诊断方法

自从发现Hp后，血清学诊断方法迅速出现，并不断得到改进。早期应用的是血凝法和补体结合法，目前应用较多的是ELISA法。更精确的蛋白印迹法虽然能查出多种多样的人体全身抗原抗体反应，但并不适于流行病学调查。

作为常规应用的抗原选择仍存在问题，理想的抗原应具备以下特点：①特异性强；②致免疫性高；③制备容易；④贮存稳定。早期的抗原制备如全菌超声粉碎抗原，由于含有多种抗原包括鞭毛蛋白，特异性差，可同其他菌种如空肠弯曲菌起反应。酸提抗原或超速离心全菌上清液是更纯化的制备，使ELISA的结果更可靠。

应用Hp特有的蛋白质如尿素酶作为测定的基础是另外一个可行的途径。其特异性虽好但蛋白印迹法显示在不同人对每一个别抗原有显著不同的反应，即对某一单一抗原试验并非所有人都反应强烈，这种测定较之应用大范围的多种抗原虽然特异性强，但敏感性低。因此血清学检测仍有待进一步研究和改进。

6 分子免疫学

Clayton等于1989年首次在大肠杆菌内构建了Hp的DNA基因库。他们筛选出一株能同特异性抗血清反应的阳性克隆（γcp2）。该克隆的表达产物系Mr66 000的多肽片断。免疫印迹分析多肽能同特异性Hp抗血清反应。将该DNA提取物经内切酶分析显着该DNA尚含有一个17 000的DNA除编码Mr66000的蛋白外，尚可编码Mr31 000的蛋白质抗原。免疫印迹显示在大肠杆菌中表达的这些抗原同在Hp菌体的抗原具有相同的Mr，并存于所有Hp菌株内。点杂交和间接免疫荧光染色证实由这些多肽产生的抗血清仅同Hp反应。表达这些抗原的DNA经用32p标记显示仅能同Hp菌株杂交。用亲和纯化的尿素酶多克隆抗体的免疫印迹显示这些克隆的抗原是尿素酶分子的一部分，但并无尿素酶活性。

用上述DNA探针和重组DNA表达Hp特异性抗原对探知无法培养的Hp，如唾液、粪便中细菌，探讨其致病机理和血清学诊断会有较大帮助。一旦筛选出的DNA克隆能够表达出特异性强、致免疫性高的抗原后，将会在临床应用中发挥更大的作用。

幽门螺杆菌的SDSP-AGE及免疫印渍分析

幽门螺杆菌（Helicobacterpylorida, Hp）现被公认为是慢性胃炎（CG）及消化性溃疡（PU）的致病因素之一。测定血清Hp抗体方法简便，敏感性高，特异性强，故日益受到关注。有关抗Hp-IgG检测的酶联免疫吸附试验（ELISA）已有报道，但Hp抗原中，哪一部分是免疫反应中抗原的决定簇，目前各家均在探讨。因此我们对Hp抗原作了十二烷基磺酸纳一聚丙稀酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和用人抗血清Hp和兔抗Hp血清作免疫印渍（Western blot），现报告如下。

1 材料和方法

1.1 SDS-PAGE

①Hp抗原：为本室1989～1990年间分离培养的3株Hp抗原混合物。②CT抗原，由上海市卫生防疫站惠赠。③分子量标准蛋白。④电泳方法：分离胶和浓缩胶的聚丙烯酰胺浓度分别为10%和5%，分离胶的pH为8.8，浓缩胶的pH为6.8。

电泳前先将Hp、CJ全菌经超声粉碎，然后离心（2000r/min）15min，除去沉淀，经紫外线检测，上清液中蛋白含量为2mg/ml左右，加拌量为60μl，上样前加20μl的样品处理液，然后将标本煮沸5min。相对分子量标准蛋白分别为磷酸化酶94000，牛血清蛋白67000，卵蛋白43000，碳酸酐酶30000，大豆胰蛋白酶抑制剂20000，溶菌酶14000与样品作同步电泳。

1.2 免疫印渍分析

①兔抗人Hp抗体：由本室免疫新西兰大白兔制成。②阳性血清：1989～1990年胃镜检查患者血清，1:100稀释后经ELISA后于波长490nm测定吸光度（A490）＞0.6者。同时，胃镜或胃粘膜病理证实有炎症或溃疡。尿素酶试验阳性。③阴性血清：选10岁以下正常儿童血清。1:100稀释后经ELISA测定后A490＜0.3者。④酶标羊抗人IgG的制备：按改良的过碘酸钠法，由本室制备。⑤酶标猪抗兔IgG：丹麦Daco公司产品，由上海市卫生防疫站生化免疫室惠赠。⑥硝酸纤维素（NC）纸：西德S&S公司产品，由上海市卫生防疫站生化免疫室惠赠。⑦免疫印渍：按Towbin等方法，由DY-Cl型电泳转移仪以2h400mA将SDS-PAGE胶上的抗原转移至NC纸上。将NC纸置Cohen封闭液中4°C过夜。次日，用含0.05%Tween-20的PBS洗涤3遍，再将NC分别浸于Hp阳性血清中（均为1:100稀释）。37°C振荡2h后，洗涤3遍，加酶标记的羊抗人IGG抗体和猪抗兔IGG抗体（1:400稀释）。37°C振荡2h后，洗涤3遍，再用酶底物显色液（pH7.2的Tris-HCl）缓冲液，0.05%DAB，0.03%的30%H2O₂）显色。

2 结果

2.1SDS-PAGE

经超声粉碎后的Hp抗原被SDS-PAGE分离，胶块用考马斯亮蓝显色，可见14条左右的染色带。其主要染色带Mr分别为22000，32000，42000，59000，67000和75000。

经超声粉碎后的CJ抗原被SDS-PAGE分离后亦出现了10多条染色带。主要染色带Mr88000，75000，66000，45000和32000。

2.2Western blot

转移至NC上的Hp、CJ超声粉碎抗原用酶标羊抗人IGG抗体分析，发现在阳性血清的NC纸上，可出现三条抗原决定簇条带，其Mr分别为49000，59000和67000，与文献报道相似；加阴性血清的NC纸上，无任何条带出现。在国兔抗人Hp抗血清的NC纸上，用酶标猪抗兔IGG抗体分析，也出现了Mr67000的条带，49000和56000的条带较为模糊。在所有出现Hp抗原决定簇条带的NC纸上，CJ约在45000处与人抗Hp和兔抗Hp抗体均有一明显的交叉反应带。提示该条带并非是因人和兔都同时会有抗CJ抗体引起，而是Hp和CJ的表面蛋白抗原间有交叉反应。

3 讨论

我们用SCS-PAGE加Westen blot将分离培养的3株Hp抗原经超声粉碎后，进行抗原成分的分析，在14条左右的候选抗原带中，发现其主要的抗原决定簇Mr为49000，59000和67000。由于处理抗原的方法不同（如用福尔马林固定的整菌抗原、超声粉碎抗原及酸处理抗原等），因此，SDS-PAGE的结果也就不很一致。但目前公认Mr60000～70000的条带是用IGG印渍的Hp主要免疫反应带，与本组结果相同。印渍带属Hp的鞭毛鞘膜蛋白。另外，Dunn等用二维电泳分离Hp蛋白时，在用125I标记的完整Hp菌表面发现两种主要蛋白。其中命名为蛋白Ⅱ的（pH5.6-5.8,Mr66000）既是尿素酶抗原的亚单位，也是部分纯化的鞭毛蛋白制备物的成分。他们还发现，蛋白Ⅱ不被完整的CJ、CF抗血清识别，因此，它是Hp的抗原决定簇。此点与本文也相符。我们没有发现110000的Hp特异性蛋白带，这可能与培养的Hp菌株的不同有关。当然也不能排除与处理抗原的方法不同有关。

抗原的特异性及标准化至关重要，它决定了该免疫学方法的敏感性和特异性。作者试图通过对Hp的抗原的SDS-PAGE加Westernblot检测，找出Hp的特异性抗原决定簇，并以此来取代全菌抗原，建立更为灵敏、特异的血清学方法，从而有助于由Hp引起感染的流行病学调查。由于本文所用的Hp株数量有限，因此它的抗原决定簇可能代表不了所有的Hp株，但它至少反应了1989～1990年间上海地区感染的Hp菌的抗原决定族。

Clayton等在用基因工程合成的Hp多肽作为抗原与Hp阳性血清作免疫印渍时亦发现66000的合成多肽是Hp的一个主要抗原决定簇。这就为今后简化Hp菌的培养以及Hp菌的标准化、商品化都提供了很好的前景。

4．幽门螺杆菌的流行病学研究

4．1 概论

幽门螺杆菌感染流行病学研究进展

自1983年以来，幽门螺杆菌（Helicobacter pylori Hp）以其很高的人群感染率及与慢性胃炎和消化性溃疡的高度相关性而引起国内、外学者的高度重视，近来Hp与胃癌的关系也引起越来越多的人的注意。同时对Hp感染的流行病学问题进行了广泛的研究，取得了很多进展，但尚有许多Hp感染流行病学问题不很清楚。本文仅从Hp感染流行病学概况、Hp感染的传播方式及有关的流行病学方法三个方面作一概述。

1Hp感染的流行病学概况

对Hp感染的大量流行病学资料表明，Hp在人群中的感染相当普遍，在世界各地普通人群混合年龄组的Hp感染率从不到1%至79%不等，多数地区Hp感染率在40%左右，Hp感染与性别无关，随着年龄的增长感染率不断上升。在发展中国家Hp感染率明显高于发达国家，在20岁之前就可达到较高的感染率，并在以后维持在一高感染率水平。发达国家人群感染率至60岁后才达较高水平。在同一社区，Hp感染率除与种族有关外，不同社会阶层人群的Hp感染率明显不同，处于较低社会阶层的人（反映在经济收入、住房条件、卫生设施情况、受教育程度和卫生习惯等方面）的Hp感染率较高。目前在我国对普通人群中Hp感染情况的流行病学调查资料较少，但从现有资料来看，我国普通人群中Hp的感染率相当高。随着对Hp感染流行病学研究的深入，人们关注的焦点已越来越集中到Hp的传播方式上。

2Hp感染的传播方式

从现有的流行病学资料来看，人们一般认为Hp的传播方式有以下3种可能。

2.1动物源性传播

Hp很有可能对人和某些种属动物都具有感染性，人可能通过与动物的接触或通过食用动物源性食物而感染Hp。但目前仅从恒河猴及狒狒中分离到与人源性Hp相同的细菌，自雪貂中分离到的幽门螺杆菌样细菌（HpLO）在很多方面均与Hp相似，但在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的蛋白带型及其脂肪酸成分分析结果等方面均与Hp不同。从狗、猫中分离出与人胃螺旋菌形态相似的菌，但与Hp明显不同。在海豚和鲸中均未分离到Hp，也未查到抗Hp抗体（血清经空肠弯曲菌吸收过），但未分离到Hp菌，猪、兔均是人们广泛接触的动物和食物，加之目前已知猪对人源性Hp敏感，实验中已将其作为Hp动物模型使用。猪可感染人源性Hp并产生与人感染Hp相似的病变。自然状态下的猪、兔是带有Hp菌，还是其感染的某些菌与Hp相似而具有交叉抗原存在？我们从猪（7/10）胃中已分离到HpLO，从菌落及细菌形态、培养特性、耐药性、生化反应（但尿素酶试验为阴性或弱阳性）及致病性等方面与Hp非常相似，但进一步全菌蛋白电泳图谱比较分析发现，猪HpLO与Hp明显不同，经免疫印迹分析发现，猪HpLO与Hp间有明显的交叉抗原存在，提示猪可能不是人Hp感染的传染源，猪血清中高滴度抗Hp抗体可能为猪感染HpLO后产生的对Hp的血清学交叉反应。

2.2人从环境中感染Hp

在同一社区不同人群的Hp感染率与经济收入、住房条件、卫生设施情况、卫生习惯及受教育程度等多种因素有相关性，处于较低社会阶层的人其Hp感染率较高，提示存在人从受污染的环境中感染Hp的可能性。近来有人对同一社会阶层人群进行流行病学调查发现，使用清洁处理后水源者与使用未经处理水源者相比，有较低Hp感染率。提示在Hp感染过程中，水源可能是一重要传播媒介。目前尚未在环境中查到Hp，但实验室资料提示环境中可能存在Hp，有人将新鲜培养的具有典型的形态的Hp悬于过滤水中置于4°C环境，于不同时间用平板培养法和直接显微镜下计数检查，发现Hp发生球形变，10至20d后即检不到Hp存在（用培养法），但有吖啶橙染色发现活菌仍然存在，说明Hp已处于非可培养状态，在4°C环境保存一年后，向水中不断加入液体培养基培养，当至14d，培养基所占比例达30%时，可见有Hp生长，当至30d，培养基所占比例达70%时，Hp尿素酶呈阳性，说明Hp在4°C水中至少可存活一年，并可适当培养条件下恢复到Hp正常状态。一般认为Hp在环境中存活能力较差，其存活情况受环境温度、酸碱度、营养物质浓度、氧饱和度及盐浓度等因素的影响，一般在室温空气中暴露条件下只能存活数h。但当Hp发生球形变后，代谢率明显降低，对各种抗生素的抵抗力普遍增高。进入环境中的Hp是否未真正死亡，而是以非可培养状态长期存在，以及这种处于非可培养状态的Hp是否仍保留对人的致病性是目前很多学者非常关注的问题。对Hp的环境中的生存能力、存在形式及致病力的深入研究将增进人们对Hp流行病学的认识。

2.3Hp的人—人传播

由于目前尚未掌握人从动物及环境感染Hp的确切证据，认为人可能为主要传染源，人—人传播可能为主要的Hp传播方式。除少数病人之间可通过医疗器具，如未经消毒的pH电极或内窥镜等传播外，流行病学调查资料揭示存在人—人传播的可能性，Hp感染存在一定的家庭和人群聚集现象，曾在一弧儿院2岁～4岁儿童中发现其Hp感染毫无疑问达74%。父母为Hp感染者的儿童其感染率远远高于其父母未感染Hp者。在同一家庭中，Hp感染者之间所感染细菌经DNA限制性内切酶谱分析约有50%为相同菌。虽然尚未从粪便中直接查到Hp菌，但在迈克尔憩室处以及直肠部位的胃上皮化生区均已查到Hp，说明Hp具有以活菌形式穿越整个消化道的能力，且各地人群中抗甲型肝炎病毒抗体的阳性率与抗Hp抗体的阳性率相平行，提示粪—口感染可能是Hp人—人传播的一种重要途径。另外，有人从牙齿蚀斑中分离到了Hp菌，并证明了此菌与该病人胃中感染的Hp完全相同，Gobert等利用PCR技术对10例Hp感染者的唾液进行检测，发现6例为阳性，提示人—人之间也有可能通过口—口途径传播。

3Hp检测方法进展

传统的Hp诊断方法为胃粘膜活检组织细菌分离培养、胃粘膜病理组织染色检菌、胃粘膜尿素酶活性测定，均需经胃镜取材，病人较痛苦，且诊断的敏感性及特异性易受检验人员技术、培养条件等多种因素影响，特别是用于多次随访观察时，不易被病人接受。¹⁴C呼吸试验、¹³C呼吸试验和¹⁵NH₄⁺排泄试验是一系列简单、精确、敏感的非侵入性Hp检查方法，均为利用Hp具有很高尿素酶活性，可分解¹⁵N、¹³C和¹⁴C标记的尿素而产生NH₄⁺和CO₂通过测定呼出气体中¹⁴CO₂的放射性强度或呼出气体及尿液中¹³C和¹⁵N的丰度来判断胃肠道中Hp的存在，特别是¹³C呼吸试验和¹⁵NH₄⁺排泄试验均为非放射性检查方法。这些方法均已用于Hp感染的流行病学研究，但由于检查费用较高，并受专用试剂及特殊检测设备仪器的限制，国内尚较少采用。在以上的多种方法中，无论是侵入性的还是非侵入性的，其可靠程度均受到胃粘膜中Hp的数量的明显影响，在普遍接受抗Hp治疗（特别是不规则Hp治疗）的国家或地区，其诊断的准确性明显降低，这种现象在我国目前的大、中城市应引起人们的高度重视。由于感染Hp者机体会产生较高滴度的循环抗体，特别是IGG类抗体，并可在Hp清除一段时间后滴度明显下降，ELISA和免疫印迹法已被用于Hp的诊断和流行病学调查，但在第一代Hp诊断和流行病学调查，但在第一代Hp血清学方法中应用的抗原为Hp全菌、全菌超声破碎物或全菌酸提取物，其鞭毛蛋白等与空肠弯曲菌等有交叉抗原成分存在，诊断的假阳性率高。由于在第二代Hp血清学方法中采用了纯化的Hp抗原成分，如高分子量蛋白抗原或某一单一抗原成分，提高了Hp血清学诊断的特异性。从病人分离到的Hp均含有大量的尿素酶蛋白，这种蛋白抗原可引起机体很强的免疫反应，尿素酶蛋白抗原的纯化及其在流行病学调查中应用越来越引起人们的重视。血清学诊断方法由于简单、经济、敏感性及特异性较高，很适合于Hp的流行病学研究，特别是用于大面积流行病学调查及多次随访调查，其结果也不易受近期内抗生素应用的影响。染色体DNA酶切图谱分析和全菌蛋白电泳分析被用于Hp同源性的检测，两种方法均同样可靠。探针技术及PCR技术的应用为Hp菌的流行病学研究提供了强有力的手段，已知Hp尿素酶结构基因作为特异性探针检测Hp是可行的，并已有根据编码种特异性抗原的基因而设计的探针的应用。在PCR技术中，通过采用某些经特别设计的特异性引物，避免了某些相关菌的同源序列，提高了PCR的特异性。如使用特异性引物扩增Hp尿素酶A或B基因中的部分基因片段，使标本中Hp检出的敏感性提高到了10个菌量级，并达到100%的特异性。由于PCR检测的高度敏感性和特异性，为成功地检测人类粪便、唾液及环境中可能存在的Hp提供了一种手段，并将有助于对Hp感染的传染源及传播途径的确证。

总之，Hp的流行病学研究将成为今后对Hp研究的一个热点和重点，进一步弄清Hp感染的传染源、传播途径等一系列问题，对有效地在整个人群中控制和预防Hp感染将有非常重要的意义。随着各种新技术新方法的应用及大量Hp感染流行病学的研究的深入开展，将会逐步提示Hp感染流行病学的本质。

幽门螺杆菌感染危险因素的逐步回归分析

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与慢性胃炎及消化性溃疡有密切关系。但Hp感染的流行病学研究较不少，尤其有关流行因素的研究报道甚少，至于Hp的传染源和传播途径等问题至今尚未清楚。Hp感染流行因素的研究，发现潜在的危险因素，无疑对于防治工作具有重要意义。因此，本文运用流行病学方法对Hp感染的流行因素进行逐步回归分析。

1 对象和方法

1.1 对象

1990—04～1991—03，在内蒙古蒙医学院附属医院，经胃镜诊断为胃炎和胃溃疡的患者，随机抽取599例，其中男333例，女266例。

1.2 方法

涂片染色镜检和快速尿素酶试验，二项检查有一项阳性者即为Hp感染阳性。采用专门设计的统一调查表，由专人直接询问病人后填写。调查内容包括：一般情况，民族、吸烟、饮酒、经济收入，文化程度，饮食及饮食习惯，饮水情况，牲畜接触史，家庭成员有胃病史及病程所限等因素。

统计分析方法 ①单因素分析 X²检验，X²M—H趋势性检验，圆形分布法。②多元分析方法将单因素分析有显著性的因素作为多元分析的变量，再进行逐步回归分析。整个计算过程由长城—286B型微机上完成。

2 结果

2.1 Hp感染情况

在本次调查的599例病人中，年龄16岁～77岁，平均年龄42.5岁。胃炎481例，胃溃疡118例。Hp阳性323例，阳性率为53.9%，其中男性阳性率为56.8%，女性阳性率50.4%，性别间差异无统计学意义（X²=2.15,P>0.05）。

2.2 Hp感染的季节分布

本研究用圆形分布法对Hp感染的季节分布进行了分析，结果显示，Hp感染有明显的季节分布特征，以7～8月份为最高X=204.5°,S=88.87°,P<0.01)。

2.3 单因素分析结果

本次研究的22个因素中与Hp感染有联系的因素11个（见表1）。其中前5个因素经X²M—H=3.86～6.23,均P<0.05)。

2.4 逐步回归分析

将上述与Hp感染有联系的11个因素先进行数量化处理（表2），然后，将此11个因素作为逐步回归分析的变量。当引进与剔出变量的F值均等于3.84时，最终进入回归方程的因素有3个，即蒙古族（X₁₀）、家庭成员有胃病史（X₉）及接触牲畜（X₁₁）。见表3。

表1Hp感染因素的单因素分析

a^p<0.05,b^p<0.01

*X₂M—N趋势检验

表2 Hp感染因素的性质及数量化

回归方程为：Y=0.43131+0.03018X10+0.02877X9+0.04924X11

表3 Hp感染因素最终选入逐步回归模型的因素及各参数估计值

P<0.01,R=0.3821F=33.9168

3 讨论

从所周知，慢性胃炎，胃溃疡是常见病、多发病之一，Hp是慢性活动性胃炎的重要致病因素之一，在胃，十二指肠溃疡的发病中也起着重要作用，与胃癌的关系正在探索之中^[3]。但Hp的传染源和传播途径至今不明。本研究用逐步回归分析方法对本地区慢性胃炎和胃溃疡病人Hp感染的流行因素进行了分析。结果显示，蒙古簇，家庭成员有胃病史和接触牲畜可能是本地区慢性胃炎和胃溃疡病人Hp感染的重要危险因素。

哲盟位于内蒙古东部，是以蒙古族为主体的多民族地区，也是全国蒙古族人口居住最多（本地区蒙古族人口约116万，约占全国的1/4）的地区。蒙古族和接触牲畜，可能是引起本地区Hp感染的重要因素。与本文研究结果相符。Varia等调查了一个屠宰场工作人员的血清Hp抗体，发现直接处理新鲜肉类的工人其血清Hp抗体滴度较办公室作人员明显升高，并认为Hp感染是从动物传播给人的人畜共患病之一。

本研究结果发现，不论是单因素分析，还是多因素分析均表明家庭成员有胃病史与Hp感染有密切关系，提示是重要的危险因素之一。文献报道，对Hp阳性儿童的家庭成员进行调查，Hp感染率达78.6%，一个家庭中的8名成员都感染了Hp，经DNA分析证实所分离出的Hp菌株属同一亚种。另据报道，Hp感染的儿童其父母和同胞的Hp抗体阳性率分别显著于未感染Hp儿童的父母和同胞（P<0.01）。这进一步支持Hp感染存在着人与人之间传播方式的论点。

胃炎及胃溃疡幽门螺杆菌感染流行因素分析

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）及其与胃炎、消化性溃疡等疾病的关系，已引起世界范围的重视。但迄今为止，有关Hp感染的流行因素尚未清楚，国人对此方面研究报道较少。为了探讨Hp感染的流行因素，以便为今后Hp感染的防治工作提供参考依据。我们对哲盟地区Hp感染情况进行了流行病学调查，对其流行因素进行了多元统计分析。

1 对象和方法

1.1 对象

1990—04～1991—03在内蒙古蒙医学院附属医院，经内镜诊断为慢性胃炎和胃溃疡的患者，随机抽取599例，其中男333例，女266例。

1.2 方法

为涂片染色镜检和快速尿素酶试验（Hp阳性诊断标准为直接尿速酶试验和/或涂片镜检阳性者）。采用专门设计的统一调查表，由专人直接询问患者之后填写，调查内容有：一般情况，民族，吸烟，饮酒，经济收入，文化水平，饮食及饮食习惯，饮水，家庭成员有胃病史，接触牲畜及病程年限等22个因素。

统计分析方法 ①单因素分析方法：X²检验，X²M—H趋势性检验，圆形分布法。②多元分析的变量，进行主成分分析。其基本思想是多指标的主成分分析是在不损失或很少损失原有信息（方差）的前提下，将原来多个彼此相关的指标转换为新的少数几个彼此独立的综合指标的一种统计方法。数据处理过程在长城—286B型微机上完成。

2 结果

2.1 Hp感染情况

本次调查的599例患者中，Hp阳性率53.9%（323/599），其中男性阳性率为56.8%，女性阳性率50.4%，性别间差异无统计学意义（X²=2.15,P<0.05），年龄分布为16～77岁，平均42.5岁。

2.2 Hp感染的季节分布

本研究用圆形分布法进行了分析，结果显示，Hp感染有明显的季节分布特征，以7～8月份为最高（X=2.0.56,S=88.87°,P<0.01）。

2.3 单因素分析结果

本次研究的22个因素中与Hp感染有联系的因素11个，即年龄、经济收入、吸烟、饮酒、病程年限、饮生水、喜辣食、吃生菜、家庭成员有胃病史、民族和接触牲畜。其中前5个因素经X2M—H趋势性检验的结果显示，与Hp感染阳性率间存在着剂量反应关系（X²M—H=3.86～6.23,均P<0.05)，见表1。

表1　Hp感染因素的单因素分析

^ap<0.05,^bp<0.01

X²M—N趋势检验

表2 Hp感染因素的性质及数量化

2.4 主成分分析结果

将上述与Hp感染有联系的11个因素先进行数量化处理，见表2，而后，将此11个因素作为主成分分析的指标，对本研究的Hp的感染阳性者323例进行主成分分析，其计算结果见表3。由表4可见第Ⅰ主成分表示原11个因素总信息的24.1%，第Ⅱ主成分表示总信息的18.1%……。现取前7个主成分已表示总信息的85.97%。由表4可知，第Ⅰ主成分中起较大作用的因素是常饮生水（X6）和喜吃辣食（X7）。第Ⅱ主成分起较大作用的因素是喜吃辣食（X7）和蒙古族（X10）。第Ⅲ主成分起较大作用的因素是年龄（X1）和家庭成员有胃病史（X9）。第Ⅳ～Ⅶ主成分中起较大作用的因素分别是吸烟（X3），家庭成员有胃病史（X9）、饮酒（X4）、接触牲畜（X11）及吃生菜（X8）。

3 讨论

自1983年Marshall从人胃粘膜标本中成功地分离出Hp以来，大量研究表明该菌与慢性胃炎及消化性溃疡有密切关系，并趋于支持Hp具有致病性。一般而言，慢性胃炎Hp检出率为50%～70%，胃溃疡为60%～80%。本研究结果阳性率为53.9%，与国内文献报道相近。

本研究采用了单因素与多因素分析相结合的方法，对Hp感染流行因素进行了分析。从中可发现潜在的危险因素，对于防治工作具有重要意义。

据文献报道，年龄、吸烟、经济收入与Hp感染有关，本研究结果也证明了这一观点。同时发现此3种因素与Hp感染存在着剂量反应关系，饮酒和病程年限与Hp感染也存在着剂量反应关系。

文献报道，对Hp阳性儿童的家庭成员进行调查，Hp感染率达78.6%，一个家庭中的8名成员都感染了Hp，经DNA分析证实所分离出的Hp菌株属同一亚种。本研究发现，Hp感染与家庭成员有胃病史有关，这进一步表明Hp感染存在着人与人之间传播可能的论点。

有关Hp感染季节分布特征的研究报道尚未见到，此次研究结果发现，本地区Hp感染有明显的季节分布特征，以7～8月份为高峰。同时显示，常饮生水、吃生菜和喜吃辣食似乎是引起Hp感染的主要因素。这可能是与该季节饮生水和吃生菜的不良卫生习惯所致，再有喜吃辣食可刺激胃粘膜，降低其抵抗力，易导致Hp侵入。

哲盟位于内蒙古东部，是以蒙古族为主体的多民族地区，是全国蒙古族人居住最多（本地区蒙古族人口116万，约占全国的1/4）的地区。本研究结果表明，蒙古族和接触牲畜可能是引起Hp感染的重要因素。这可能是由于本地区蒙古族的家庭中饲养牲畜较多，主要与密切接触牲畜这一因素有关。Varia等调查了一屠宰场工作人员的血清Hp抗体，发现直接处理新鲜肉类的工人其血清Hp抗体滴度较办公室工作人员明显升高，并认为可能是动物传播给人。

表3 各主成分在各标准化指标上的4系数

本研究又应用多因素分析——主成分分析方法，对Hp感染的流行因素作了进一步分析，其结果也进一步提示，常饮生水，喜吃辣食，蒙古族，年年，家庭成员有胃病史，吸烟，饮酒，接触牲畜及吃生菜9个因素可能是Hp感染流行的重要因素。

城市及农村幽门螺杆菌血清流行病学对比研究

大量研究资料表明：幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）是慢性活动性胃炎的重要致病因素之一，在胃、十二指肠溃疡的发病中也起着重要作用，与胃癌的关系不少学者正在探索之中。在我国，大部分资料报道了经内镜检查者的Hp感染情况，而对人群的Hp感染了解甚少。至于Hp的传染源、传播途径等问题至今仍不清楚。本文应用已建立的检测Hp抗体IgG的ELISA方法，用酶免疫试剂盒（ELISAKit）对上海市区及郊区农村的人群进行Hp抗体检测，探查Hp感染情况。

1 对象和方法

1.1 对象

1990年1～6月,对上海市区“健康”体检者896人作了血清H抗体检测，其中男性558人，女性338人。年龄7～81岁，平均59.2岁。另外对嘉定县望新乡“健康”体检者1040人作血清Hp抗体检测，其中男性627人，女性413人。年龄为7～85岁，平均58.1岁。

1.2 方法

对每一调查者详细询问职业、吸烟、饮食情况、烹调习惯、家中饲养动物及有无消化系症状（如腹胀、上腹痛、反酸、嗳气、恶心、食欲不振）等。随后抽血2ml，分离血清后，置—20°C贮存，待测抗Hp抗体。检测血清Hp抗体IgG的ELISA法：采用同一批试剂盒，由专人负责进行测定。按常规操作用酶标分光光度计（490nm处）读取A值。每块板均设阳性对照、阴性对照和空白对照。结果用待检血清A值与阴性对照和空白对照。结果用待检值A值与阴性对照A值的比值来表示，该比值>1.70为阳性。而≤1.70为阴性。

2 结果

2.1 嘉定望新乡和上海市区人群Hp感染率

嘉定县望新乡7岁～9岁年龄组Hp感染率就已很高（56.4%），以后随着年龄的上升，感染率有逐渐升高的趋势，50岁以后感染达高峰（68.6%），各组间比较差异显著性（P>0.05）。70岁以后感染率明显下降（42.1%），且与上述各组比较差异有显著性（P＜0.05）。上海市7～9岁年龄组Hp阳性率仅为27.4%，明显低于各年龄组（P＜0.05）。10岁以后（P＜0.05）感染率上升，至50岁以后达50.0%。70岁以后感染率又明显下降（P＜0.05）。对嘉定县望新乡与上海市人群（P＜0.05）感染率的比较可以看出：除70岁以上年龄组外，前者各年龄组Hp感染率均明显高于后者，尤以7～9岁组为甚（表1）。

表1 嘉定县望新乡和上海市区人群Hp感染率比较

表2 Hp感染与症状的关系

P<0.01,各组有、无症状比较

2.2 Hp感染与症状的关系

由表2可见，无论城市或农村，有症状者的Hp抗体阳性率明显高于无症状者，说明症状与Hp感染密切相关。另外，Hp感染与性别、职业、是否吸焑、食肉食情况、烹调习惯、家中饲养动物情况、是否饮生水等无关（表2）。

3 讨论

本研究用酶免疫检测试剂盒来检测抗Hp抗体IgG，以了解人群的Hp抗体的检出率。我们在建立该ELISA方法时，与胃粘膜培养、涂片都进行了比较，敏感性为94%，特异性为87%，阳性预测值96%。该试剂盒的重复性及稳定性均很好，每次试验都有质量控制标准，且Hp抗体的存在可以反映以往及现在Hp感染。因此，在Hp的流行病学调查中用该方法及试剂盒来诊断Hp感染是可靠的。

Hp感染是一个世界性问题，但至今对Hp的传染源、传播方式等还不清楚。一些研究指出：Hp感染与社会经济情况及卫生状况有关。印度的下层社会人群的Hp感染率为79%，20岁时感染率已达80%。对秘鲁的1120例有胃肠道症状而行胃镜检查的患者调查Hp感染情况，发现上流社会的妇女Hp感染率明显低于上流社会男子及中下流社会者。在泰国曼谷一家弧儿院中调查发现：76%的1～4岁儿童都感染了Hp。而在美国、澳大利亚等国家，20岁以前Hp感染率很低，以后随年龄逐步上升，但平均感染率仅为30%左右。我们对城市、农村的Hp抗体普查结果发现：农村人群的Hp感染率（61.6%）明显高于城市（40.5%）。从年龄组来看，除70岁以上组外，农村各年龄组的Hp感染率均明显高于城市（P<0.05或P<0.01），尤以7～9岁组更为明显，分别为56.4%和27.4%。其原因可能与两地区的生活和卫生状况有关。提示Hp可能通过粪—口途径传播。另一理由是Hp抗体获得率与甲型肝炎抗体的增长相平行，而甲型肝炎是一种典型的粪-口传染病。

以前曾做过上海市小批量人群的Hp抗体检测，由于样本量小所产生的偏差所致，Hp感染率较本文资料为高。另外，无论上海市、望新乡，70岁以上年龄组中，Hp感染率均较70岁以前为低（P<0.05），且两组的Hp检出率无差别（P>0.05），这可能与老年人的免疫功能减退有关。本研究还发现Hp感染与胃肠道症状相关，这与文献报道相符。

Hp感染与胃癌的关系也日益受到胃肠病学家们的关注。日本、苏格兰等胃癌发病率高的国家，Hp感染率亦高，而美国、新西兰等胃癌发病率低的，其Hp感染率亦低。嘉定县望新乡胃癌死亡率（53.84/10万）高于上海市区胃癌死亡率（43.37/10万）。而本研究发现前者的Hp感染率高于后者，Hp感染与胃癌的关系值得进一步研究。

4．2幽门螺杆菌感染与家庭聚集现象有研究

广东农村幽门螺杆菌感染的血清流行病学调查

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori , Hp)是慢性胃炎的主要病因，也可能是消化性溃疡特别是十二指肠溃疡的主要致病因素。有关Hp传染源和传播算什么尚不清楚，在家庭内密切的生活接触是否传播结论不完全相同。我们建立了间接ELISA法检测血清抗Hp抗体IgG的方法，对广东两地区三个自然村123个家庭545名成员进行血清流行病学调查，现将结果报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

1992—12～1993—02以广东省广州市从化县良口镇塘料村、广东省清远市横荷镇打古乡榕树村、清远市石湾镇红连村为调点，以家庭为单位，调查了123个家庭545名家庭成员（同住一起）。1岁以下儿童因可能携带母体抗体而剔除。

1.2　 方法

使用统一设计调查表，应用问卷方式，由专人填写。内容包括一般情况，生活饮食情况、身体健康状况，疾病家族史，经济情况、居住情况及精神心理状态等。填表后，每人抽取肘静脉血2ml，分离血清于-20°C保存待测。对545例受检者血清标本进行编码，至所有检测结果出来后破码。所有标本均用一人负责检测。血清抗HpIgG抗体测定：采用ELISA法检测血清抗HpIgG抗体。用Hp的纯培养物制备超声粉碎抗原，采用棋盘滴定法测定ELISA中各反应物浓度，用20μg/ml的抗原包被40孔聚苯乙烯反应板，待检测血清稀释为1:200，辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG稀释为1:1000，底物为邻苯二胺，用硫酸终止反应后，在490nm处读取吸光度值（A）。每个待检血清均作复孔，每块均设阳性、阴性对照，以阳性对照和阴性对照为质控标准，若比偏差＞5%,则弃去此板.结果用被检血清A值与阴性对照A之比表示,该比值≥2.0为阳性,＜2.0为阴性。该方法对诊断Hp感染的敏感性为94.1%。特异性为86.9%。

统计学处理 Hp感染率用百分率表示，各组数据比较采用X²检验。

2 结果

2.1自然人群抗HpIgG情况

抗体阳性268例，Hp感染率为49.17%，平均抗体水平0.53±0.15（X±SD）。243例男性受检者中，抗体阳性117例，Hp感染率为48.15%，平均抗体水平0.51±0.15,302例女性受检者中,抗体阳性151例，Hp感染率为50.00%，平均抗体水平0.54±0.16。受检男性与女性比较，Hp感染率及平均抗体水平均无显著性差异（P＞0.05）。三个自然村的一般情况：生活饮食习惯．身体健康状况．经济情况．居住情况及精神心理状态等因素之间，均无显著性差异（P＞0.05）。塘料村。榕树村和红莲村的家庭成员Hp（P＞0.05）感染率分别为46.25%、52.73%和50.13%，三者比较，无显著性差异（P＞0.05）。

2.2 Hp感染与年龄的关系

＜5岁组，Hp感染率已达23.44%。5岁以上人群，Hp感染随着年龄的增长而增长，每年增加约1%，50岁以上人群Hp感染率高达83.65%（表1）

表1 广东农村545例Hp感染的年龄分布

2.3 父母Hp感染情况及其家庭成员的关系

父母抗Hp-IgG抗体水平为索引,对105户(父母均检查)家庭成员与父母Hp感染情况分析,结果45户父母抗体阳性的家庭成员(不包括父母在内)115例，Hp感染率70.43%(70/115)，平均抗体水平0.71±0.15，35户父母抗体均阴性的家庭成员107例，Hp感染率为24.30%(26/107)，平均抗体水平0.32±0.12，29户父母一方抗体阳性的家庭成员77例，Hp感染率为45.45%（35/77），平均抗体水平0.53±0.14。三组间比较，父母抗体均阳性的家庭成员，Hp感染和平均抗体水平显著高于父母抗体均阴性的家庭成员（P＜0.05），也高于父母一方阳性的家庭成员（P＜0.01），父母一方阳性的家庭成员显著高于父母均阴性的家庭成员（表2，P＜0.01）。

表2 广东农村父母Hp感染与家庭成员的关系

^aP＜0.05,^bP＜0.01

3 讨论

本研究是国内外首次采用间接ELISA法检测抗HpIgG抗体水平的方法，对农村家庭作整体Hp感染的血清流行病学调查，结果发现了Hp感染在农村家庭普遍存在，Hp感染率为49.17%。Hp感染男女之间无显著性差异（P＜0.05）。5岁以下儿童Hp感染率较高（23.44%），显著高于工业化国家的儿童，5岁以上人群Hp感染率随年龄的增长而增加，每年增加约1%，与文献报道一致。本文三个自然村的一般情况，生活习惯、经济情况、居住情况与精神心理状态等因素基本相同，Hp感染率也无显著性差异（P＞0.05），提示了Hp感染可能与上述因素有关。

许多研究证实，Hp感染在家庭中有聚集现象，Raums等调查了一个8名成员都感染了Hp的家庭，经DNA分析证实所分离出的Hp菌株属同一亚型。Miichchell等用ELISA法检测了4个Hp阳性患儿的14名家庭成员及166例对照的抗体，结果观察组阳性率为64%，对照组13%，认为胃内携带大量Hp者经密切接触可能通过呼吸道飞沫和粪一口传播。本文以父母Hp感染情况为索引，分析105个家庭的父母Hp感染情况与家庭成员的关系，结果父母抗体阳性的家庭成员，Hp感染率及平均抗体水平均显著高于父母抗体均阴性的家庭成员，提示了Hp感染在家庭中有聚集现象。说明Hp通过密切生活接触存在着人—人传播或同时暴露同一个传染源的可能性。

农村青年幽门螺杆菌感染的家庭调查

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori; Hp）是一个世界性问题我国属于感染率较高的国家。一些最新的资料提示，该菌感染可能与胃癌的发生有关。发展中国家胃癌的发生率很高，儿童Hp感染也很普遍，1992—12～1993—02我们对农村青年Hp感染情况进行家庭调查，旨在探讨其在家庭接触中Hp感染的频度、儿童年龄组Hp感染率以及Hp的传播途径。

1 对象和方法

1.1 对象

分取福建省长乐县、安徽省怀远县、广东省从化市的自然村各1个，共计调查了88个家庭20岁以下人群241人，1岁以下儿童因可能携带母体抗体而被剔除。

1.2 方法

血清学检测应用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）法，所有血清标本均在南方医院消化中心实验室由专人负责检测。每个标本的结果以待测血清OD值（P）与阴性对照OD值（N）的比值（P/N）表示，P/N<2.0为阴性，P/N≥2.0为阳性。本法诊断Hp感染的敏感性为93.9%，特异性为86.8%，阳性预测值90.7%，阴性预测值91.7%。全部数据在AST486微机上采用SAS统计软件完成。

2 结果

①20岁以下人群Hp感染率及平均抗HpIgG抗体水平均以胃癌高发区的长乐为高（55.8%,2.11±0.60）、胃癌中发区的怀远为中（47.1%.1.98±0.41）、胃癌低发区的从化为低（29.4%,1.71±0.48），且高与低发区之间差异有非常显著性（P<0.01）。②3个地区Hp感染率均表现为随年龄增长而上升。各年龄组均以福建长乐Hp感染率高，且5岁以下组已达50.0%，说明胃癌高发区Hp感染的年龄亦早（见表1）。③父母Hp均为阳性者其子女Hp阳性率及平均抗体水平（56.9%,2.10±0.57）均显著高于父母均为阴性的子女（23.6%,1.78±0.52），P<0.01；但与父母一方为阳性的子女（47.7%,1.98±0.58）相比差异无显著性（（P<0.05）。④5岁以下儿童41例，母乳喂养30例，Hp阳性率为30.0%；人工喂养11例，阳性率为45.5%。自幼父母口嚼食物喂养史的22例中9例Hp阳性，占40.9%，无口嚼食物喂养史19例中5例阳性，占26.3%。其中有口嚼喂养史9例阳性中8例为母亲阳性者，仅1例母亲为阴性。

表1 从化、怀远、长乐三地各年龄组Hp感染情况

3讨论

本组结果显示Hp感染率随年龄增长而升高，胃癌高发区Hp阳性率和平均抗体水平均高，且感染的年龄早，5岁以下组已达50.0%。胃癌中、低发区Hp阳性率也处于相应中、低水平，Hp感染率与胃癌死亡率的高低呈平行关系。同时发现父母均为阳性或父母一方为阳性的子女Hp感染率及平均抗体水平均明显高于父母均为阴性的子女，其中尤以父母均阳性的子女Hp感染率高且程度重，说明Hp可通过密切接触而人—人传播。我们调查了5岁以下儿童的喂养史，发现自幼有父母口嚼喟养的儿童，其母为Hp阳性者的感染率显著高于其母为阴性者，幼儿期感染与Hp阳性母亲的不良喂养习惯有密切关系。有人用聚合酶链反应及斑点杂交技术从牙垢、唾液及粪便中检出Hp，结合本组资料说明Hp可能是人—人、口—口、粪—口传播。初次感染Hp年龄较早的人群萎缩性胃炎及胃癌的发生率也高。

幽门螺杆菌感染在家庭内聚集

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）是慢性胃炎的主要病因，可能也是消化性溃疡，特别是十二指肠溃疡的主要致病因素。有关Hp的传染源和传播途径尚不清楚。在家庭内密切的生活接触是否传播，结论不完全相同。我们以家庭为单位，调查Hp的感染情况，探讨密切的生活接触传播Hp的可能性。

1 对象和方法

1.1 对象

因上消化道症状进行胃镜检查的患者，2个月内未服任何抗生素和铋剂，无手术史。内镜检查作出诊断，在胃窦部和体部取粘膜标本各2块，送病理检查，其标准参照悉尼胃炎分类法。在胃窦部取标本1块作尿素酶试验。根据组织切片Warthin-Starry银染色和尿素酶试验的结果确定有无Hp感染。随机选择12例Hp阳性教员和8例阴性者作为标引患者（index patient）。用ELISA检测血清抗HpIgG抗体。以这些标引患者为线索，对其所有密切接触的家庭成员（吃住在一起）进行调查，询问有无胃病症状，与标引线索，对其所有密切接触的家庭成员（吃住在一起）进行调查，询问有无胃病症状，与标引患者的关系。每人抽血2ml，分离血清于—20°C保存。共20个家庭103名成员。其中Hp阳性标引患者家庭12个，Hp阴性标引患者家庭8个。

1.2 方法

血清抗HpIgG抗体测定 用Hp的纯培养制备超声粉碎物抗原,采用棋盘滴定法测定ELISA中各反应物浓度。用20μg/ml的抗原包被40孔聚苯乙烯反应板。待检血清稀释为1:200，辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG稀释为1:10000。底物为邻苯二胺，用硫酸终止反应后，在490nm处读取吸光度值（A）。每个待检血清均作复孔，每块板均设阳性、阴性对照和空白对照，以阳性对照与阴性对照之比作为质控标准，若此偏差>5%，则弃去此板。结果用被检血清A值与阴性对照A值之比表示，该比值≥ 2.0为阳性，＜2.0为阴性。该方法对诊断Hp感染的敏感性为94.1%，特异性为86.9%。

对103例受检者的血清标本进行编码，直到所有检测结果出来后才破码。

2 结果

标引患者的一般情况列于表1。8例Hp阴性标引患者中（男3例），内镜诊断为十二指肠溃疡1例，轻度红斑渗出胃炎6例；12例Hp阳性标引患者中（男8例），内镜诊断为胃溃疡1例，十二指肠溃疡3例，复合溃疡2例，隆起糜烂性胃炎1例，红斑渗出性胃炎5例；两组组织学诊断均为慢性胃窦炎，其中8例有活动性。

表1 标引患者20例的一般情况

bp<0.01

103例受检者中抗HpIgG抗体阳性50例（48.54%）。52例男性中抗体阳性27例（51.92%）,51例女性中抗体阳性23例(45.09%)。二者差异无显著性（P>0.05）。Hp感染在不同年龄组中的分布列于表2。Hp阳性标引患者家庭成员有64例，其中检出抗HpIgG抗体阳性者44例，阳性毫无疑问为68.75%，平均抗体水平为0.64±0.38(x±s)；Hp阴性标引患者家庭成员有39例，其中6例抗体阳性，阳性率为15.38%平均抗体水平为0.34±0.12，两组差异有非常显著性，（P<0.01），如果将标引患者剔除，Hp阳性者家庭成员的抗体阳性率和平均抗体水平仍显著高于Hp阴性者家庭成员（61.53%对19.35%，0.59±0.35对 0.35±0.13，P<0.01）。

表2 Hp感染的年龄分布

Hp阳性标引患者家庭24例夫妻中有22例（91.7%）是抗体阳性，抗体水平为0.75±0.41。Hp阴性标引患者家庭16例夫妻中仅有2例（12.5%）为抗体阳性,抗体水平为0.35±0.13，两组差异有显著性（P＜0.01）。

父母抗体均为阳性的子女的抗体阳性率为63.6%(14/22),平均抗体水平为0.52±0.19;父母抗体均为阴性的子女的抗体阳性率为22.2%(4/18),平均抗体水平为0.35±0.13。两组差异有非常显著性（P＜0.01）。

3 讨论

本调查对象都来自农村，Hp感染率为49%，说明人群中Hp感染非常普遍。另外一个特点就是感染Hp的年龄较早，在10岁以下小儿感染率已超过20%，显著高于工业化国家儿童的Hp感染率。从全球来看，Hp的感染率在不同人群、不同人种、不同地区有很大差异。在发展中国家显著高于发达国家，可能与社会经济状况、卫生习惯和医疗水平有关。社会经济状况低的人群感染率高，在卫生条件差的弧儿院的儿童和收容所的低能弱智儿童感染率高，这些资料提示粪—口传播的可能性。还有人证明Hp抗体的阳性率与甲型肝炎抗体的增长平行，进一步支持通过粪—口途径传播。关于家庭成员间的密切接触是否造成Hp传播的问题，Jone等调查了40例Hp阳性慢性胃病患者的家庭成员，提出Hp感染在家庭内传播的可能性不大。Drumm等对93例有或无Hp感染儿童的家庭成员进行抗HpIgG抗体的调查，结果表明Hp感染在家庭内聚集性。我们通过对20个家庭的调查，证实Hp感染在家庭内有聚集现象，Hp阳性标引患者家庭成员无论是抗HpIgG抗体阳性率还是平均抗体水平显著高于Hp阴性标引患者家庭成员，提示通过密切的生活接触存在人—人传播的可能性，或家庭成员共同暴露于同一个传染源。本文结果还显示夫妻的抗体阳性率在Hp阳性标引患者家庭显著高于Hp阴性标引患者家庭，说明在获得感染过程中，生活环境比遗传因素更重要。

4．3不同年龄幽门螺杆菌感染情况研究

小儿幽门螺杆菌感染调查

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）感染与胃炎及上消化道溃疡密切相关，已为世人所公认。成人感染率，无症状者可达50%左右。近年来的研究表明，小儿亦有不同程度感染。1993年6月～1994年6月，北京友谊医院儿科与中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所协作，对北京市小儿各年龄组的自然人群感染率进行了调查。结果报告如下。

1对象和方法

1.1 对象

共394人，男201人，女193人。4岁～11岁各年龄组儿童来自一个托儿所及某小学学生，按班普查；1岁～3岁幼儿及12岁以上系在我科门诊体检的正常儿及因各种急性病而住院的恢复期小儿。

1.2 方法

采用中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所提纯的幽门螺杆菌尿素酶抗原，用ELISA法检测血清中相应的IgG抗体。以酶标分析仪于波长492nm处测OD值，样品与阴性对照平均值之OD比值大于2者判定为阳性。经有关单位数千例病人验证，其敏感性和特异性均达95%，临床符合率达90%以上。

表1 394名小儿抗—HpU检测结果

2 结果

小儿各年龄组自然人群抗幽门螺杆菌尿素酶抗体（抗—HpU）阳性率见表1。结果显示：1岁～3岁小儿阳性率较高。此后，除7岁组较高，10岁组较低外，其总趋势为随年龄的增加而增加，与文献报道大致相符。

我们共普查394人，其中男203人，29人阳性，阳性率14.2%；女191人，33人例阳性，阳性率17.3%。经百分率X²检验，P＞0.05，二者差异无显著性，与在成人组中的观察资料一致。本组自然人群中，经询问本人及家长，4岁～11岁者338例中，反复发生腹痛者幽门螺杆菌感染阳性率较高，与无症状者相比差异有显著性（表2）

表2 小儿腹痛338例与Hp感染

3 讨论

幽门螺杆菌感染见于世界各地及各年龄组人群,是上消化道疾患的重要原因之一.其确诊需经胃镜活检组织学培养,这对于成人而言,无疑是科学的、相对易行的方法；但对小儿来说，,痛苦较大,孩子及家长均难以接受。因此，进行血清学检测在儿科领域势在必行。抗幽门螺杆菌尿素酶抗体检测是一个简单、易行，比较可靠的方法。国内外普遍认为，血清学检测在流行病学调查及是否需要胃镜检查进行初筛是极为有利的。许多作者认为，成人的Hp感染率及消化道疾病之所以较高，是与小儿时期即已发生的Hp感染密切相关，在发展中国家尤为如此。换言之，各地感染率高低差异的关键在儿童期小儿Hp感染直接影响到成年期的身体健康状况。因此，对小儿幽门螺杆菌感染的普查与防治是十分必要的。

Blecker对466名2岁～13岁无症状小儿的调查结果表明，其感染率为1%～22%。该作者指出，小儿Hp感染并非逐龄连续性增高，但其总体趋势是随年龄的增加而增高，而且8岁～13岁者较学龄前小儿明显为高，这与我们的结果相似。为了清楚地了解我国小儿Hp感染的状况，我们在北京市首次按年龄组进行了较为细致的调查与分析。结果表明，1岁～12岁总阳性率为15.7%，4岁以上无症状者的阳性率为11.%，较发达国家略高。而1岁～3岁小儿感染率较高，推测其可能与家庭内密切接触及某些生活方式有关。至于7岁组有较高感染率，原因尚难推测。许多资料表明，人与人之间及家庭内的交叉传播是Hp感染逐龄增高的重要原因。我们的资料同样证实，Hp感染有随年龄而增加的总趋势，及至12岁～13岁时，其感染率已达30%，不容忽视。我们的调查也表明，男女两Hp感染方面没有明显差别（P＞0.05）。

Hp感染既可引发疾病，又可为无症状带菌者，那么，对于Hp感染者空间应采取什么对策呢？有资料表明，Hp阳性的小儿中，70.4%有胃窦炎。也有人指出，约10%的小儿可反复发作腹痛，伴有Hp感染的胃窦炎是其病因之一。在我们所普查的4岁～11岁儿童中，经常发生腹痛者57例（14.5），其中抗-HpU阳性者14例，占24.6%，远较无症状者的阳性率为高，二者差异有显著性。因此，对出现临床症状的Hp感染者，应积极给予治疗。

青老年幽门螺杆菌阳性患者病情分析

大量研究表明，胃粘膜幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp），是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的重要致病因素，本文通过调查分析了在Hp阳性情况下，青、老年人发病情况，进一步证明了这个观点。现报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

随机抽取1992～1995年因有上消化道症状而来我院做胃镜检查、并经检测Hp阳性的患者600例，将小于30岁（15岁～30岁）100例者做为青年组，大于60岁（60岁～81岁）者80人做为老年组。

1.2 方法

胃镜检查前控制吸烟、饮酒、禁服止酸剂，H₂受体拮抗剂，抗生素及阿斯匹林类药物，使用日本产OlympasXQ20胃镜，所有病人均在胃窦部取胃粘膜一块，立即将组织放入尿素酶试剂溶液中（使用福建三强生化有限公司研制的快速尿素酶试验（HpUT，药盒），5min后观察结果，如溶液呈樱桃红色为Hp阳性。

2 结果

表1 青老年组Hp阳性患者胃镜病理检查结果

在600名（表1）阳性病人中，青年组占19.83%(119/600),老年组占13.67%(82/600))P<0.05。其中，慢性胃炎青年组中占92.44%（110/119），在老年组占82.93%（68/82）（P<0.05）；消化性溃疡在青年组有22.69%(27/119),在老年组有9.76%(8/82)(P<0.05);胃癌在青年组占1.68%(2/119),在老年组占13.41%(11/82)(P<0.01)。

3 讨论

Hp感染率在不同地域、不同人群、不同人种有很大差异，烟台地区位于胶东半岛，有牟平等胃癌高发县区。在600名Hp阳性患者中，小于30岁的青年组较大于60岁的老年组Hp阳性者多（P<0.05），老年组平均年龄72.9岁，这与潘志军等人提出的“70岁以上年龄Hp感染较70岁以前为低”的观点相符。另外，Hp阳性病人中慢性胃炎、消化性冲疡、胃癌发病率较一般人群增高，提示Hp感染与以上疾病的发病有明显相关性。

从表中亦看出，青年组的慢性胃炎，消化性溃疡的发病率较老年组高，而老年组胃癌的发病率较青年组明显增高。危北海、卞飞松等人在研究中发现：Hp与中医辩证有密切的关系，邪盛者Hp阳性率增高，正虚者偏低。而按中医辩证老年人病程久、体质弱、多虚证。青年人病程短，体质强，多实证。另外，Horan等在研究中亦提出“老年人Hp感染率下降，可能与老年人的免疫功能减退有关”的观点。虚证病人胃泌素产生细胞（G细胞），生长抑素产生细胞（D细胞），均较实证患者明显减少，G/D比值明显增高，故相应激素含量都处于低水平状态，从而出现一系列相应症状，虚证越重、肠化越严重，癌变趋势越大。这与本组老年人胃癌发病率明显升高相符。此外，单纯性胃癌在本次调查中未发现，13名胃癌患者全伴有慢性胃炎，这提示我们慢性胃炎与胃癌的发生有明显相关性。

故临床促使Hp转阴仍应是治疗胃部疾病的重要手段，并应从青少年做起，通过治疗减少Hp的感染率，达到减少胃癌发病的目的。

青少年胃炎与幽门螺杆菌感染的关系

1983年澳大利亚学者Warren和Marshall从人胃粘膜中首次分离出幽门螺杆菌（Hp）以来，有关Hp的报告渐多，认为Hp可能是胃疾患的致病因子，与胃炎、肠炎及溃疡等疾患有关。但对青少年胃炎与Hp关系研究的资料尚少。对二者的关系研究将有助于阐明人类胃炎与Hp的关系，并对胃炎的发病机理、转归及预防控制提供有益的资料。本文将进行该方面的分析。

1 材料和方法

1.1 材料

胃镜活检材料选自甘肃省医科院肿瘤所、肿瘤医院1981～1990年间的174例25岁以下的胃镜活检患者。所有患者均有近期的上腹疼痛，胃镜检查的目的在于排除胃肠溃疡。

1.2 方法

胃活检粘膜组织学诊断依据全国胃癌病理协作组标准。组织均经石蜡包埋，HE染色，部分切片行改良Giemsa染色。有资料显示，HE染色可良好地显示Hp菌，其特异性和敏感性与尿素酶试验和MBUT（microtiter biopsy urease test）等特异性方法不差上下。我们的经验表明，HE染色的效果良好（图略），与改良Giemsa方法（图略）相仿，遂将HE用作Hp的常规病理染色方法。Hp的计数采用半定量方法，即：Hp－，无细菌可见；Hp+，见少量细菌；Hp++，见中等量细菌；Hp+++，见多量、密集的细菌。Hp在油镜下观察。

统计学方法，使用t检验进行显著性分析。

2 结果

本组174例中，男118例，女56例，平均年龄21.9岁。其中男性平均年龄12.7岁（12岁～25岁）；女性平均年龄22.3岁（14岁～25岁）。共取粘膜活检206个部位，窦部154块体部52块。174例中，142例为胃疾患患者，其中慢性浅表性胃炎76例（43.1%），慢性萎缩性胃炎58例（33.3%），糜烂性胃炎4例（2.3%）胃部溃疡5例（2.9%）。另有32例为正常或接近正常的粘膜，间质有极少量炎性细胞，粘膜腺体、毛细血管及肌层均正常（表1）

表1 174例胃镜活检组织学诊断

在油镜下观察见Hp多位于粘膜表面粘液中或紧贴于上皮及胃小凹内和腺体表面,甚至到上皮之间。在HE染色中，Hp嗜苏木素，形状呈S形，C形或海鸥形。窦部粘膜（n=152）中，20块（13.2%）为正常粘膜，66块（43.4%）为活动性或非活动性慢性浅表性胃炎；慢性萎缩性胃炎57块（37.5%）；急性胃炎伴糜烂3块（2%）；溃疡6块3.9%。体部粘膜（n=54）中，正常24（44.4%），浅表性胃炎25（46.3%），萎缩性胃炎4（7.4%），急性胃炎1（1.9%）。Hp菌在不同部位计数结果列入表2。统计结果示，窦部Hp阳性率较体部为高（t=2.27,P＜0.05）。

表2 胃粘膜Hp密度及频度

活动性浅性胃炎Hp阳性率较非活动性者高(活动性19/29,非活动性18/46,t=2.23,P＜0.05)。萎缩性胃炎中，活动性与非活动性之间无显著性差异（P＞0.05）。慢性浅表性胃炎和萎缩性胃炎Hp阳性率与正常者相比均有显著性差异（t各为2.33,2.16,P<0.05）。浅表性与萎缩性胃炎之间无明显差异（P>0.05,表3）。

表3 胃粘膜组织学类型与Hp分布关系

3 讨论

不少文献显示，慢性胃炎发病率随年龄增加而增加，25岁以下青少年胃粘膜慢性炎症改变较为常见。本组研究发现76%活检病例（133/174）为慢性胃炎。在组织形态学上，其改变与成人无异，其主诉主要是上腹部疼痛。急性胃炎（2.3%）及溃疡(2.9%)少见.本组患者中，从77例检出Hp（44.3%），其中粘膜正常者8例，占正常粘膜的25%（8/32）。在133全慢性胃炎中，有65例（48.9%）Hp阳性。这些结果提示，慢性胃炎与Hp有密切关系，支持其它学者的结论。

1984年，澳大利亚Hill等首先报告了一组儿童（6岁～15岁）病例，Hp检出率24%（6/25）。随后，一些学者亦做了同样的工作，Hp阳性率为32%（8/25），44.4%（8/18），平均年龄各为10岁和11岁。Niedobitdk等在一组200例25岁以下青少年胃镜活检材料中，检出慢性胃炎83例（31.5%）。按取材部位计，Hp检出率为61.9%，前者较本文（133/174，76.4%）低，后者较本文（88/206，42.7%）高。青少年胃炎一般有上腹部疼痛，胃粘膜有无明显诱因的炎性改变者，Hp可能是主要原因。

胃粘膜的Hp感染，无论在儿童，还是在成人，都是一个慢性的、长期未解决的世界性难题。虽然症状可能消失，但胃炎及Hp菌对抗菌素治疗反应不佳。

无症状青年250例胃粘膜病理和幽门螺杆菌检测

近年来大量研究表明，幽门螺杆菌（以下简称Hp）是慢性胃炎和消化性溃疡的一个重要致病因素。在自然人群中，Hp感染也相当广泛，成人可达50%～90%，在发达国家的20岁人中尚达10%。国内有关无症状健康人Hp的感染情况报道较少，本文对150名无症状健康青年进行了胃镜、病理和Hp检测对照研究，其结果报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

共计250名，男性，17-22岁（平均20岁）。因工作关系，近期曾经过两次正规体检，证实为无症状健康青年。所处环境、生活和卫生条件均较好。

1.2 方法

以日本Olympus GIF-XQ10型内镜，按常规进行全面观察，胃炎诊断参照悉尼系统执行。每例均于观察后，于胃窦部，大小弯或炎症部位分别取活检组织3块，1块投入Hp快速诊断试剂瓶中，另两块做组织病理检查。切片常规HE染色，诊断参照悉尼系统执行。Hp检查所用试剂为上海第二医科大学生产，按其说明判断结果。生活习惯调查如经常性吸烟，饮酒及喝生水等，以了解其对慢性胃炎和Hp检出率的影响。

2 结果

在250名无症状健康男性青年中，胃镜肉眼所见胃粘膜属正常表现者仅91人，占36.4%，而表现为各型慢性胃窦炎者为159人，占63.6%。由此可见，胃镜下慢性胃炎可以无胃部症状。在91人胃镜检查正常者的活检标本中，57人组织学正常，尚有34人（37.4%）病理诊断为慢性炎症。符合率公仅62.6%。在胃镜诊断的各型慢性胃窦炎159例中，病理诊断为炎症者仅82例，符合率仅占51.6%。但其中7例糜烂性胃炎，病理诊断均为炎症，且4例为活动性炎症，余77人组织学未见异常（占48.4%）。本组胃镜与病理诊断符合率较低，其原因可能与病变程度、取标本部位有一定关系（表1）

表1 无症状青年胃镜组织学与Hp检测结果

在胃镜下胃粘膜正常的91例中,Hp阳性15例,占16.5%;而在159例慢性胃窦炎中,Hp阳性51例,占32.1%,两者相比,差异非常显著(P＜0.01)。7例糜烂型胃炎，Hp阳性6例，占85.7%，明显高于其它型胃炎。在充血渗出型和胆汗返流型中，Hp阳性分别为29例（34.9%）和16例（23.2%），经统计学处理（P＜0.05）两者无显著差异。与Karttune等的观点一致，若按全组250例计，则Hp阳性66例，占26.4%，高于美国同年龄组10%的1.64倍。

经常吸烟和饮生水者的慢性胃窦炎和Hp检出率与不吸烟及不饮生水者有显著差别（P值＜0.01）。而饮酒与否则差别不大（P＞0.05）。提示喝生水可能是Hp感染的重要传播途径之一，吸烟与慢性胃窦炎呈相关（表2）。

表2 不良生活习惯对慢性胃窦炎和Hp检出率的影响

^bP＜0.01

胃镜下胃粘膜状态与Hp感染的检出并不完全平行。推测Hp感染后到引起粘膜炎症的形态改变需经一个过程，此乃造成不平行的一个可能原因。

3 讨论

慢性胃炎在自然人群中的发病率迄今尚无统计，一般认为比较常见，且随年龄增长而增加。在医院门诊接受胃镜检查的患者中，慢性胃炎的检出率约占80%～90%。本组对卫生条件较好的两个小群体共250名无症状健康男青年（平均年龄20岁）进行胃镜普查，检出各型慢性胃窦炎159例（占63.6%），可见本病的确较常见，但临床却呈无症状，若病变持续存在，随着年龄增长，或许在某一阶段出现症状，有待今后继续观察。本组胃镜与病理诊断在正常和炎症两方面符合率分别为62.6%与51.6%，比文献报道符合率60%～80%的水平偏低，但在腐烂型炎症，符合率为100%。可见胃镜下肉眼对胃粘膜正常或轻微炎症表现的判断，存在着一定的误差。

一般认为，我国属Hp感染率较高的国家。据对农村两组（人数较少）无症状青少年胃镜普查结果报告，Hp检出率分别53.6%与62%本组Hp检出率仅为26.4%，其较低的原因可能与本组人群生活较规律、卫生条件较好有关。据文献报道正常胃粘膜Hp一般为阴性，而本组胃镜下胃粘膜表现正常的91例中，Hp阳性32例，占29.4%，此可能与喝生水习惯有关，本组对250人调查有喝生水习惯者127人，Hp检出率为36.72%；无此习惯者123人，Hp 检出率为14.96% ，两者Hp检出率有非常显著差异（P＜0.01）。说明经常喝生水与Hp感染有密切关系，故纠正喝生水等不良生活习惯，对降低Hp感染率有一定意义。经常吸烟与不吸烟者Hp检出率29.38%和24.11%，两者无显著差异（P＞0.05）；喝酒与否对Hp的检出率无明显影响。但吸烟与否对慢性胃炎的胃镜检出率有显著相关性（P＜0.01）。

胆汁返流胃炎对Hp检出率的影响看法尚不一致，有人认为胆汁可直接抑制Hp的生长或认为胆汁返流破坏胃粘膜屏障，H⁺逆扩散，导致粘膜下层中性环境破坏，因而不利于Hp的生长。但本组胆汁返流型胃炎69例中，16例Hp阳性，占23.19%，与无胆汁返流的充血渗出型比较（Hp阳性29例，占34.94%），经统计学处理无显著差异（P＞0.05）。故本组胆0汁返流型胃窦炎对Hp的检出率无明显影响，与Karttune等认为胆汁返流并不影响Hp的检出率意见一致。

老年人幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病

目前许多研究已证明，幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与多种胃十二指肠疾病密切相关，并且流行病学资料也表明，Hp感染率有随年龄增长而升高的趋势。本研究对2657例患者进行分组分析，旨在探讨老年人胃十二指肠疾病与Hp感染的相关性。

1 对象和方法

1.1 对象

2657例因上腹不适、腹痛、腹胀、反酸、嗳气等症状而行胃镜检查者，男1408例，占53%，女1249例，占47%。≥60岁者（60岁～83岁）455例，占17%；＜60岁者（13岁～59岁）2202例，占83%。平均年龄41岁，另有健康献血者96例。

1.2 胃镜及活检

每例患者于胃镜检查时，取距幽门5cm周径内胃窦部活组织2块，1块送细菌学培养，另1块送组织学检查及Giemsa染色，检查前7d停服抗菌药物。

1.3 细胞学培养

用于每例胃镜活检的活检钳均经消毒液浸泡15min，再用75%酒精擦拭。取胃窦部组织1块置入装有3ml10%小牛血清布氏肉汤的运送试管中送检。Hp的培养基以布氏琼脂培养基为基础，加入脱纤维羊血及联合抗生素，3d后观察结果，并做有关生化反应鉴定。

1.4 组织学检查及Giemsa染色

活检标本用10%甲醛液固定，石蜡包埋，连续切片，HE染色组织学检查，并行Giemsa染色辨认Hp 。

统计学方法 X²检验。

2 结果

2.1 Hp 的检出率

2657例通过活检组织的细菌学培养及Giemsa染色检查，其中之一阳性者即确立为Hp感染，结果见表1。从表1可知两种方法Hp阳性率无显著差异，Hp总检出率为 67.2%。

2.2 老年组、非老年组及健康献血者Hp检出率比较

如表2所示，老年组检出率（77.1%）高于非老年组（65.1%），有上消化道症状的老年组与非老年组的Hp检出率均显著高于健康组（29.0%）。以上结果经统计学处理均有显著性差异（P＜0.01）。

2.3 老年组与非老年组胃十二指肠疾病病种及Hp检出情况比较

如表3所示，疾病病种：两组均以慢性胃炎及十二指肠溃疡最多。老年组患慢性活动性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡及胃癌者分别为32.7%（149例）、12.5%（57例）5.5%及15.4%，显著高于非老年组的22.8%（501例）、0.6%（13例）、3.4%及1.8%，均有显著性差异（P分别＜0.01,＜0.01,＜0.05及＜0.01）。老年组发现的慢性胃炎伴肠上皮化生及非典型性增生分别为7.9%（36例）和4.2%（19例），均明显高于非老年组的1.3%（29例）和0.6%（13例）（P＜0.01）。Hp检出率比较：两组中十二指肠溃疡及慢性活动性胃炎的Hp阳性率较高（88.8%～92.6%），两组之间无明显差异（P＜0.11）。老年组慢性胃炎及胃溃疡的Hp检出率分别为79.6%及76.90%，均高于非老年组的55.8%及46.0%，具有显著性差异（P分别＜0.01及＜0.025）。老年组胃癌及慢性胃炎伴肠上皮化生和异型增生的Hp检出率虽高于非老年组，但差异不显著（p＞0.1）。

表1 Hp检出方法及检出率

表2 老年组、非老年组及健康组Hp检出情况

表3 老年组与非老年组胃十二指肠疾病病种及Hp感染比较

3 讨论

Hp感染与慢性胃炎和消化性溃疡的关系及其致病作用,国内外已有大量报道研究对象为有上消化道症状的患者，无论老年组或非老年组的Hp检出率均显著高于无症状的献血者，提示Hp感染与某些上消化道症状的产生明显相关，这与文献报道是一致的。

根据人群Hp感染率的流行病学资料观察到，Hp感染有随年龄增长而升高的趋势。本组对有症状的患者进行分组观察，结果为老年组Hp总检出高于非老年组，支持年龄与Hp呈正相关的观点。

本研究还显示，老年组慢性胃炎及胃溃疡的Hp阳性率高于非老年组，并且慢性活动性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡及胃癌及构成比也高于后者，表明随年龄增长，老年人Hp感染率增高，使与其相关的胃十二指肠疾病的患病率随之增加，更进一步证实在老年人胃十二指肠疾病中Hp的致病作用。

有资料显示，慢性胃炎与Hp感染的流行病学有极大的相似性。目前多认为，Hp相关性胃炎是Hp使胃粘膜屏障破坏，而形成慢性炎症乃致溃疡。基于这个观点，可推测由于随年龄的增长，伴老年人组织器官的衰老，血管硬化，全身和局部免疫功能的减退，致使胃粘膜上皮腺体萎缩，血供减少，更新缓慢，以及对Hp清除能力下降，因而Hp感染率增高，使与其相关的胃十二指肠疾病的患病可能性也随之增加。

目前，Hp感染与胃癌之间的关系尚未明确，但某些慢性胃部病变久之可演变为胃癌的观点已被多数学者接受，这种癌变的病理过程被描述为：正常粘膜→←腺上皮增生（包括浅表、萎缩和溃疡等炎性病变）→←肠上皮化生及（或）异型增生→癌变。本组资料表明，老年组的慢性活动性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃炎伴肠化生及异型增生、胃溃疡及胃癌的构成比均高于非老年组，可认为以上诸多病变之间有不容忽视的联系。

综上所述，本组结果不仅支持Hp感染与年龄呈正相关的观点，同时基于Hp的致病作用，认为在老年人，与Hp相关的胃十二指肠疾病的患病率随之增加，本组结果充分表明两者之间密切相关。因此，我们的结论是，尽早确定有上消化道症状的老年患者的Hp感染，对防治老年人Hp相关性胃十二指肠疾病具有重要意义。

4．4国内各地区幽门螺杆菌感染情况研究

彝汉族慢性胃炎和消化性溃疡患者幽门螺杆菌的感染

自1983年Marshall和Warren从胃粘膜标本中培养出幽门螺杆菌（Hp），并指出与慢性胃炎的关系，引起了人们的重视。Hp检出的方法很多，我们于1990—09～1991—09对因上消化道症状而作胃镜检查，诊断为慢性胃炎和消化性溃疡的120例彝汉患者进行胃粘膜活检，做Hp尿素酶试验检查，现将其分析报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

本组120例，其中男70例(58.3%)，女50例（41.7%）；汉族72例（ 60.0%），彝族48例（40.0%）。年龄19岁以下12例（10.0%），20岁～29岁33例（27.5%），30岁～39岁28例（23.3%），40岁～49岁24（ 20.0%），50岁～59岁16例（13.3%），60岁以上7例（5.8%）。

1.2 方法

实验原理是根据Hp 在繁殖过程中产生大量的尿素酶将尿素水解成氨和HCO3^-，使试剂变成碱性而使酚红指示剂变色，尿素酶试验阳性提示Hp的存在。我们于受试者经胃镜直视下在胃窦部幽门前3cm处取胃粘膜1～2块，采用福建三强生化有限公司提供的HpUT试剂药盒做尿素酶试验，其阳性为Hp感染定植的标志。

2 结果

表1 慢性胃炎及消化性溃疡尿素酶试验

3 讨论

目前Hp与慢性胃炎的关系已较为明确,是产生慢性胃炎的主要原因。文献记载在慢性胃炎中Hp检出率为38.2%～78.5%，我们的检出率为68.32%，与文献记载一致。Hp与消化性溃疡关系尚不如与慢性胃炎的关系那样明确。但在消化性溃疡中Hp的检出率高于慢性胃炎，应用杀灭Hp药物可加速溃疡愈合，文献记载消化性溃疡Hp检出率为50%～85.1%，本组为63.2%，亦与文献记载一致。

关于胆汁返流与Hp感染的关系尚无一致的看法，本组资料胆汁返流48例中，44例检出Hp，阳性率为91.7%，占本组总共阳性率的54.3%，表现出明显的相关性。资料表明Hp极不耐性环境，体外实验以pH6.5时生长最好，pH<3.5或>7.5时生存能力下降，但是人正常胃液pH为1.3，碱性的胆汁返流入胃提高了胃液pH值，更有利于Hp生长。

通过胃镜取材，利用HpUT（CPUT）药盒对彝汉慢性胃炎和消化性溃疡患者进行Hp感染的检测，从而证明Hp感染亦是本地区慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素，伴有胆汁返流的更为明显的相关性，为临床治疗以上疾病提供了可靠的依据，应用临床取得了良好的效果，并收到了很好的社会效益和经济效益。

南京消化科人员幽门螺杆菌感染的流行病学调查

本研究应用检测末梢血抗幽门螺杆菌（Hp）IgG方法，调查南京地区102名消化科医护人员和130名非消化科医护人员感染状况。

1 对象和方法

1.1 对象

研究对象为南京市区6家医院的102名消化科医护人员（简作G组），年龄20岁～76岁，平均36.9岁；对照组为南京军区总医院的130名非消化科医护人员（简作NG组），年龄17岁～77岁，平均37.2岁。

1.2 方法

所有受试者须填表回答性别、年龄、专科医（护）龄、参加内镜操作与否及时间、有无胃病史及相应家族史等问题抗HpIgG检测：每位受试者均采集末梢血20μl滴于滤纸上，制作双份标本，晾干，装入塑料袋置4°C备检。末梢血抗HpIgG检测采用间接法ELISA。

统计分析 采用t检验。

2 结果

2.1 G组与NG组的抗体水平

G组与NG组的年龄、抗体水平（x±s）见表1。G组（0.71±0.29）与NG组（0.49±0.28之间OD差异非常显著（P＜0.05）；将上述两组中胃病史的人员剔除后，剩余人群的OD再行比较，结果与组间差异一致（P＜0.05）。

2.2 消化科工作年限与Hp感染

将G组人员按专科工作时间＜5，＜10，＞10a分为三类，结果见表2。将参与内镜工作人员按时间＜5a,5a～10a,＞10a分为3类，结果3组间Hp感染率无显著差异（P＞0.05）。

表1 消化科人员抗HpIgG的水平

2.3 医生与护士抗体水平比较

消化科医生49人，年龄40.4岁±13.4岁，OD0.75±0.28；护士组53人，年龄33.5岁±9.7岁，OD0.67±0.28(P＞0.05)。

表2 消化科工作年限与抗HpIgG水平

2.4 参加胃镜检查与抗体水平的关系

参与内镜检查工作的消化科人员49人,年龄43.3岁±12.3岁，OD0.73±0.28；未参与内镜室工作的消化科人员53人，年龄30.8岁±8.2岁，OD0.69±0.30(P＜0.25)。

3 讨论

Rawles 等发现，内镜操作人员抗HpIgG阳性率为32%，与接受上消化道内镜检查的患者相仿（46%），比献血员人群（10%）高出3～4倍，Mitchell等一项调查显示，消化科医生中Hp感染（51%）显著高于消化科护士（19%）、普通临床医生（28%）和献血员（21.5%）（P<0.01），后3组之间无显著差异。据认为，消化科医生与护士之间差异的产生，可能是由于前者接触病人时使用手套仅占9%，而后者多达72%。但是，亦有报道发现，内镜操作人员与对照组在感染率上无显著差异。本研究中，消化科人员与非消化科人员抗HpIgG水平的比较结果提示，消化科人员获得Hp感染的危险较多，其中无症状带菌者的比率明显高于医院内其他人群。按本文的分组标准进行分析，消化科工作时间长短与内镜操作年代多少对于这个人群的抗HpIgG水平无显著影响。此项结论与Mitchell等按短于6a和6a以上分组的结果基本一致。提示一个消化科医务工作者，在其最初工作的5a之内，感染Hp的危险度即达到饱和值水平。尽管消化科工作10a以上的人群较之工作5a以下的人群差异显著，但是不能忽视正常人群中该抗体滴度随年龄增长而升高的的规律，这是年龄构成不同的两个人群。与Mitchell等所见不一致的是，在本研究的结果中，消化科医生与护士、内镜操作人员与消化科普通人员感染Hp的机会等同。作者认为，这可能与被调查的对象工作习惯的不同有关。南京地区的消化科医生和护士在与病人一般接触中不戴手套（特殊操作除外），而在内镜操作时通常都戴手套；内镜操作人员往往为消化科的医生或护士兼职。因此，这一对表现上相互矛盾的现象，其实包含了内在的统一，它们分别从正反两个方面说明，临床工作中使用手套可能会降低感染Hp的危险。

上述研究结果表明，消化科医护人员属于Hp感染的高危人群，相应的职业防护意识和防护措施有待加强；Hp感染的传播方式尚未完全阐明，加强这一方面的基础研究，对于防止医患接触过程中的Hp感染传播将具有指导意义。

河北省井陉县山区居民胃病患者幽门螺杆菌的感染

自从1983年Warren和Marshall在慢性胃炎的粘膜中成功的分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp)以来，引起国内外许多学者的重视。在我国慢性胃炎、胃癌的发病率均很高，而胃癌的发病率、死亡率在我国各种恶性肿瘤中居首位。井陉县位于河北省西部，太行山中段的东麓，是全省胃癌高发区之一。胃癌年死亡率男性10.19/10万，女性26.18/10万。因此我们对具有上消化道症状的胃癌患者进行了胃镜检查及病理组织学观察，探讨慢性胃炎，胃癌与Hp感染之间的关系。

1 对象和方法

1.1 对象

本组1779例患例患者均来自井陉境内居住的居民，男1281例，女498例，男女之比2.6:1。年龄12岁～86岁，平均49岁。

1.2 方法

①胃镜检查：对具有上消化道症状的胃病患者，均经纤维胃镜（日本Olympus，P3型）检查，常规胃窦部粘膜咬检1-2块。如胃窦部发生肿瘤或溃疡，除咬检病变组织外，还在距病变组织1～2cm处胃窦粘膜内咬检。残胃在吻合口胃侧粘膜内咬检，立即放入10%福尔马林，送病理。②病理检查：立即咬检标本按常规步骤制成病理切片，切片厚6μm,Warren-Starry，简称W-S银染。光镜高倍视野下观察。Hp呈深褐色或黑色，外型呈：“S”形或杆状，长3μm，0.5μm。多分布在胃粘膜以外的粘液杯，胃小凹内浅表的腺腔内，偶尔在肠上皮化生（肠化）的杯状细胞浆内。Hp排列呈鱼贯状或成堆聚集或零星散在。胃小凹以上胃粘膜被Hp破坏而脱落，胃小凹变浅或消失。Hp分类，+：一个高倍视野内找到典型的Hp1～5个；++：5～50个；+++50～500个；++++：＞500个。

2 结果

浅表性胃炎Hp阳性63.2%，萎缩性胃炎45.6%，胃溃疡74.1%，球溃疡69.2%，残胃炎63.6%，胃癌66.2%。Hp检出率是随年龄增长而增高,31岁～40岁组为最高,70岁之后开始下降.男女之间无差异.活动性浅表性胃炎Hp检出率67%,非活动性占35.7%(P＜0.01)伴肠化，增生时Hp 检出率分别为65%和68.8%。活动性萎缩性胃炎Hp检出率占64.1%，非活动性占35.7%（P＜ 0.01），伴肠化，增生时Hp检出率分别为51.6%和44.4%。癌周组织内Hp的含量：0：占33.8%，+：28.9 %；++：21.8%；+++：15.5%。肠型胃癌Hp检出率为 66.0%（124/188），胃型胃癌为34.0%（64/188）。胃癌组织学分类：腺癌Hp检出率为 62.2%，印戒细细胞癌为76.2%，未分化癌为 90.0%。男性贲门癌Hp检出率为65.3%，胃体癌为64.0%，胃窦癌为66.7%，女性则分别为94.7%和66.7%、35.3%。

3 讨论

Hp检出最高年龄组为31岁～40岁，与国内报告30岁～50岁年龄组基本相符。浅表性胃炎、萎缩性胃炎活动期Hp检出率明显高于活动期、说明Hp感染是慢性胃炎的一个重要因素。本组胃癌患者Hp检出率为66.2%,分别高于国内报道的25.0%，37.5%，60.0%。癌组织中找不到Hp，而在癌组织周围组织内找到，这说明癌组织不适宜于Hp的生存。故可认为伴Hp感染的胃癌患者胃粘膜是一个癌前期病变，或是一种伴随病变。并且可推断浅表性胃炎伴肠化、增生时Hp检出率增高不如萎缩性胃炎伴肠化、增生时Hp检出率低更有临床意义。所以，对后者应定期复查。Hp检出率肠型胃癌显著高于胃型胃癌，这符合胃癌高发区以肠型胃癌多见显著高于未分化癌，机理有待研究。

贲门癌Hp检出率，女性显著高于男性；胃窦癌Hp检出率，男性显著高于女性；胃体癌Hp检出率男女之间无差异。这是否与胃内性激素分布有关，有待今后研究。

内蒙古哲盟地区幽门螺杆菌的血清流行病学调查

大量研究资料表明，幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）是慢性活动性胃炎的重要致病因素之一，在胃、十二指肠溃疡的发病中起着重要作用。目前，有关Hp感染的流行病学资料较少，为探讨Hp感染情况，我们应用ELISA法对哲盟307例自然人群和228例因胃肠道症状行胃镜检查的病人，进行了血清Hp抗体的流行病学调查。同时与尿素酶试验和镜检进行比较。

1 对象和方法

1.1 对象

病人选自1990—06～1991—05因消化道症状而行胃镜检查者。“正常人”选自开鲁县吉日嘎郎吐自然人群血清。血清标本贮存于20°C冰箱待温测抗Hp抗体。

1.2 方法

①ELISA试验检测抗Hp抗体：按常规ELISA法。Hp全菌抗原由中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所提供。采用波长490nm的酶联免疫检测仪（南京国营华东电子管厂生产）的空白对照孔校正OD值为零，然后测定阳性、阴性对照、样品孔OD值。样品的OD值（滴度≥300）/阴性对照均值（S/N）≥2.1倍者为阳性，反之阴性。②组织学检查：胃粘膜组织直接尿素酶试验和涂片镜检，见参考文献，两项试验有一项阳性者即为Hp感染阳性者。

统计学方法 统计学方法采用X²检验，X²M—N趋势性检验

2 结果

在307例自然人中（表1），抗HpIgG阳性率为14.7%,其中男性为15.7%，女性为13.8%，性别间无差异无统计学意义（X²=0.02,P>0.05）。本调查中有胃病症状而做胃镜者228例，抗HpIgG阳性率为61.4%，其中男性63.4%，女性58.1%，性别间差异无统计学意义（X²=1.74，P>0.05）。见表1。患者人群抗Hp抗体与自然人比较，两者间有明显的统计学意义（X²=126.38,P<0.01）。在自然人群中，年龄为2岁～76岁，平均37.5，各年龄组的抗HPIgG阳性率有随年龄增加而升高的趋势（X²M—H=26.04,P<0.01）。在患者人群中，年龄为17岁～72岁，平均42.5岁，各年龄组间抗HpIgG阳性率随年龄增加而升高，但无统计学意义（X²M—H=1.70,P>0.05，表2）。

表1 哲盟地区不同人群血清抗HpIgG的分布

表2 哲盟地区不同人群血清抗HpIgG的分布

患者人群抗HpIgGGMT为1:430.9（95%C1为384.9～482.1）明显高于自然人群的抗HpIgG的GMT（1:155.4，其95%C1为114.7～210.7，表3）。对228例胃病患者进行抗HpIgG检测的同时，进行胃粘膜组织标本尿素酶试验和涂片镜检（表4）。若以尿素酶试验和涂片镜检结果为诊断标准，消化性溃疡的血清抗HpIgG检出率较高，为70.4%～85.4%，各组间血清抗HpIgG差异有明显的统计学意义（X²=25.04,P<0.01,表5）。则ELISA方法的灵敏性为88.5%，特异性为88.8%，阳性预测值93.6%，诊断指数为77.3%，调整一致性是87.9%，两种方法符合率为94.6%。

表3 哲盟地区不同人群抗HpIgG滴度分布

表4 ELISA,尿素酶试验及镜检结果比较

表5 哲盟地区不同疾病血清抗HpIgG分布

X²=25.04 P<0.01。

3 讨论

许多学者认为Hp感染的患者体内存在高滴度的抗体。我们应用ELISA方法对胃病患者和自然人数进行了血清抗HpIgG的检测。结果显示本地区自然人群抗HpIgG阳性率为14.7%，其GMT为1:155.4(95%可信区间为114.7～210.7)，明显低于国内文献报道。胃病患者的血清抗Hp—IgG阳性率为61.4%，其GMT为1:430.9，（95%可信区间为384.9～482.1）明显高于自然人群，与文献报道相似。

在美国、澳大利亚等国家，20岁以前Hp感染率很低，以后随年龄增长逐步上升项，但平均感染率仅为30%左右。而国内一项调查显示，7岁～9岁组Hp感染率城市和农村分别为56.4%和27.4%。本文调查结果表明，2岁～9岁组清抗HpIgG阳性率为5%，明显低于上述国内外文献报道。同时显示本地区Hp感染的年龄较早。

本研究对228例胃病患者进行抗HpIgG检测的同时，与尿素酶试验和镜检进行比较。结果表明，用ELISA方法检测胃病患者血抗HpIgG阳性率的敏感性为88.5%，特异性为88.8%，阳性预测值为93.6%；同时证实血清抗Hp水平与Hp感染之间存在着明显的相关性，支持胃病患者Hp感染随年龄增长而升高的论述。说明ELISA方法为非创伤性检查具有敏感性高，特异性强的特点，可用于Hp感染的初步诊断和血清流行病学调查。

临夏回汉儿童胃炎及癌前病变102例幽门螺杆菌相关性调查

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与慢性胃炎及癌前病变的相关性在成年人中报道较多，而在儿童中报道甚少。我院自1992—10～1993—01对甘肃临夏市回族地区3所农村小学学龄儿童进行上消化道疾病普查，对有上消化道症状者行纤维胃镜检查、胃粘膜活检及Hp检测，旨在研究回汉儿童胃炎及癌前病变与Hp感染的流行病学相关性。

1 对象和方法

1.1 对象

在甘肃省临夏回族自治州夏市枪罕乡穆家村、后杨村和街子村3所小学，对在校6至12岁儿童594名进行体检，检查结果登记入册，发现有上消化道症状或家庭成员有胃癌及胃溃疡病史者拟行胃镜检查。符合者132例，行胃镜检查102例。男55例，女47例，回族37例，汉族65例。

1.2 方法

用日本Olympyus GIF-P3型纤维胃镜进行检查，在每例受检查者胃窦和胃体部各取一块活组织送检，在窦部大弯侧距幽门2cm左右取1块活组织检测Hp用兰州军区军医学校研制Hp快速诊断盒进行检测，将所取胃粘膜活组织置入诊断盒中央，若2h内组织周围试剂变红者为阳性，不变色者为阴性。统计学方式采用X²检验。

2 结果

2.1

胃镜检查与Hp检测 浅表性胃炎52例，Hp阳性者27例，阳性率52.92%（27/52）；胆汁返流性胃炎14例，Hp阳性者6例，阳性率42.86%（6/14）；食管炎6例，十二指肠炎3例，食管裂孔疝5例，胃息肉2例，Hp阳性率均为0%；无异常32例，Hp阳性率21.88%（7/32）。

2.2 病检及Hp检测

肠上皮化生3例，Hp阳性1例；炎性息肉2例，Hp阳性0；无异常24例，Hp阳性1例；胃粘膜组织炎性症、炎症活动状态与Hp感染相关。Hp感染分析，浅表性胃炎活动期与静止期之间P<0.01；萎缩性胃炎活动期与静止期之间P>0.05；两种胃炎总的活动期与静止期之间P<0.01（表1）。

表1 胃粘膜炎症、炎症活动状态与Hp感染

2.3 回汉儿童胃粘膜病检及Hp检测结果

病检为炎性改变者回汉民族比较P<0.05；Hp阳性者回汉民族比较P>0.05（表2）。

表2 回汉儿童胃粘膜病检及Hp检测结果之民族关系

3 讨论

本组胃粘膜炎性改变78例中Hp阳性率50.0%（39/78）；胃粘膜无异常者Hp阳性率为4.17%（1/24）；说明该地区学龄儿童胃炎与Hp感染有密切相关性。Hp与各种慢性胃炎的关系，国内已有较多报道。Hp根治后十二指肠溃疡病复发率23%，而Hp残留者复发率高达73%。据报道小儿慢性胃炎发病与Hp感染密切相关，王伟民在64例患儿中胃粘膜Hp检测率39.1%，而且中重度胃炎中Hp检出明显增多。从表1中可发现浅表性和萎缩性胃炎的炎症活动期Hp阳性检出率均显著高于静止期，P<0.01，说明Hp不仅与胃炎有一定相关性，而且与炎症活动状态存在着更显著的相关性，尤其应该指出Hp很可能是胃粘膜持续性活动性受损害的一个重要活动因素。

本组检出萎缩性胃炎14例，占受检人数的18.0%（14/102），明显高于有关文献报道，Hp阳性率71.4%（10/14）；肠上皮化生3例，占2.94%，炎性息肉2例，占1.96%，这些均属于癌前期病变。据报道，近期发现Hp是胃癌发生的重要始发因素，众多流行病学资料也支持Hp与胃癌密切相关。Hp高流行的国家和地区，胃癌的发病率也很高，西方一些国家Hp感染呈低流行，胃癌发病率低且呈下降趋势。儿童Hp感染与民族之关系不密切。本文儿童均属世居当地农村，仅民族血统不同。Hp感染与民族因素无显著相关性。可能与经济文化及卫生惯有一定关系。

有关文献报道，在胆汁返流或伴有胆汁返流时Hp检出是低的，认为一定浓度胆汁对Hp有直接抑制或杀灭作用。而本文发现胆汁返流性胃炎Hp检出率为42.8%。与有关报道不相符，检出率偏高，其原因有待进一步研究。

武汉地区幽门螺杆菌感染的血清学调查

幽门螺杆菌（HelicobaterPylori, Hp）感染遍及全世界，然而不同国家或地区人群中Hp检出率有很大区别。在我国各地区人群中Hp感染情况目前尚不明确。作者对武汉地区部分人群中Hp感染和血清学进行了调查，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象

1993—07～1995—06用前瞻性随机法抽取来我院就诊且既往未使用过抗Hp治疗的患者947例，健康体检者483例，共1430例。均为武汉地区居民。其中男759例，女671例。年龄6个月龄～71岁。其中＜10岁134例，10岁～19岁156例，20岁～29岁230例，30岁～39岁260例，40岁～49岁245例，50岁～59岁198例，60岁以上207例。工人562例，学生256例，知识分子325例，干部219例，其它68例。部分对象还调查了血型、烟酒嗜好以及有无上消化道症状等。

1.2 方法

每例收集空腹血清1ml，用ELISA方法检测Hp抗体，所用试剂盒由上海惠泰医疗科技服务部提供，其敏感性为94%，特异性为87%，阳性预测值为96%。操作严格按说明书进行。结果以OD值＞1.70为阳性，≤1.70为阴性。每次测定均做阳性对照，阴性对照以及空白对照。统计学结果系用X²检验。

2 结果

在1430例中，Hp抗体阳性719例，总体感染率为50.3%。男性感染率为49.9%（379/759），女性则为50.7%(340/671)。两者比较，差别无显著性（P＞0.05）。各年龄组男女间比较,差别亦无显著性(P＞0.05)。Hp感染随着年龄增加而增加，各年龄组感染率分别为：＜10岁27.6%，10岁～19岁36.5%，20岁～29岁43.0%，30岁～39岁48.8%，40岁～49岁54.7%，50岁～59岁62.1%，60岁以上68.6%。各年龄组感染率相比较，差异均有显著性（P＜0.05）。

各职业中Hp感染率为：工人52.8%，学生48.0%，知识分子48.9%，干部 49.3%，其他47.1%。各组间比较差异无显著性（P＞0.05）。在部分患者中调查了有无上消化道症状，半年内有上腹疼痛、饱胀、嗳气、返酸、烧心之一者属有组，否则为无组。有组与无组Hp感染率分别为68.3%和50.6%。此外，体检健康的人群中Hp感染率则为43.5%。有组与无组及健康人群组比较，差异有显著性（P＜0.05），而无组与健康人群组比较，差异无显著性（P＞0.05）。

3 讨论

武汉地区部分人群中Hp总体感染率为50.3%，在健康人群中为43.5%。提示Hp感染在该地区较为常见，且有相当一部分无症状健康人在Hp感染。本文发现Hp感染率与性别、血型无显著相关，而随着年龄增加而增加。提示Hp感染可能为后天获得性，但其感染途径至今尚未明确。尽管Hp感染率随着年龄增加而增加，但在我国青少年中Hp感染亦不可忽视。据北京协和医院应用¹³C尿素呼吸试验法调查，北京和广州两个地区6岁～12岁少儿的Hp感染率分别为48%和42%。本文应用ELISA方法调查武汉地区＜10岁和10岁～19岁青少年的Hp感染率分别为27.6%和36.5%，虽较上述两地区略低，但仍提示本地区约1/3的青少年存在Hp感染，故应引起足够重视。

许多研究表明，Hp感染与上消化道症状有关。本文发现：Hp感染率在有上消化道症状组显著高于无上消化道症状组。故亦证实Hp与上消化道症状密切相关，根除Hp治疗可能有助于此类患者症状的改善。有报道显示，Hp感染与种族、经济状况、住房条件、教育程度及水源有关，深入研究各地区不同人群中Hp感染的流行因素，将有助于加强对Hp感染的防治，从而提高人们的健康水平。

新疆幽门螺杆菌感染特点

幽门螺杆菌在胃、十二指肠疾病中的作用日益引起人们的重视。不少研究显示，幽门螺杆菌与慢性胃炎、胃十二指肠溃疡的发病及复发有关。本文分析了不同性别、年龄、汉族与少数民族胃十二指肠疾病中幽门螺杆菌的感染率及颁布特点，报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象

1994—02~12有纳差、上腹痛不适等消化道症状，并在我院门诊和住院接受纤维胃镜检查者共712例。其中男452例，女277例。男女之比为1.57:1。年龄14岁～88岁。汉族638例，少数民族74例。两者之比8.62:1。60岁以上老年人96例，其余616例。老年与非老年比例1:6.41。

1.2 方法

全部病例均用GIFQ20型光学纤维胃镜，由同一人操作检查。分别于胃窦、胃体及病变部位各取组织做组织学和幽门螺杆菌的光学显微镜检查。Hp用吉木萨染色。按镜下Hp有无及多少划分：未见Hp一；偶见1~2只形态不能肯定为Hp者，+；少量高倍镜视野中偶见Hp；++等介于+和+++之间，++++见到大量或Hp成团者。

2 结果

本组712例胃镜病理结果显示：Hp阳性379例，感染率为53.2%。其中：男254例占67%，女215例，占33%（表2）。汉族333例，占87.9%，少数民族46例，占12.1%（表3）。老年人45例，占11.9%，非老年334例，占88.1%（表1），慢性胃炎533例。

表1 老年Hp感染与上消化道疾病

表2 性别Hp感染与上消化道疾病

表3 汉族与少数民族Hp感染与上消化道疾病

表4 Hp感染程度与性别、民族及年龄

Hp阳性267例，占49.7%(267/533)，慢性浅表性胃炎为386例，占54.2%(386/712)；Hp阳性189例，感染率56.3%(189/386),慢性萎缩性胃炎67例,占9.6%(167/712)；Hp阳性33例，占49.3%（33/67），慢性浅表性胃炎伴萎缩肠化80例，占11.2%（80/712）；Hp阳性45例，占56.3%，胃溃疡31例，占4.4%(31/712）；Hp阳性21例，感染率67.8%，十二指肠溃疡68例，占9.6%（68/712）；Hp阳性59例，感染率86.8%；复合性溃疡4例，占0.56%（4/712）；Hp阳性4例，占100%；食管癌26例，占3.7%；Hp阳性13例，占50%；胃癌49例，占6.9%（49/712）；Hp阳性16例，感染率32.7%。有关男女两性、老年与非老年、汉族与少数民族Hp感染率、感染度及其在慢性胃炎、溃疡、食管癌、胃癌发病情况详见表1~表4。

3 讨论

分析上述结果发现：712例，中慢性胃炎发病比例最高达75%（533/712），其中又以慢性浅表性胃炎72.4%（386/533），慢性萎缩性与慢性浅表伴萎缩肠化占27.6%，其次为胃十二指肠溃疡14.56%（103/712），食管癌与胃癌10.5%。Hp感染率以复合性溃疡100%最高，依次为十二指肠溃疡86.8%，胃溃疡67.8%，慢性浅表性胃炎伴萎缩肠化56.3%，食管癌50%，慢性萎缩性胃炎49.3%，慢性浅表性胃炎49%，胃癌32.7% 最低。Hp感染率在慢性浅表性胃炎与慢性萎缩性胃炎中差异不显著，与胃炎类型无关；慢性浅表性胃炎伴萎缩肠化较慢性浅表性胃炎和萎缩性胃炎两组均高，有显著性差异。提示：Hp感染与胃炎肠化有关。在胃溃疡与十二指肠溃疡、食管癌与胃癌中Hp感染率也无统计学意义。溃疡组明显高于胃炎、食管癌、胃癌组，且以+++为多。Hp感染率及感染程度+~+++在老年与非老年组均无显著差异，本组老年的Hp阳性率46.7%与报道65.4%、随年龄增长而升高有差距。Hp感染存在着性别差异：Hp感染率男性明显高于女性（P＜0.05)；+~++级男女两组无显著性差异，+++组男性明显高于女性。可能与男性的胃十二指肠溃疡明显高于女性。而消化性溃疡Hp感染率又显著高于其它组有关。Hp在汉族与少数民族中的分布不均，表现为：①Hp感染率汉族明显高于少数民族，可能与汉族溃疡病比例明显高于少数民族、少数民族又以Hp感染率低的食管癌、胃癌偏多有一定关系。②在Hp感染程度上+汉族与少数民族无差异，++~+++汉族明显多于少数民族，差异有显著性。本组H感染率在胃溃疡67.8%、十二指肠溃疡86.8%与报道一致。提示消化性溃疡发病与Hp感染关系密切,与胃癌、食管癌发病关系尚不清楚。有待进一步探讨。我们认为Hp感染及分布具有以下特点：①胃十二指肠溃疡感染率最高与Hp关系最密切；②有性别差异，男性高于女性；③Hp在汉族与少数民族中分布不均、少数民族低于汉族；④老年与非老年无明显差异；⑤Hp感染与胃炎类型无关、与是否肠化有关。

新疆喀什地区上消化道疾病中幽门螺杆菌感染情况

我院地处新疆西部的少数民族地区，为了解在上消化道疾病中幽门螺杆菌的感染情况，我们从1993—05～1994—06对有上消化道疾病临床症状的402名患者，在进行纤维胃镜检查的同时，用无菌活检钳在胃窦小弯部钳取组织一块，用1min尿素酶试剂盒检测幽门螺杆菌感染的情况，现将检测结果报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

本组402被检对象中，以维吾尔族为主，为305例，占75.8%，其次为汉族92例，占22.9%，克尔克孜族4例，占0.9%，塔吉克族1例，占0.4%；其中男248例，女154例，男女之比为1.61:1。年龄为19岁～70岁，其中以21岁～55岁感染最多，为329例，占81.8%，且都伴有不同程度的上腹不适，疼痛，食欲减退，恶心呕吐等症状。

1.2 方法

402例患者，均为经胃镜检查诊断，而未经治疗者；胃镜检查过程中，除诊断之需要作活检处，另取窦小弯距幽门5cm范围内取组织一块，作幽门螺杆菌检测，每次取材时均换用经75%酒精浸泡消毒过的活检钳，胃镜用2%洗必泰溶液消毒，按规定的胃镜诊断标准诊断。我们采用交通部南通医学院。香港招商局蛇口联合医院消化病中心研制，深圳爱利国医学科技开发有限公司生产的“一分钟尿素试剂盒”检测幽门螺杆菌的感染情况，将活检取得的小块组织，用无菌牙签挑取置于使用前置备好的离心溶液管内，观察1min～5min内颜色变化。如全溶液均为红色，则为“+++”，如溶液一半为红色则为“++”，如仅粘膜标本周围为红色则为“+”，如无鲜红色产生，试验为阴性。

2 结果

上消化道不同疾病Hp感染情况见表1。

表1 新疆喀什上消化道疾病Hp感染情况

Hp在上消化道疾病中均可检出,总检出率为80.1%,其中食管疾患检出率为4.0%，胃窦疾患检出率为71.8%，十二指肠疾患检出率为25.6%，结果提示：上消化道各部位的病变均可检出有Hp的感染，检出率与国内外所见报道相近，在胃溃疡，十二指肠球部溃疡，慢性浅表性胃炎的检出率分别高达90.0%、83.2%、81.3%；慢性萎缩性胃炎和糜烂性胃炎检出率分别为71.1%和72.7%，资料说明，该菌的存在与胃粘膜炎症有密切的关系，溃疡很可能是Hp炎症发展而来，炎症和溃疡像同一疾病的不同阶段表现，支持Hp感染是消化性溃疡病因之一的观点。其中有部分病人经过治疗后，溃疡趋于愈合时，Hp感染亦已消除，亦有的病人，Hp已被消除，但粘膜的炎症尚未治疗，说明临床上抗菌治疗对Hp感染是有效的，能在短时间内消除Hp的感染，而溃疡的修复需要一定的时间；又支持对难治性溃疡宜加用抗菌治疗的观点，同时也设想是否可将加用抗菌治疗，控制Hp的再感染，作为预防溃疡复发的措施之一，作进一步的临床观察。

兰州地区幽门螺杆菌感染流行病学调查

幽门螺杆菌（Hp）与慢性活动性胃炎和消化性溃疡密切相关，很可能是其主要致病因素，其与胃癌的关系已引起国内外学者的极大关注。但该菌感激的流行病学资料相当缺乏，本项研究旨在对胃癌高发区——兰州的Hp感染现状进行前谵性研究。

1 对象方法

1.1 对象

用随机法对兰州市市区按人口构成和街区分布，从不同街区的工厂、机关、学校和幼儿园中抽选，郊县农村三个区县为1岁～4岁，5岁～9岁，10岁以上，每10岁划分一个年龄段共7组。

1.2 方法

对每个被调查对象先进行问卷调查，内容有，个人资料、包括姓名、年龄、性别、婚姻、出生地、职业等；文化社会因素包括受教育程度，经济收入，居住环境，家庭卫生等；健康状况包括现病史，过去病史，家庭成员慢性病史等项目；生活饮食习惯包括烟酒嗜好，饮用水源，喜食冷热，常食蔬菜水果品种等48个量变。然后采集静脉血，分离血清后分别检测HBsAg，ALT及Hp抗体水平。血清Hp抗体测定由澳大利亚新南威尔士大学微生物学院协助进行，采用两株Hp全菌进行超声粉碎后提取抗原，用ELISA法测定Hp抗体水平，对接近Hp阳性临界限值的血清标本加做空肠弯曲菌吸附试验，以排除空肠弯曲菌的交叉阳性干扰，提高本法的准确性。本项研究采用的Hp抗体检测方法曾在广州地区与胃镜活检组织学Hp检查和细菌培养两项标准对照，结果证明其敏感性达100%，特异性为91%，完全符合普查要求。

统计学处理Hp感染率用百分数表示，各年龄组感染率为不同街区抽样值，并用人口年龄构成比例调整。用X2检验进行分析，P＜0.05定为差异有显著性。

2 结果

兰州市人群Hp感染平均为63.1%，各年龄组Hp感染率随年龄增长有逐渐升高趋势，男女两性Hp感染率在各种年龄组差异均不显著。值得注意的是10岁以下儿童Hp感染率相当高，市区和郊县分别为54%～55%，10岁以下儿童Hp感染率平均每年以4%～5%速度递增，故称此期为“剧增期。”10岁～40岁每年以1%速度递增称为“缓增期”。40岁以上基本保持稳定，不再继续上升称为“平坦期”（表1）

表1 市区郊区Hp感染情况

兰州市区饮用水源均为同一水厂自来水，市郊农村居民饮用水源有河水、泉水及窖水（雨水），从各地区采集的水样中未培养出Hp，市区与郊区Hp感染率无明显地区性差异。看不出Hp感染与水源的明显关系。

根据调查问卷分析，Hp感染和生活饮食习惯、烟酒嗜好、文化教育水平，饲养动物与否及疾病史等因素未发现固定关系，但与居住环境的人口密度成正比。血清Hp抗体水平在HBsAg阳性患者和阴性人群中无显著差异，在ALT正常和升高人群中差异也不显著（P＞0.05）不支持Hp感染和乙型肝炎流行之间的关系。

3 讨论

本文材料显示兰州地区人群中血清Hp抗体阳性率平均为63.1%，10岁以下儿童感染率相当高，以后随年龄增长Hp感染率有逐渐升高趋势，其上升曲线似可分为3期，①“剧增期”，见于10岁以下儿童。②“缓增期”见于10岁～40岁。③“平坦期”，见于40岁以上，此期Hp感染率基本保持稳定，不再继续上升。大量研究资料表明，Hp感染与慢性活动性胃炎及消化性溃疡密切相关，由于Hp的菌体结构及居住在胃粘膜的粘液层下，受到碱性粘液的保护，同时它可以释放尿素酶，迅速分解尿素，产生大量氨以中和胃酸，从而保护其在一个适宜的pH环境中生长。故有人认为一旦感染Hp，很难自然清除，甚至终身受累。所以认为确定Hp初染年龄十分重要，儿童期一旦感染Hp，首先表现的是慢性活动性胃炎，随着年龄增长和时间推移，加上其它因素，有一部分人可能逐渐发展为胃溃疡，慢性萎缩性胃炎—肠上皮化生—腺上皮不典型增生，最终可能发展成为胃癌。兰州为胃癌高发区，Hp感染率及儿童期感染率均显著高于国内广州、广西、上海及一些胃癌低发的西方国家，显示Hp感染与胃癌发生率的相关性，值得引起重视。

兰州市区居民饮用水均为同一自来水源，郊区农村饮用水源有河水、泉水及窖水，但他们的Hp感染无显著差异，为寻找传染源我们对不同水源的饮用水分别取样进行细菌学培养均未分离出Hp，故Hp感染似与水源污染无关。本组资料亦不支持Hp通过动物传播的假设，兰州市郊区农村多数家庭养猪、鸡、狗、猫等，与动物接触机会较多，城市居民家庭很少有饲养动物者，但他们之间Hp感染率无显著差异。另外我们曾对狗、猪、大白鼠、小白鼠等动物的胃粘膜进行Hp检查，无论细菌培养，组织学检查及尿素酶试验均未能检出Hp，故不支持Hp由动物传播学说，有人提出Hp流行模式和脊髓灰白质炎及甲型肝炎这两种已知的粪—口传播，但至今虽经反复努力，未能从粪便中分离出Hp。我们曾对内镜胃粘膜标本Hp阳性者10例反复做粪便细菌培养，结果均因杂菌生长太多，未能分离出Hp。似不支持粪—口传播学说，但不能排除培养方法上存在的问题。我们在调查中发现Hp可能通过密切接触传播，过集体生活的幼儿园的儿童及小学生感染率高于散居儿童，家庭生活条件及卫生条件差的Hp感染率高于生活、卫生条件好的家庭。本研究Hp血清学检测由澳大利亚新南威尔士大学微生物学院Mitchell,Hazell和Lee协助，谨致谢。

黑龙江垦区1776例自然人群幽门螺杆菌感染情况调查

大量研究资料证明，幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori, Hp）是人类慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌，且与胃癌的发生也有着非常密切的关系。但是以往多数资料均来自临床上对有消化道症状而到医院就诊的患者进行检查和分析的，而对自然人群中Hp感染情况了解并不多。内镜检查时由于痛苦较大，不易被检查者接受，更不适合进行较大规模流调，而幽门螺杆菌的尿素酶（HpU）抗原可刺激机体产生高滴度的循环抗体，只要胃内有Hp存在，通过血清ELISA检测就能确切（较特异地）反映人体内目前有无Hp感染。作者旨在用血清学检测方法对黑龙江东西部垦区自然人群进行抽样调查，以研究黑龙江垦区Hp感染情况，进一步分析探讨或揭示Hp感染在黑龙江垦区的流行病学特征，为今后垦区慢性胃十二指肠疾病防治工作提供较为完整，可靠的第一手资料。

1 对象和方法

1.1 对象

1995年4月～1996年4月，分别在黑龙江东部垦区如：佳木斯、密山（裴德医院）虎林（850农场）及西部垦区的德都县境内龙门农村和引龙河农场，随机抽样共2003人，除去记录资料统计不全者，余计1776人，其中男864人，占48.6%，女912人，占51.4%。东部地区1046人，西部地区730人。年龄1岁～93岁，平均26.9岁，已明确诊断或有上腹部症状者310人，无症状者1466人。

1.2 方法

首先对每个抽样对象逐个填写问卷调查表，详细记录性别、年龄、职业、血型、有无胃十二指肠病史、发病时间及确诊手段，有无消化道症状，有无肝炎史、嗜好及生活习惯、家庭经济状况等。随后抽取被调查者的静脉血2ml，分离血清后置20°C冰箱中冷冻，待测血清抗HpU抗体。采用中国预防医学科学院流行病学微生物研究所提供的高度纯化幽门螺杆菌尿素酶（HpU）抗原，用ELISA法检测血清中相应的IgG抗体。为消除系统误差，所有血清均由专人负责测定，通过稀释、反复洗涤、加酶、显色等程序后，一律采用同一酶标光度仪（南京产3022型），以450mm波长测定各孔OD450值，样本平均OD450值大于或等于标准血清平均OD450值者为阳性，否则为阴性。同一样本相同稀释度的两孔的OD450波动超过平均值的1.5倍时，该样本重新做。

2 结果

从调查（表1）中可以看出，黑龙江垦区自然人群中Hp总感染率为35.7%，明显低于全国各地平均感染水平（50%）。男性人群中Hp感染率为33.21%，女性为38.16%，女性感染率高于男性。男女性别间Hp感染有显著性差异（0.01

表1 黑龙江垦区自然人群Hp感染率及其年龄、性别差异

表2 黑龙江垦区东西部两地区自然人群Hp感染情况比较

bP<0.01,vs东部地区。

黑龙江垦区东部地区调查总人数为1046人，其中HpU抗体阳性人数311人，Hp感染率29.7%，西部地区调查730人，其中HpU抗体阳性人数为324人，感染率为44.4%（表2）。

无论垦区东部地区还是西部地区，有症状者的HpU抗体阳性率（55.5%）明显高于无症状者Hp抗体阳性率（31.6%）,P<0.01，二者之间具有极显著差异，说明症状与Hp感染关系非常密切。东西两地区相比，西部地区自然人群中Hp感染率更加明显高于东部地区（表4）。为探讨Hp感染者与各血型间的关系，作者对被调查人群中的681人检验了血型，从中可看出各血型人群Hp感染率45.5%～50.0%，无明显差异，（X2=1.51,P>0.05），说明Hp感染与各血型间无内在联系（表5）。本次流调对象小儿数所占比例较大，约1/4（477/1776），且原始登记统计工作较细，现将15岁以下儿童Hp感染情况逐龄制表，试图分析，比较各年龄间的关系。从表6可见11，12，13岁儿童Hp阳性率最高，1岁组最低，总体趋势为随年龄增加而增加，与文献报道基本一致。Hp感染与各职业间有一定联系，其中饮食服务业最高(50.4%)，其次为无职业家属(48.8%)及教师、保育员（45.5%）、畜牧（42.2%）机务（38.3%）。学生感染率最低（25.5%）。经统计学处理，各职业间Hp感染具极显著差异（X2=20.090,P<0.01），此点似与有些文献报道不符。

已有很多资料证明，Hp感染在家庭内有聚集性。本调查中有目的选择52例已知有或无Hp感染者，作为标引者（不一定是患者），对其156个家庭成员进行血清抗—HpU阳性率为21.8%,Hp阳性标引者家庭26对夫妻中有24对（ 92.3%）具有抗体阳性，Hp阴性标引患者家庭26对夫妻中仅有2对（7.7%）为抗体阳性两组差异有显著性（P<0.01）。且夫妻及全家同是阴性者很多。父母抗体均为阳性者其子女Hp阳性率65.4%（17/26）均显著高于父母均为阴性的子女3.9（1/26）。父母一方为阳性其子女阳性机会比母亲一方阳性其子女机会少。

表3 黑龙江垦区自然人群Hp感染与症状的关系

表4 黑龙江垦区东西部两地区自然人群Hp感染与症状的关系

表 5 Hp阳性者与各血型关系

表6 477例15岁以下儿童&HpU检测结果

3 讨论

幽门螺杆菌是一个世界性问题，可见于各国家、各地区及各年龄组、各种职业、各阶层人群，是人上消化道疾患的重要原因之一。目前诊断Hp感染最可靠的确诊手段是通过胃粘膜活检组织，进行幽门螺杆菌培养。但被检查者必须接受胃镜检查，由于检查时有一定的痛苦，不易经常随访和复查，以及大规模流调。尤其是儿童更不易接受。而血清学检测方法则可克服上述缺点，非常适用于Hp流行病学调查，更适用于儿童。幽门螺杆菌尿素酶（HpU）抗原可刺激机体产生高滴度的循环抗体，其中IgG抗体滴度在未经系统HpU治疗的群中，能确切反映人体内目前有无HpU感染，抗—HpU抗体检测，敏感性为98%，特异性96%，该剂盒的重复性、平行性、稳定性均较好，因此用于流调，可以说是一种简便易行、比较可靠的方法。

黑龙江垦区自然人群整体HpU感染率低于国内平均感染水平。尤其是儿童低于上海大城市水平，这与垦区所处的地理环境、工作条件、社会经济情况、生活水平、卫生状况均有关系，尤其是与垦区初级卫生保健工作成绩突出，好于省内外一些地区及县市是分不开的。潘志军等人调查证明，我国农村人群的Hp感染率（61.6%）明显高于城市（40.5%）。垦区的整体发展水平和实际状况，应该是介于城市与农村之间，但Hp感染水平却明显低于城市。垦区女性Hp感染率高于男性，可能与女性多为从事饮食服务行业人员，与幽门螺杆菌感染者接触多，增加口—口传播机会。女性Hp感染者以40岁上下的人居多，如果Hp感染从儿童时期就已决定的话，是否可以解释为，这个年龄段的儿童时期正逢自然灾害年间，生活水准极低的情况下，易感染Hp。垦区东西两地区的Hp感染具有极显著差异与两地区的经济状况、生产能力、生活水平、卫生习惯等有关。垦区的西部地区两农场（龙门、引龙河）均为贫困场，人均生活水平和卫生条件肯定不如东部地区的850农场、密山等地。即使有的农场行将脱贫致富，但在贫困时期已经感染上了Hp，如不经正规抗Hp治疗，抗体滴度是不会下降和消失的。

表7 幽门螺杆菌感染与职业间的关系

Hp感染既可引发疾病,又可为无症状带菌者，本调查中无症状组Hp感染率为31.58%高于国内有些资料（20.1%）。赵立群等对无症状人群进行胃镜普查发现55%～66.63%的无症状健康人群中可检出慢性胃炎等病。本调查中有症状者Hp感染率明显高于无症状者，如能将有症状者再做进一步检查肯定会检出比无症状组更多的胃十二指肠病变。如果能及时用简单易行的血清学检测方法早期发现Hp感染者，一方面可对下一步是否需做胃镜检查进行初步筛选是极为有利的。另一方面就是对有症状Hp感染者，直接采取积极“干预”治疗，对预防和治疗胃十二指肠疾病将会具有非常重要的现实意义和深远意义。既然胃十二指肠疾病Hp感染率如此之高，Hp感染的有症状者的胃病发生率也不低（相辅相成），作者意见不妨将有症状Hp感染者视为发生胃十二指肠疾病或胃癌的高危人群，不一定必须再做进一步其它检查，直接采取主动“预防性”治疗并不是盲目之举。

最近研究资料证实，成人的Hp感染率及消化道疾病之所以较高是与小儿时期即已发生的Hp感染密切相关，在发展中国家更是如此。或者说世界各地Hp感染率高低差异的关键不是在成年，而是在儿童期。一旦感染Hp，体内Hp抗体滴度并不随年龄增加而升高。小儿Hp感染直接影响到成年期的身体状况。因此对小儿Hp感染的普查与防治更是十分必要的。垦区10岁以下儿童的Hp感染低于城市水平，这无疑与垦区重视卫生事业，重视妇幼保键工作，生活水平，健康水平较高有关。但不容忽视的是，儿童期内仍有一些年龄组Hp感染率超过30%，并有逐年增高的总趋势。看来人与人之间及家庭内的交叉传播是Hp感染逐年升高的重要原因。也就是说慢性胃十二指肠疾病（包括胃癌）的防治，从娃娃时期就应着手做起。对普查出的Hp感染儿童，如果有反复的腹痛及脐周痛者，应结合其它临床诊断方法明确诊断，或者直接采取抗Hp等综合防治措施，尽早控制及根除Hp感染，对预防Hp感染所致的小儿胃炎、消化性溃疡乃至对成人慢性胃病或胃癌的发生者都是有重要意义。

有关Hp的传染源及传播方式，目前并不十分清楚，但有很多资料提示的人与人或人与动物之间“口—口”或：“粪—口”传播的可能性最大。本调查中饮食服务行业人员中Hp感染率高达50.4%，分析与该行业从业人中多为饮食加工、食堂、饭店、小摊点、小吃部、经销食品等与饮食活动有关人员，接触与进食有关的人多，难免接触的人群中不乏有很多的“健康带菌者”因此感染机会多，至于教师、保育员、畜牧、机务工人也有较高的感染率，与工作环境、条件、作业时间、饮食无规律、身体素质、健康水平均有密切关系。

通过对52个标引者及52个家庭，156个家庭成员的调查结果进行分析看，Hp感染在家庭内确有明显的聚集性。与国内外报道一致。家庭中如有一人HpU抗体阳性，那么其它成员HpU抗体阳性的也多。反之则少。全家人阳性与全家人阴性的约占被调查家庭的1/3，甚至有一家老少4代10人均为阳性。说明家庭成员间密切的生活接触，增加了人—人传播的机会，共同暴露于同一个传染源，是Hp在家庭内聚集的基础。父亲Hp抗体阳性其子女阳性的机会不如母亲阳性其子女阳性的机会多，不难看出家庭成员接触最为密切的当属母子关系，甚至一些家庭中，很多大人有口嚼食物喂养小儿的习惯，必然增加Hp感染机会。

本文中全部统计资料由佳木斯医学院、副研究员马俊文老师协助处理

西藏高原自然人群幽门螺杆菌感染流行病学调查

人们已知幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染与慢性胃、十二指肠炎及溃疡、胃癌的发病有较密切的关系。目前国内外尚无高原人胃Hp感染流行病学调查及其相关性的研究报告。为此，我们对西藏日喀则市（海拔3900m）自然人群中376人进行了Hp感染的流行病学调查，现将报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

用随机抽样调查法,对进藏1年以上及世居西藏高原的日喀则高机关工作人员及其所属在校学生、教师和入院门诊就诊人员进行调查。

1.2 方法

采用辽宁省盘锦市医药工业研究所生产的“食管、胃细胞采集球”，按常规方法让受试者吞服，在胃内停留30min以上，并沿顺时针方向在胃区按摩，然后取出采集球，收取少量胃液进行胃液尿素氮（GUN）测定。并涂片2张做光镜检测Hp及胃液Hp试纸法检测Hp三项检查。胃液GUN测定采用成都执诚生物技术研究所生产的BUN测定试剂盒（出厂号950911），通过脲酶—波氏比色法在BECKMAN—42型生化分析仪上进行检测。根据Hp感染产生大量尿素酶、分解尿素的原理，测定胃液中GUN量，以判断是否有Hp感染。此项技术已在我国开展。胃液涂片后经1%中性染色，采用奥林巴斯—CH型光镜在油镜×100倍下进行观测。由具有观察Hp5年工作经验的专职病检主治医师承检。Hp试纸法采用珠海珠信生物工程制品有限公司出口的“1分钟快速型Hp诊断试纸”取少量液进行检测。

结果判定： ①胃液GUN值≤1.6mmol/L定Hp阳性；≥1.82mmol/L定Hp阴性；介于二者之间者定Hp为（±）。②涂片中找到一条以上Hp者为阳性。③Hp试纸法1min后试纸由黄色变为红色者为Hp阳性，不变色者为阴性。④上述三项检查中有一项明确为阳性者则判定为胃Hp感染阳性。

2 结果

受检人员376人中，藏族265人，汉族111人。其中Hp阳检人员共248人，占总人数的66%。藏族Hp阳检人员177人，占藏族总人数的66.8%。汉族Hp阳检人员71人，占汉族总人数的64%。受检人员中男性217人，Hp阳检人员150人，占男性总人数的69.1%。女性159人，Hp阳检人员98人，占女性总人数的61.6%。受检人员年龄最小者17岁，最大者63岁。其中青少年组（＜25岁）者204人，Hp阳性者132人，占64.7%。成年组（＞25岁）者172人，Hp阳性者116人占67.4%。

3 讨论

1994年第十届世界胃肠病学术大会认为，Hp感染与DU，GU的发生密切相关，与胃癌、淋巴瘤的发生也有高度可能。研究Hp感染与人类胃病的相关性有重要意义。目前国内外已有该方面的报告约200余篇，但经国内光盘及手工检索，尚无高原自然人群Hp感染的流行病学调查及其相关性的研究报告。因此，本项研究具有特殊意义。

据文献报道，Hp感染在世界各地都较为常见。不同地区，不同种族感染率有明显差异，经济不发达国家为多见。在同一社区不同人群的Hp感染率与经济收入、住房条件、卫生设施情况、卫生习惯及受教育程度等多种因素有关，与性别无关，随年龄增长而递增。赵立群等对我国农村自然人群中胃Hp感染率的调查发现，农村Hp感染率（65.4%）明显高于城市（40.5%），成年组（26岁~66岁）和青少年组（15岁~25岁）Hp感染率分别为75.73% 和54.08%（P＜0.001）。本文对西藏高原自然人群中376人进行普查，Hp阳检率为66%，明显高于内地低海拔经济收入较高的同等城市，与我国农村自然人群感染率相近。藏族Hp感染率与汉族Hp阳检率无显著差异（P＞0.05）。男性Hp阳性率与女性阳性率与成年组之比有递增趋势，但无明显差异（P＞0.05）。而青少年组Hp阳性率则明显高于内地农村青少年组Hp感染率（P＞0.05）。这可能与本文检试对象中青少年组以藏族为多，Hp感染基础水平较高，而成人组检试人员较少、汉族人多，且以26岁~45岁者居多（151/172）之故。

Varia发现Hp可通过动物传播给人。在人与人和人与动物之间也可通过唾液或飞沫传播。Menge等报道Hp可通过水源传播。杨海涛等报道Hp感染存在一定的家庭和人群聚集现象。本文随查发现Hp阳检率明显高于内地低海拔经济收入较高的同等城市。这可能与日喀则市经济落后，卫生及住房设施差，人员卫生及生活习惯不良，藏族喜吃生牛、羊肉及菜用青稞酒、酥油茶杯的习惯有密切关系。

总之，Hp感染率的高低，与海拔高度、民族、性别无明显关系，而与人们的经济收入和住房条件、卫生、饮食习惯及受教育程度等密切相关。预防Hp感染，应重点放在提高人们的物质、文化生活水平，改进卫生、住房设施，改善不良的卫生、生活习惯，以减少人类胃病的发生

幽门螺杆菌在慢性胃炎和消化性溃疡中的分布

近来研究显示幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与胃炎和消化性溃疡密切相关。作者对慢性胃炎和消化性溃疡中Hp的分布进行了观察，为评价Hp与胃炎和消化性溃疡的关系与临床意义提供依据。

1 对象和方法

1.1 对象

对375例病人因上消化道症状进行了胃镜检查，其中慢性胃炎247例（男：女=1.5：1，年龄16岁～70岁，平均39.1岁），消化性溃疡128例（男：女=4.6：1，年龄14岁～67岁，平均39.2岁）。在胃镜检查前，病人均未用过抗生素、铋制剂等影响Hp检查的药物。

1.2 方法

①胃镜检查：胃镜和活检钳均用2%戊二醛浸泡15min消毒，使用前用浅水冲冼。除吻合口溃疡外，全部病倒均在胃窦部距幽门口5cm范围内取活检标本。部分病例还在十二指肠球部取活检标本，球溃疡病例在溃疡周边取，球炎病例在炎症明显处取，而球正常者在球前壁取。吻合口溃疡在溃疡周边组织。为防止不同部位的Hp相互感染，每取完一个部位，均更换活检钳。②微生物学检查：以无菌手续用活检钳取活检标本3块：一块放在血琼脂平皿(改良Skirrow配方，万古霉素10mg/L,多粘菌素B2500IU/L，TMP5mg/L)上涂抹做Hp培养。一块放在玻片上制成涂片，加热固定，革兰染色，镜检Hp并计数分级。一块放入尿素酶鉴定培养基中，观察颜色反应，如变红，则可能Hp阳性。培养皿放在10%CO2、5%O2和85%N2条件下，37°C培养3d～7d，观察菌落、细菌形态，并进行生化鉴定和药敏试验。Hp阳性的依据为Hp培养阳性或组织标本尿素酶阳性，加上涂片发现典型的弯曲样细菌。为比较Hp在不同病种、不同部位的寄生密度，将Hp在涂片中的数量分成7个等级。Ⅰ级：全片Hp数量＜100个；Ⅱ级：全片Hp数＞个，每视野Hp数量＜100个；Ⅲ级：100≤每视野Hp数＜200；Ⅳ级：200≤每视野Hp数＜300；Ⅴ级：300≤每视野Hp数＜400；Ⅵ级：400≤每视野Hp数＜500；Ⅶ级：每视野Hp数量＞500。每例整张涂片取Hp数量最多的5个视野平均数，为其每视野Hp数。③组织病理学检查：活检标本在福尔马林溶液中固定，常规石蜡包埋、切片、H—E染色，显微镜下观察组织结构。

2 结果

Hp在显微镜下为弯曲“S”形或“海鸥”形的革兰染色阴性细菌，直径0.2μm～0.6μm。Ta YA1.6～4.4。培养3d～4d的菌落为0.3mm～1mm、半透明、灰色、湿润、稍隆起的圆形菌落。生化鉴定：尿素酶阳性，氧化酶阳性，双糖铁培养基上不发酵、不产H2S，醋酸铅试纸法H2S（+）对1%甘氨酸部分耐受，不还原硝酸盐，不水解马尿酸。对痢特灵、庆大霉素、灭滴灵敏感，对先锋V部分敏感。在375例患者中275例Hp阳性，阳性率为73.33%。消化性溃疡组的Hp检出率为96.9%（124/128），其中十二指肠溃疡为97.4%，二者均比慢性胃炎组Hp检出率（61.1%，151/247）显著增高（P<0.01,P<0.01，表1）。慢性胃炎病例，151例男性中97例Hp阳性（64.2%）96例女性中54例Hp阳性（56.3%），二者差别（p>0.05）。

胃窦部Hp阳性时十二指肠球部的Hp检出率胃炎组为51.4%（19/37），十二指肠溃疡组为88.6%（31/35），二者差异显著（P<0.01）。胃炎组以在球部有胃镜下明显炎症者Hp感染率为高（表2）。十二指肠球部Hp阳性时，其胃窦部Hp也阳性，反之则不尽然。

表1 Hp在胃十二指肠疾病中的分布

表2胃窦部Hp阳性时十二指肠球部Hp检出率

^bP<0.01,vs胃炎

胃炎病例中, Hp感染率随着患者年龄的增大而增高(P<0.05,表3)。

表3 Hp在不同年龄组胃炎病人中的分布

^aP<0.05。

Hp寄生数量，在胃窦部球溃疡组高于胃炎组（P<0.01），在十二指肠球部二组差别不显著（P>0.05）。而二组都显示出胃窦部Hp数量比十二指肠球部高（P<0.01,表4）。

3 讨论

本文在375例患者中，检出Hp为73.3%，其中慢性胃炎Hp阳性率为61.13%，Hp的检出与性别无关，与文献报道相符。有报道在无消化道症状人群和非溃汤性消化不良人群中，Hp感染率随患者年龄增加而增加。本文发现在胃镜和病理证实的胃炎患者中，Hp感染率随患者年龄的增加而增加，提示在慢性胃炎中，随着患者年龄的增加，Hp相关性胃炎所占的比例逐渐增大。

表4 Hp在胃窦部和十二指肠球部的分布

128例消化性溃疡中，Hp检出率为96.9%，较慢性胃炎组明显增高，并且溃疡病例（吻合口溃疡除外）全部伴有不同程度的胃窦部炎症，与文献报道一致。说明Hp相关性胃炎与消化性溃疡有非常密切的关系。文献报道Hp仅寄生在胃化生的十二指肠粘膜，而十二指肠溃疡的球部胃化生率比球炎高。本文也观察到十二指肠溃疡病例其球部的Hp感染率比非溃疡病例高。在胃炎和十二指肠溃疡中，胃窦部Hp感染率比球部高，在球部Hp阳性的病例，其胃窦部Hp也阳性，反之则不尽然。提示Hp感染最初是在胃窦部，以后扩展到十二指肠球部。Hp的寄生密度，在胃窦部球溃疡组大于慢性胃炎组，在十二指肠球部二组无显著差别，二组又全显示在胃窦部的Hp数量比十二指肠球部高。提示单独Hp感染所产生的损伤尚不足以造成溃疡的发生，还应有其它因素存在。

黑龙江消化科人员幽门螺杆菌感染的流行病学调查

近年来,胃炎的发病率呈明显的上升趋势，幽门螺杆菌（Hp）的感染问题日益受到国内外学者的重视。Hp感染与炎症的活动性有着不可分割的关系，Hp感染复发者多数胃粘膜炎症和症状加重。而未复发者炎症和症状均未加重。国内外的医学报道及资料表明，Hp与肝炎病毒具有相似的生活接触及传播性。本文通过调查某医院52例医护人员的Hp感染情况，并结合有关文献加以分析。

1 对象和方法

1.1 对象

随机调查消化科医护人员及其他科室人员（包括行政科室）各26人，年龄20岁～45岁，男:女为10:42，（男性无吸烟史，少量饮酒）。

1.2 方法

采集被调查的医护人员血标本2ml，送本院病理化验室作血清Hp抗体测定。

2 结果（表1）

表1消化科人员中Hp抗体检测结果

P<0.05

3 讨论

通过调查发现, Hp阳性病人的血清及胃液中在特异性抗体,患者血清中Hp抗体滴度较正常人显著增高，说明Hp感染能刺激产生与人胃粘膜自身抗原发生反应的抗体，这种自身免疫反应，可能是Hp引起胃粘膜全层病理改变的致病机理，如不及早医治，多年后导致萎缩性胃炎。近年来，学者们在非人灵长类的胃内发现有Hp样微生物的自然感染，在非人灵长类最为常见的自发性肿瘤为胃癌，基于这些资料，Hp在胃癌中的作用不能排除。胃癌是一个渐进的过程，在发展为恶性肿瘤之前常经过多年持续的癌前病变，若能及早识别和治疗这些病变，不失为防治胃癌的有效途径。有关文献报道，证实Hp感染在家庭内有聚集现象，提示Hp传播与密切的生活接触有关，可能有人—人传播的途径。通过对消化内科医护人员和其他科室人员的Hp感染情况的调查表明，Hp感染的流行病学与经粪—口传播性疾病甲肝和脊髓灰质炎的流行病学很相似，提示医院应对消化内科医护人员的Hp感染情况予以重视，将其预防工作列入同肝炎同等的位置。有关学者检测胃炎患者和正常人血清中Hp抗体表明，血清中Hp抗体与胃炎呈很强的正相关，并与胃炎的活动性和严重程度有关，通过上面的化验发现，血清学检测对Hp感染具有较高的特异性和敏感性，可作为诊断Hp感染的依据。

总之，胃炎是一组多病因的病症，但Hp感染是胃炎的一个重要致病因素，Hp可通过损害胃粘膜屏障功能参与胃炎的发病机制，对于胃炎的治疗应采取杀菌，制酸和胃粘膜保护等综合措施，并应及早发现，及早治疗。

医院内幽门螺杆菌感染的传播

幽门螺杆菌（Hp）感染问题，引起世界性的广泛重视。美国学者对健康人的家庭研究证实，在健康的家庭内存在Hp感染的聚集。我国学者杨海涛等，证明Hp感染在家庭内有成员感染Hp感染与没有感染者家庭成员的抗HpIgG有明显差异，也证明Hp感染在家庭内有聚集。作者将就Hp感染在医院内有无传播，这一问题进行探讨。

1 对象和方法

1.1 对象

选取本院消化科医护人员，与消化科同楼层相邻科室医护人员各13名，消化科人员男2人，女11人，平均年龄41岁，其它科室男3人，女10人，平均年龄40岁。

1.2 方法

用ELISA法检测血清抗HpIgG抗体。抗原从临床患者胃镜活检组织块中分离，体外传代培养Hp，取新鲜培养物涂片，浓度以每个视野内约10～20个Hp，干燥固定后用－10°C之抗原处理液浸泡15min后干燥备用。Hp抗体，受检对象待检血清稀释1:200，滴在玻片Hp菌膜处，室温下30min后，用缓冲液洗去未吸附的血清，再滴工作浓度的荧光抗体，染色后镜检，Hp菌全部染上莹光者为阳性。

2 结果

消化科13名医护人员血清HpIgG抗体阳性者11例，只有2名新来的年青护士阴性，其阳性率84.6%（11/13）。其它科室只有6人为阳性，阳性率46.2%（6/13）。2组间差异显著，P<0.05）由此可见，Hp在医院内健康医护人员中感染率是较高的。经常接触传染源的消化内科医护人员感染率达84.6%，其中胃镜室三名医护人员全部感染。对照组其它科室人Hp抗体阳性率仅46.2%。对两组回顾性调查表明，两组Hp抗体阳性者88.2%（15/17）曾不同程度的出现过胃部不适症状，因症状轻持续时间较短而未予注意，只有3人诊断过胃病。

3 讨论

Hp感染的医源性传播国外已被证实，国内未见报道。本研究对同一医院相同环境下的相邻两个科室，性别、年龄等相似有可比性的医护人员调查表明，Hp在医院内传播是严重的。胃镜室与消化科医护人员Hp感染率甚高，证明胃病是有传染性的疾病。

消化科及胃镜室工作人员中，每天与大批传染源接触，通过说话时飞沫传染或给病人清洗口腔分泌物及胃内容物感染。由于对胃病传染性认识不足，防护意识差，往往通过已污染的手，经口传染。因此，应加强管理，普及有关知识，增强消毒观念，检查处置时要带口罩，问诊时避免正面对病人，使用高效杀灭Hp的消毒液清洗胃镜等器械，防止交叉感染。

宁夏吴忠地区4238例胃十二指肠疾病患者幽门螺杆菌感染情况分析

自1983年Warren和Mashall 首先报道慢性活动性胃炎患者窦粘膜活检标本中分离培养出幽门螺杆菌（Hp）以来，引起了国内外学者的极大重视。国内于1985年开始这方面的研究，我院自1990年开展此项工作，现就我院胃镜下活检标本中Hp感染检出情况做一分析，供同道参考。

1 对象和方法

收集我院1990年5月～1996年9月胃镜活检资料4238例。其中男2958例，女1280例，男女之比为1:0.43。回族1762例，汉族2476例。年龄以20岁～69岁为主，占总例数87.54%。发病时间最长12a，最短4个月。标本按常规用10%福尔马林固定，石蜡包埋，切片脱蜡作HE及过磺酸苏木素染色，置光学显微镜下镜检。

2 结果

4238例中Hp（+）者共1419例，占总检查数33.49%其中回族检出率为33.53%，汉族检出率为33.47%，回汉族之间有无明显差别。4238例中，慢性胃炎3837例，占总例数91.50%；胃溃疡119例，占2.8%；十二指肠溃疡49例，占1.16%；其它（包括胃癌、息肉等）192例，占4.45%。慢性胃炎中，检出Hp（+）者1408例，检出率为36.34%；十二指肠溃疡共检出Hp（+）者10例，占21.42%；胃溃疡组及其它组Hp检查均为阴性。

3 讨论

本组4238例标本中，检出率为33.49%，各地报道Hp检出率虽不一致，多在39%～62%；大致在50%左右，我们的检出率明显低于以上报道。因我地区为回族聚居区，我们分析了两个民族患者Hp检出率，无明显差异。原因在于两个民族长期一起聚居，生活饮食习惯及慢性胃病的发病均无明显差别，因此Hp感染也无重大差别。本组仅在慢性胃炎及十二指肠溃疡病例中检出。其中慢性胃炎组检出率为36.34%，亦低于国外及国内报道。世界各地报道检出率不一致，约为40%～50%；而国内南方医院252例慢性胃炎中有70.2%检出Hp。特别在活动性胃炎中，其检出率可高达90%，本组十二指肠溃疡中，有10例检出Hp，检出率仅21.42%。Marshall报道15例十二指肠溃疡100%感染Hp。国内亦有报道65例十二指肠溃疡中42例显Hp（+）。分析检出率较低的原因，可能与取材有关。文献报道Hp呈灶性分布，由于取材范围有限而漏检。溃疡病变区Hp存在较少，而在胃镜下取材又多在溃疡附近组织，故阳性率较低。

另据国内文献报道：Hp的检出率的高低，似与当地经济状况、地理条件有关。我国7个城市中经济较发达的南京、无锡Hp检出率较高（可达56%～68%），而经济较落后的宜兴，扬中县等较低（仅41%～42%）。地处青藏高原的西宁市其检出率仅达21%。我区亦属边远落后的地区，情况与西宁相近，是否是检出率较低的主要原因，值得进一步追索。

另外，Hp的组织学检测方法是确定Hp感染及菌量的直接手段。据报道，目前虽有特异的Hp单抗免疫组织化学和原位分子杂交方法的报道，但推广尚有困难。组织化学方法虽不具特异性，但由于Hp具有特殊的形态及寄居地位，不易与其他细菌混淆，除经典的Warthin-Starry染色法外，我们认为用普通HE及过碘酸苏木素双套染色，这在基层医院极方便、经济、实用、可作为病理科的常规工作，并可应用于大规模人群普查。

银川地区慢性胃病患者幽门螺杆菌感染情况分析

自从1983年Warren和Marshall首次报道在慢性活动性胃炎病人的胃粘膜活检标本中，发现并培养出幽门弯曲菌，现定名为幽门螺杆菌（Hp）以来，国内外进行了广泛的研究，认为Hp感染同慢性胃病的发病有密切关系。宁夏为慢性胃病高发区，且为西部贫困地区之一，又有回族群众居住集中等不同之处，因此为了研究宁夏银川地区慢性胃病患者Hp感染的特点，我们对575例慢性胃病患者的的胃粘膜活检标本用Hp 1min快速型诊断试纸进行观察，报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象

全部病例均来源于本院胃镜室1995—8～1996—4期间经纤维胃镜及病理诊断确诊患者。排出急性胃粘膜病变，卓艾综合征及近2月来未行抗Hp治疗者。575名患者中男338人，女237人，男女比例为1.42:1，年龄14岁～82岁，平均46.8岁。汉族518人，回族57人。农民308人，工人189人，干部66人，教师6人，个体2人，学生4人。居住地为银川市者99人，县城164人，农村312人，慢性浅表性胃炎127人，慢性萎缩性胃炎343人，十二指肠球部溃疡51人，胃溃疡23人，胃癌31人。

1.2 方法

纤维胃镜检查时，用消毒过的活检钳在胃窦部钳取胃粘膜组织一块，取1min快速型Hp诊断试纸（珠海珠信生物工程制品有限公司出品），将活检组织放于试纸中央。放置1min试纸由黄色变成樱红色为阳性，不变色为阳性，如延迟3in变为樱红色为弱阳性。

2 结果

2.1 Hp总检出率

575例患者中Hp阳性者382例，总检出率为66.4%。男性阳性者231例，阳性率为62.4%，女性阳性者为151例，阳性率为63.7%。男女之间阳性率无明显差别。

2.2 不同民族Hp检出率

受检汉族518例，Hp阳性351例，阳性率67.8%；受检回族57例，Hp阳性31例，Hp阳性率54.6%。经X²检验，P<0.01，汉族与回族Hp检出率有显著差别。

2.3 不同年龄Hp检出情况（表1）

表1 不同年龄Hp检出情况

2.4 不同职业Hp检出情况（表2）

表2 不同职业Hp检出情况

2.5 不同居住地Hp检出情况

表3 不同居住地患者Hp检出情况

2.6 不同病种Hp检出情况

表4 不同病种组Hp检出情况

2.7 是否伴有活动性炎症患者

Hp检出率575例中伴有活动性炎症179例，Hp阳性142例，阳性率97.3%，非活动性炎症396例，Hp阳性240，阳性率60.7%。经X²检验，P<0.01。

2.8 胃癌不同病理分型的Hp检出情况

经病理检查24例为胃癌，其中低分化腺癌20例，Hp阳性13例，阳性率54%。管状腺癌2例，Hp阳性1例，乳头状腺癌2例，Hp阳性1例。

3 讨论

本文Hp总检出率为66.4%，同国内报道相比，与宁夏法金枝报道基本相同（67.8）低于新疆籍希平报道（71%）高于广州杨海涛（58%）和江苏朱云华（58.7%）报道。这种宁夏银川地区同南方省份Hp感染率差别，除了地理环境外，与西北地区经济不发达，生活水平，卫生条件相对较差有关，近年来国外的研究证明，Hp的人群自然感染率与不同国家、不同时期的经济发展，卫生条件有直接关系。AsakaM等研究了日本不同时期人群Hp感染率，发现日本1950年以前出生的人Hp阳性率80、9a%，1950年～1960年出生的人Hp阳性率45%，1960年～1970年出生的人Hp阳性率为25%，1970～1980年出生的人Hp阳性率20%，认为Hp感染率在不同时期的高低，与日本的经济发展情况有直接关系，经济越发达，Hp感染率越低。本文作者研究的结果也支持此观点。

本文研究结果证明回汉族之间Hp感染率存在明显差别，汉族Hp阳性率明显高于回族，这可能与回族风俗习惯有密切关系，但因回族病例较少，此点有待进一步研究。本文研究结果显示出不同年龄的Hp感染率差别。以1岁～20岁年龄组组最高，但病例数太少，难以说明问题。20岁～40岁及40岁～60岁两组Hp阳性率均明显升高且互相接近。这与青壮年人活动范围大，接触面多，传染机会增加有关系。同时提示Hp感染率高也是我国青壮年慢性胃病多发的主要原因，并且为慢性胃病的防治提供重要的依据。

在不同职业的Hp感染率中以工人最高，农民次之，这与工人以群体劳动为主，人口密度相对较大，接触密切有关。同时也与工人农民的经济收入，卫生状况有很大关系。不同居住地患者的Hp感染率，以往的文献中很少见有报道。本文研究结果示Hp感染率城市最低，但县城和农村几乎相等，这与宁夏县城建设规模远远低于南方诸省，城乡接触较近，县城人口居住条件，卫生状况与农村人口相差较小有关。最近国外研究证明，家庭中缺少热水浴、拥挤、共用一床是Hp感染的主要因素。这点也支持本文研究县城和农村居住者高于城市的结果，并提示Hp感染的预防应注意卫生条件及居住条件的改善。

Hp感染同慢性胃炎、消化性溃胃癌及胃粘膜活动性炎症的关系，本文研究结果与以往文献相同，不再赘述。

幽门螺杆菌感染的流行病学特征及致病机理研究

在有关的幽门螺杆菌本身及其与上消化道疾病关系的研究愈来愈深入的今天，人们更加重视Hp感染的流行病学及其致病性研究，因为任何一种流行病如果不清楚其流行病学特征及致病机理是很难从根本上进行防治的。经过十几年的国内外学者的艰苦努力和广泛深入研究，已经揭开Hp及其感染的端倪，为下一步彻底防治与Hp感染有关的疾病，奠定了基础。

1Hp感染的流行病学特征

现已公认Hp是人类慢性胃炎的主要病因，Hp流行病模式也适用于慢性胃炎。Hp的感染率随年龄的增加而上升，一旦感染如果未经系统抗Hp治疗可受累终生。在发达国家儿童感染并不普遍，每年增加约1%～2%，而成年人到了60岁，约有50%的人感染Hp。在发展中国家其感染在儿童阶段就可以发生。在成年人年龄组感染率上升超过发达国家水平。无论发展中国家还是发达国家，感染率在男人和妇女中几乎是同等的。目前在世界各地的多项研究中发现，有色人和黑色人的感染率明显比白人高，而且这一结果不受年龄、性别、收入、受教育程度、吸烟饮酒及住房等因素的影响，Hp在社会经济壮况差的人群中更易流行低收入家庭Hp感染率比高收入家庭为高。社会最低层感染率最高，中产阶层次之，而上层社会最低。

目前多数学者认为“人—人”“粪—口”是主要的传播方式和途径。亦可通过内镜传播，而且Hp感染在家庭内有明显的聚集现象，父母感染了Hp其子女的感染机会比其它家庭高得多。对感染Hp的家庭调查提示。有Hp感染者家庭中的“健康人”，Hp抗体阳性率为64%，明显高于同年龄组无Hp感染患者家庭的“健康人”（13%）。

2Hp的致病机理

2.1 尿素酶的作用

Hp之所以能在酸性胃液中存活，主要是由于Hp能分解尿素，在菌体周围形成保护性氨环境，一方面氨能保护Hp使其免受胃酸的影响，另一方面氨对胃粘膜有直接毒性作用。

2.2 粘附和定居作用

胃肠道致病菌在胃肠上皮细胞表面的粘附和定居往往是引起胃肠感染的第一步。Hp同样不例外，其对胃壁上皮有某种亲和力，菌体外壁有植物血凝素，有助于Hp粘附在粘液层骨或胃上皮细胞膜上。

2.3 蛋白酶作用

Hp的蛋白酶，脂酶和磷脂酶等能破坏胃粘液层的完整性，消化酶可以降解粘液蛋白分子中的蛋白基质，从而使胃液粘稠度减小，胃粘膜屏障遭到破坏。

2.4 细胞毒素作用

Hp可产生各种毒素，其中一种毒素能使培养的上皮细胞产生空泡样变，大约60%的分离菌株可产生该毒素，特别是从溃疡患者中分离的菌株。另一种毒素可抑制细胞泌酸

2.5 免疫反应

Hp作为抗原不仅能引起全身免疫反应，也可诱发局部免疫反应，菌体的可溶成份吸引吞噬细胞进入到腺体和粘膜固有层，形成典型的活动性胃炎病理学表现，吞噬细胞移行穿过上皮细胞层和产生针对Hp的毒性产物，可能是胃炎患者胃上皮损伤的原因，浆细胞产生特异性的免疫球蛋白A和G，并激活补体反应。淋巴细胞以T细胞为主，可诱发上皮细胞表达Ⅱ类组织抗原，从而激活了局部的细胞毒性免疫反应。

4．5 其它

胃十二指肠病变程度与胃氨的关系

由幽门螺杆菌（Helicobacterpylori, Hp）的尿素酶所分解产生的氨，长期作用于大鼠胃粘膜可破坏胃粘膜屏障，导致大鼠发生萎缩性胃炎。为阐明由Hp产生的氨对人胃十二指粘膜的影响及程度，在内镜下取组织行Hp培养、尿素酶试验、肉眼及病理诊断分类，并行胃液氨浓度（胃氨）测定，对胃十二指肠粘膜不同病理改变情况下的胃氨进行比较。

1 材料与方法

1991年2～9月在我院就诊的286例胃、十二指肠疾病患者及37例无症状志愿者。在胃镜活检前用胃管抽取胃液3～5ml，即刻用Nessler显色法测定胃液中的氨浓度；取胃窦部粘膜组织，作细菌培养和Hp鉴定，以尿素酶阳性为Hp感染。然后在病变部位取活检作病理学检查。

2 结果

正常人37例胃氨测定为11.86mg/L±5.19mg/L 范围为23.99mg/L～3.59mg/L。Hp阳性组（220例）的胃氨测定结果为21.50mg/L±4.10mg/L阴性组（103例）为15.30mg/L±6.30mg/L。阳性组明显高于阴性组，差异有非常显著性（P＜0.01）。各种胃、十二指肠疾病Hp阳性患者的胃氨均高于正常粘膜组Hp阳性者，除胆汁反流性胃炎和胃癌因病例较少外，其他均有统计学意义。各疾病组（Hp阳性+Hp阴性病例）的胃氨，除胆汁反流性胃炎外，同样明显高于正常胃粘膜组（P＜0.01）。慢性浅表性胃炎及十二指肠球炎的病变程度越重，其胃氨亦越高，差异有非常显著性（P＜0.01）；十二指肠球部溃疡活动期和治愈期的胃氨明显高于正常胃粘膜组（P＜0.01），而瘢痕期与正常胃粘膜组比，差异无显著性。

3 讨论

尿毒症、肝性脑病等血氨增高患者常并有消化道出血，严重者可导致死亡。近年来，人们发现Hp分泌和尿素酶可分解来自备注及食物中的尿素产生氨，而使胃氨增高。河内山报告Hp阳性者胃氨为2919mg/L，明显高于阴性者，但其值远较慢性肾衰患者低。为探讨这种增高的低浓度的氨对胃粘膜的影响，我们用0.01%～0.02% (10.00mg/L ～20.00mg/L)的氨水长期喂养大鼠，证实此浓度的氨水可破坏胃粘膜屏障，导致大鼠发生萎缩性胃炎和胃溃疡。

Hp阳性与阴性患者的胃氨测定表明，阳性组明显高于阴性组。胃氨导致胃粘膜损害的机制可能有以下几点：①氨对胃粘膜有直接毒性作用，长期作用于胃粘膜可导致粘膜损害。②氨可破坏胃粘膜屏障功能。用低浓度的氨水长期喂养，可导致大鼠的胃粘膜血流减少，电位差降低，胃粘膜前列腺素减少及胃粘膜PAS染色阳性层变薄。③氨可以在粘膜表面形成一个跨粘膜氨梯度，妨碍胃腺的H⁺进入胃腔，促进H⁺回渗。④氨的刺激也可能会在循环中产生抗体，通过变态反应造成组织损伤。

我们尚未见到有关胃氨正常值的报告。本研究使用血氨Nessler定量法，测定37例正常人的胃液氨浓度为11.86mg/L±5.19mg/L，作为初步的参考数据。

综上所述，由Hp的尿素酶所分解产生的氨与人胃十二指肠疾病密切相关，Hp感染越重，胃氨越高，胃十二指肠的病理改变就越严重。可见胃氨增高是Hp导致人胃十二指肠疾病发生的重要原因之一。本研究以尿素试验阳性为有Hp感染，可能存在一定的假阳性，造成实验误差。另外，Hp对胃肠粘膜损害的机理较复杂，氨并不是唯一的因素，应考虑到各种致病因素的综合作用。

猫是幽门螺杆菌的动物宿主

我们应用常规微生物、病理技术及分子生物学方法在猫胃粘膜检出了幽门螺杆菌（Hp）。18只家养猫均自市场购得，运回实验室的当天宰杀，以排除实验室污染的可能性。杀死动物后立即剖腹，取新鲜胃粘膜组织作快速尿素酶试验（UAT）、涂片染色、常规石蜡包埋组织切片Warthin-Starry银染、细菌培养、寡核苷酸探针尼龙膜杂交及聚合酶链反应（PCR）检测。

18只猫中有15只UAT阳性，用Skirrow选择性培养基在37°C、5%的微氧环境下培养出3株Hp样细菌，培养基中加猫血或羊血比用人血生长好。有11只猫的胃粘膜及1株培养出的细菌的DNA被提取出来作杂交和扩增。寡核苷酸探针长27bp，系螺杆菌属细菌特异探针，经3’-OH端加尾标记半抗原地戈辛素后作膜杂交，11只猫胃粘膜有8只为阳性，猫胃培养菌也为阳性。PCR引物系幽站螺杆菌特异的16srRNA基因片段，扩增片段长500bp，该引物不扩增包括猫胃螺杆菌（H.felis）和空肠弯曲菌在内的近缘菌株DNA，在11只猫的胃组织中发现7只阳性者，一株培养菌也为阳性。病理切片银染则发现猫胃粘膜至少存在三种弯曲样菌（既往称之为幽门螺杆菌相关菌），一种为Hp样菌，形态与Hp相近，一种为Gh（人胃螺旋菌）样菌，菌体比Hp粗大且长，螺旋数多，与Gh及H.felis相近，另一种呈弯曲样菌，菌体较Hp长，形态与Hp相似，但螺旋不明显。双盲法观察，发现有大量Hp样菌的标本，其对应的DNA标本PCR均为阳性，而有Hp样或Gh样细菌定殖的标本，UAT及探针杂交均为阳性。

据此，我们认为，猫胃粘膜有Hp定殖，猫应该是Hp的动物宿主和传染源之一。由于猫是最常邮的宠物之一，因此明确其为Hp的动物宿主对该菌的防治有重要的理论和实用价值，且为Hp的动物传播理论提供了直接证据。

5． 幽门螺杆菌感染的病理生理学研究

5．1总论及基础研究

幽门螺杆菌在消化性溃疡发病机理中的作用

现在已有足够证据说明幽门螺杆菌是非自身免疫性慢性胃炎的一个重要病因因素。然而，它在消化性溃疡中所起的作用尚未肯定。许多胃肠病学家认为，该菌在溃疡发生上可能起着重要作用。

我们对475例具有消化不良症状者在内镜检查时均采取胃窦粘膜活组织，除病理学检查外，并进行幽门螺杆菌有关检查，包括细菌培养、尿素酶试验和Warthin Starry银染色观察片上的细菌，发现该菌在消化性溃疡病时的检出率为84.1%（106/126），慢性胃炎时为54.7%（173/316），在十二指肠溃疡病时的检出率又高于胃溃疡病，前者为86.5%（90/104），后者为72.7%（16/22）。对30例十二指肠溃疡病同时采取胃窦粘膜和十二指肠球部粘膜活组织。细菌学研究表明幽门螺杆菌在胃窦粘膜和十二指肠球部粘膜中均有较高的检出率，前者为86.7%(26/30)，后者为80.0%（24/30）。幽门螺杆菌感染与消化性溃疡病，特别是十二指肠溃疡病有如此密切的联系，提示该菌很可能和溃疡发生有关。

抗菌药物的治疗效果也强烈提示幽门螺杆菌在十二指肠溃疡病的发病机理中起一定作用。我们应用庆大霉素对30例幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病进行了治疗。庆大霉素素4万单位，早晚空腹及午餐前一h各服一次。10d为一疗程，中间休息4d，共三个疗程。治疗结果，21例（70.0%）溃疡愈合，17例（56.7%）幽门螺杆菌清除，22例（73.3%）合并的慢性胃窦炎症好转，而在30例安慰剂治疗（3.3%）和2例（6.7%），两组差异有非常显著性。随后又应用黄连素、呋喃唑酮和土霉素各治疗15例幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病，并与庆大霉素的治疗结果进行了对比。用药方法是：黄连素0.3g，呋喃唑酮0.1g，土霉素0.5g，均为每日3次，饭前口服，10d为一疗程，中间休息4d，共三个疗程。治疗结果，这三种抗菌药物无论在溃疡愈合、幽门螺杆菌清除、胃窦炎症减轻和活动性炎症消失上均与庆大霉素治疗效果相同。由此说明，单独应用抗菌药物治疗幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病可以取得比较肯定的治疗结果。这也提示，幽门螺杆菌在溃疡生成上起一定作用。

抗菌药物不仅对寻常的幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病有效，而且已经证明对多种抗溃疡药物治疗无效的顽固性十二指肠溃疡亦有良好效果。我们对6例用传统抗溃疡药物，包括组胺H₂受体阻断持续治疗一年以上，症状不见缓解，溃疡未愈合者，使用庆大霉素治疗。6例中有5例幽门螺杆菌消失，症状缓解，溃疡愈合；另1例溃疡虽未愈合，但明显缩小，症状亦相应减轻。这一治疗效果提示，幽门螺杆菌在使溃疡迁延不愈上起一定作用。

现有充分证据表明，清除幽门螺杆菌可以显著降低消化性溃疡病的得发率。我们对80例幽门螺杆菌相关性溃疡病，随机分为胶体次枸橼酸铋(colloidal bismuthsubcitrate,CBS)和雷尼替丁治疗组，疗程8周。结果显示，CBS和雷尼替丁治疗组的溃疡愈合率分别为88.1%和92.1%，两组差异无显著性。治疗1周内疼痛缓解率亦相同。然而，幽门螺杆菌清除率、胃窦部炎症好转率及活动性炎症消失率，CBS组和雷尼替丁组分别为83.3%,73.8%,71.4%和2.63%，10.5%，2.63% 差异有非常显著性。随0.5a～1a的溃疡累积复发率，CBS组和雷尼替丁组分别为19.4%,41.9%和 46.7% ，73.3%，两组比较有明显差异。研究表明，CBS和雷尼替丁对幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病虽然近期疗效相同，然而无期疗效显然不同。结果提示，幽门螺杆菌的存在很可能和溃疡的早期复发有关。

我们对比研究了庆大霉素、雷尼替丁、庆大霉素+雷尼替丁对幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡的近期疗效。结果：溃疡愈合率分别为70.0%,92.1%和100%；幽门螺杆菌清除率分别为56.7%,2.63%和73.3%；胃窦炎减轻率分别为73.3%，5.3%和80.0%；活动性炎症消失率分别为 71.4%，2.9%和76.9%。结果表明：①庆大霉素的溃疡愈合率低于雷尼替丁，而幽门螺杆菌清除率、胃窦炎减轻率和活动性炎症消失率都明显高于雷尼替丁；②庆大霉素与雷尼替丁合用，虽然不能明显提高雷尼替丁的溃疡愈合率，但能显著提高幽门螺杆菌清除、胃窦炎减轻及活动性炎症消失的效果。可以预期两者合用，由于幽门螺杆菌清除率的提高，溃疡复发率将会降低。这一结果提示，在十二指肠溃疡病发生上，细菌因素不如酸重要，而幽门螺杆菌也不影响它的愈合。

综上所述，现在尚无证据表明幽门螺杆菌是消化性溃疡病的一个新的病因因素。然而有证据表明它与消化性溃疡的顽固不愈和早期复发有密切关系。可以认为幽门螺杆菌参与发病机理，是溃疡发生的一个重要的危险因素。

幽门螺杆菌是十二指肠溃疡的病原菌吗？

十二指肠溃疡病是一个相当古老的疾病，但其病因学和发病机理迄今未能完全阐明。多少年来人们一直认为胃酸是发生溃疡的必需条件，因此1910年Schwarz的名言“没有酸便没有溃疡”一直在溃疡的发病机理中占据统治地位。但是，这一理论自1983年Warren和Marshall从人胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（helicobacter pylori, Hp）后逐渐受到挑战。近年来胃肠病学界盛行着十二指溃疡病的致病原因是Hp而不是pH，因此，提出“无Hp便无溃疡”的论点。他们认为十二指肠溃疡病是一种传染性疾病。他们的根据是十二指肠溃疡病和Hp密切相关，Hp感染在该病的检出率高达95%~100%，而且根除该菌后可以防止溃疡复发。

Hp在十二指肠溃疡病发病机理中占一定位置，这已为各国胃溃疡病学家所公认，无容置疑。问题是其重要性空间达到什么程度？我曾在一篇述评中结合我们的研究结果阐述了我们的看法。在迄今为止尚无Hp致成十二指肠溃疡病直接证据的情况下，过早地肯定Hp是该病的病原菌，提出“无Hp便无溃疡”从而得出十二指肠溃疡病是一种传染性疾病的结论，其正确性值得商榷。

Hp既然是十二指肠溃疡病的病原菌，但是二者相互联系的特异性为什么不强？也就是说为什么多数Hp感染的病人并没有患十二指肠溃疡病？例如，自1986~1993年末，因有上腹部症状来我科内镜室进行胃肠内镜检查且证实有Hp感染者共4858例，其中仅818例（16.8%）有十二指肠溃疡病。又如国外一篇研究报道指出，对345例有Hp定居而无十二指肠溃疡病的消化不良病人进行了3年左右的内镜和临床随访，在此期间仅2例发生了十二指肠溃疡病，1例发生胃溃疡病。这表明其十二指肠溃疡病的发病率低于在一般人口中的预期数值。

Hp既然是十二指肠溃疡的病原菌，但是如何解释在Hp感染病人和十二指肠溃疡病病人间存在的显著的人口统计学特点的差异？例如，在我国十二指肠溃疡病病人具有显著的男性优势，患病高峰为20岁~50岁，而Hp感染并无性别分布的差异，且其感染率在老年人最高。

“无Hp便无溃疡”这一观点的支持者们也承认有些十二指肠溃疡发生于无Hp感染的病人，便他们认为这种病人均另有原因，如非类历醇抗炎药、Crohn病、Zollinger-Ellison综合征（胃泌素瘤）等而非真正的消化性溃疡病。但是根据我们的经验，确实有部分寻常的十二指肠溃疡病病人不存在Hp感染，这些病人不但用常规方法（活组织尿素酶试验、活组织切片用Warthin-Starry银染色找细菌和细菌培养），甚至用多聚酶链反应（polymerase chain reaction）技术均未能检出Hp。对于这部分没有Hp感染的寻常的十二指肠溃疡病的发病又如何解释？

完全无抑制Hp作用的抗分泌药如H2受体阻断药对合并Hp感染的十二指肠溃疡病的治疗效果也不支持Hp是该病病原菌的看法。我们曾对90例Hp相关性十二指肠中疡病随朵分成雷尼替丁、庆大霉素、土霉素、呋喃唑酮和黄连素5个组进行短程治疗。治疗结果：溃疡愈合，雷尼替丁的抗菌药物组织分别为97%和53%~67%（P＜0.05）；Hp清除分别为3%和40%~60%（P＜0.05）胃窦炎减轻分别为2%和67%~73%（P＜0.05）；胃窦活动性炎消失分别为7%和50%~71%（P＜0.05）。研究结果表明，溃疡的愈合不但不受Hp存在的影响，且抗胃酸分泌药雷尼替丁的溃疡愈合效果反而优于抗菌药物。研究结果还表明，溃疡的愈合似乎与胃窦炎减轻和活动性炎消失无关。

综上所述，当前尚缺乏足够证据表明Hp是十二指肠溃疡病的病原菌，“无Hp便无溃疡”和十二指肠溃疡病是一种传染性疾病这种论点的正确性。一般的看法是十二指肠溃疡病并不是一个单一的疾病，而是以溃疡这一共同临床表现为基础的多种疾病所构成，也就是说其发病绝非小及一种因素，而是涉及多种因素和其它因素或这些因素的综合。Hp究竟在这些错综复杂的因素中占有什么地位，尚有待更多的科学证据才能确定。

幽门螺杆菌与胃十二指肠疾患研究进展

胃、十二指肠疾患包括胃炎、十二指肠炎、胃十二指肠溃疡及出血、胃癌等，在中医学中属“胃脘痛”、“嘈杂”、“吐酸”、“痞证”等范畴。自1983年澳大利亚Warren和Marshall发现在人胃上皮细胞表面生长着一种幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）以来，国内外研究，95%以上的十二指肠溃疡、80%的胃溃疡、90.5%的慢性活动性胃炎以及发达国家中35%的胃癌、发展中国家中85%的胃癌同Hp感染有关；国内学者范学工博士经实验研究，在国际上第一次证实了Hp能增加胃上皮细胞的繁殖，Hp感染是胃癌发生的直接原因之一。现就Hp有关的研究，中西医结合清除Hp及治疗胃十二指肠疾患资料综述如下。

1Hp病原学研究

1.1 Hp形态

Hp系革兰氏阴性菌，呈弧形或S形状，长1.5μm～3.0μm 宽0.5μm，菌体光滑，两端纯圆，鞭毛位于一端，有2～6根，偶从两端发生，鞭毛顶端呈球形，鞭毛餐被鞘，鞘与细胞壁的外膜直接相连。

1.2 Hp的生活环境

Hp在微需氧下，37°C环境生长。Hp定居于胃粘膜上皮表面，粘液深部的微需氧环境中，从扫描电镜下Hp位于胃上皮细胞连接间沟及胃小凹内，横卧在微绒毛的表面，垂直插入微绒毛间或粘液中，有细丝或粘着带粘附在胃上皮表面。尚可定居于胃粘膜化生区：食管、十二指肠、Meckel氏憩室等胃粘膜化生部位。

1.3 Hp的特点

Hp具有分泌尿素酶的特点，此酶分解胃液中尿素，产生氨，形成“氨云”围绕Hp造成近中性环境。保护Hp免遭胃酸杀死。

2Hp检测方法研究

2.1 侵入性方法

此类方法是一种必须通过胃镜检查的方法，取得胃粘膜组织，行细菌产物尿素酶检查或组织学检查，在显微镜下查找细菌，或做细菌培养。其优点是诊断可靠，对胃的病变作出确切判断。①胃镜下活检胃粘膜作培养。②胃镜下活检组织切片染色：Warthin-Starry银染色Hp呈棕黄色；HE染色呈嗜伊红，色淡；Giemsa染色呈深红色；吡啶橙染色需荧光镜检，免疫组化染色及聚合酶链反应法(polymerase chain reaction,PCR)等。③粘膜涂片行革兰染色或细胞刷检涂片行1%美蓝染色。④活检粘膜体外检测尿素酶（有商品化试剂盒）或胃内喷酒法。上述方法以培养及W—S银染法最准确，为诊断的可靠依据。

2.2 非侵入方法

此类方法是不需要做胃镜检查的方法，是利用同位素标记的尿素做呼气试验，从细菌产物尿素酶的存在，推测Hp的存在；或者以测定血清中对细菌或其毒素的抗体是否增高，间接判断有无Hp感染。①¹³C—尿素（¹³C—UBT）或¹⁴C—尿素（¹⁴C—UBT）呼气试验：口服¹³C—尿素或¹⁴C—尿素溶液，在尿素酶作用下分解成¹³CO₂或¹⁴CO₂，经胃肠吸收后随呼吸呼出，收集呼出气体标本，用质谱仪分析计算¹³CO₂含量，或用液体闪烁计数器检测¹⁴C量，Hp感染呈阳性。此法也很准确。②血清学法试验从血清或唾液中测定抗Hp抗体IgG沆度，可提示是否感染过Hp。当Hp根除后抗Hp抗体IgG滴度逐渐下降，6月～8月后转阴。Sternberg等研究报道，此法用于青年组（＜30岁）检测特异性较高，为83.3%，在年龄较大组（＞30岁）检测特异性较低，为41.8%，因此，此法对于青少年适用，对于年龄较高者不做为Hp感染的常规诊断。

3Hp流行病学及发病机理

3.1 Hp感染人群

Hp感染随人群年龄增加而上升，持续时间可长达终生；社会经济状况低下者感染率高；发达国家每年增加1%～2%，黑人高于白人。在国内属高感染，感染年龄较发达国家早10a～20a；城市人群感染高于农村，5岁以下分别为38%，21%，5岁～40岁为76%，56%，40岁以上为68%～78%和58%～63%。

3.2 Hp感染传播途径

①口—口传播为主要传播途径。②医源性传播如胃镜器械消毒不善，通过器械传播，须用戊二醛浸泡15min。③粪—口传播

3.3 Hp致病机理

据统计，胃十二指肠溃疡发病机理主要是由于粘膜攻击因子（胃酸胃蛋白酶的消化作用）与防御因子（粘液/HCO₃^-屏障及粘膜修复功能）失去平衡而致。Hp居于胃粘液下、胃上皮表面，以鞭毛的高活动穿透粘度的粘液层，产生降解胃粘液层的粘蛋白酶；并靠粘着素紧贴胃上皮表面吸收营养，通过分泌尿素酶产生氨形成“氨云”保持中性环境使Hp不致被胃酸杀灭。另外，Hp分泌产生的物质：氨、多种酶类（蛋白分解酶、脂多糖、脂酶、磷脂酶A、溶血素）、毒素、多种炎性界质、细胞因子，以致局部发生损伤性免疫反应，使局部粘液/HCO₃^-屏障受损，能量代谢障碍，H⁺反渗，致胃粘膜炎症、糜烂或溃疡。

4Hp感染的治疗研究

4.1 胃十二指肠溃疡治疗途径

①抑制胃酸分泌（抑制攻击因子） 优点是见效快，治愈率高；副作用是因长期抑酸致消化功能衰退，复发率高难治愈。②调整防御因子 以含铋复合制剂，通过调和胃酸、抑制Hp、增加胃粘液，形成新的胃粘膜，达到根治目的。③杀灭Hp 根除Hp可使Hp感染相关性胃炎消退，促进溃疡面愈合，减少复发，缓解疼痛。

4.2 胃、十二指肠溃疡治疗药物

①H₂受体拮抗剂 西米替丁（Cimetidine）雷尼替丁（ranitidine,善胃得）、法莫替丁（famotidine）、罗沙替丁（roxatidine）一种新型H₂受体拮抗剂。②质子泵抑制剂 奥美拉唑（omepratol,Ome,商品名losec,洛赛克），原瑞典阿斯特拉公司60年代开始研究，1988年首次在瑞典注册应用，1988年8月进入国内市场，在全球已治疗1亿多人次，口服20mg/d～30mg/d可维持24h以上，具高度安全性、可靠性。米索拉唑(lansoprazole,Lan,商品名达克普隆)，日本生产，用法：口服30mg/d。潘妥拉唑（pantoprazole），其与前二药相比，它对细胞色素P—450影响最小。治疗浓度在体内与安定和茶碱无相互作用，亦不干扰苯妥英钠和华法林的药物动力学，用法：口服40mg/d。兰米诺拉唑（leminoprazole），系新药，直接作用胃粘膜，抑制胃壁细胞功能，其它的需粘膜吸收后起作用。此类药物作用机制，系直接抑制胃酸分泌最终环节（H⁺-K+-ATP酶，质子泵），使酸分泌降低，创造24h中溃疡愈合最佳环境；Ome作用于H⁺-K⁺-ATP酶的半胱氨酸二个部位，米索拉唑作用于（H⁺-K⁺-ATP酶的半胱氨酸321，813，892三个部位，影响（H⁺-K⁺-ATP酶活性，抑制胃酸。③胃粘膜保护剂类 铋类制剂有三钾双枸橼酸铋（德诺）、乐得胃、胃必治、胃仙U、三九胃泰等胶态枸橼酸铋。另有米索前列醇（misoprstol）及恩前列醇（enprostil）保护剂。④抗生素类（杀灭Hp） 甲基红霉素（clarithromycin新大环内酯类药）四环素、庆大霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素（Amo，阿莫西林）、甲硝唑、呋喃唑酮（FZ）等。

4.3 抗Hp感染治疗适应证

胃十二指肠溃疡有以下情况者：①难治性溃疡：常规治疗3个月（用H₂受体拮抗剂治疗）无效者，或治疗过程中效果不佳并出现并发症（出血或穿孔）者；②溃疡复发频繁，治疗1a内复发两次或两次以上者；③伴有肺心脑疾患或同时服用非类固醇抗炎药（NSAID）的溃疡患者。④Hp相关性胃炎，对常用药物治疗疗效差者。

4.4 不宜常规抗Hp感染治疗者

①服用NSAID药物或其它病因所致溃疡病。②病变轻，症状间断或采用一般治疗有效者。③Hp相关性胃炎不一定均需抗Hp治疗，这是因为大多数Hp感染是良性过程，有报道Hp可能是人体口腔中正常菌丛，属于条件致病菌；Hp感染者常无消化道症状；无Hp感染者，亦有消化不良症状者。有报道，非溃疡性消化不良无需抗幽门螺杆菌治疗，仅须服用制酸剂和法莫替丁，其胃部疼痛、气胀和灼热感等症状均可缓解，以减少抗药性Hp菌株发生。

4.5 Hp治疗标准

①Hp根治标准 Hp转阴，停药后一个月仍然阴性者。②Hp转阴性标准粘膜活检培养、涂片，组织切片和尿素酶试验等均阴性。以培养为金标准，¹³C或¹⁴C尿素呼吸试验系非侵入法，是诊断Hp感染和判断疗效的可靠依据。

4.6 治疗方案

①单一疗法 单用H₂受体拮抗剂或质子泵抑制剂或抗生素类中一味药物，治疗胃十二指肠疾患。吴晶新等分别用善胃得，国产雷尼替丁、西米替丁、Ome治疗消化性溃疡，结果比较，善胃得治疗2周有效率为81.8%，4周为100%（愈合率93.94%）未发生任何副作用，明显高于其它二味H₂受体拮抗剂，与Ome相似，解除疼痛作用平均消失日为5d，优于其它，与 Ome相同；缓解反酸、腹胀、呕吐等症状，2周内达100%，居首位。在用Lan及法莫替丁（Fam）治疗胃溃疡比较中发现，Lan使组织碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）水平增加2.2～2.6倍，再生粘膜成熟度高，溃疡愈合速度快，应用超声内镜（EUS）观察，4周后溃疡愈合率为80%，8周后为100%，均明显优于Fam治疗。在用潘妥拉唑与Ome治疗急性胃溃疡比较中，发现，4周后溃疡完全愈合的分别为88%，77%，8周后为97%，96%，2周后疼痛缓解率为分别为79%，68%，4周后为88%，81%；其它胃肠道症状均有显著改善，仅10%有副反应发生。用罗沙替丁与雷尼替丁治疗十二指肠溃疡的比较中，发现，4周后溃疡愈合率分别为73.6%,72.2% （P=NS），8周后为92%，83.3%（P＜0.05）。②二联疗法：两种药物联合应用，质子泵抑制或H₂受体拮抗剂或铋剂加抗生素治疗胃、十二指肠疾患。英国Logan等用Ome加甲基红霉素治疗Hp感染的十二指肠溃疡，Hp根除率为83%，2周后溃疡愈合率为83%，4周后为100%，12个月后复发率为6%。丁士刚等用三钾枸橼络合铋（TDB）0.24g,2次/d，4周加呋喃唑酮0.1g，3次/d。2周治疗胃、十二指肠疾患者（n=37），Hp根除率81.1%，症状消失率89.3%，副作用发生率为8.1%。德国Jaspersen等用Ome20mg，2次/d。Amo750mg，3次/d。治疗消化性溃疡出血患者（n=33），治疗2周后，4周检查发现溃疡愈合，1年随访4例携带耐药菌株者2人复发出血，1例重新感染，并认为该治疗方案为消化性溃疡出血首选方案。③三联疗法 三种药物联合应用，H₂受体拮抗剂或质子泵抑制剂或铋剂加两种抗生素治疗胃、十二指肠疾患。有“老三联”和“新三联”之分，前者系铋加两种抗生素，特点：疗程稍长，有一些副作用，但价格便宜，溃疡愈合率、Hp根除率均在80%以上；后者系质子泵抑制剂加两种抗生素，特点：疗程短，用药剂量大，价格昂贵，用药1周，Hp根治后溃疡自然愈合。Jaup等用Ome20mg，甲基红霉素250mg，替硝唑 (tinidazole)500mg，2次/d，治疗1周结果Hp根除率为93%，溃疡愈合率100%，症状缓解率80%，不良反应发生率10%。胡品津等用善胃得（150mg2次/d）、Amo(500mg3次/d)、甲硝唑（400mg,3次/d）合用治疗Hp感染的十二指肠溃疡患者（n=54），疗程2周，后继用善胃得治疗2周，结果Hp根除率为88.2%，溃疡愈合率为88.2%，Hp根除者溃疡愈合率为95.6%，未根除者为33.3%。有人等用TDB（0.24g,3次/d.4周）、Amo0.5g,3次/d.2周）甲硝唑（0.2g,3次/d.2周）合用治疗Hp感染的胃、十二指肠疾患者（n=16），结果Hp根除率为86.7%，胃窦粘膜活动性炎症消失率为80%，有1例因副作用停药（发生率为6.3%）。④四联疗法 四种药物合用，“旧三联”加Ome，治疗胃、十二指肠疾患。Boer等用二柠檬酸象征铋酸三钾（120mg,4次/d）、四环素（500mg,4次/d）、甲硝唑（500mg,3次/d）合并Ome（220mg,2次/d）治疗Hp感染的消化性溃疡，总Hp清除率为90.7%，溃疡愈合率为98.1%，视为最佳疗法。

4.7 中医药研究

①病因病机辨证分型 中医认为Hp感染系“邪气”侵袭人体，所致的胃十二指肠疾患。病机多系虚实夹杂，虚以脾胃气虚为主，实多为湿热内蕴、脾胃不和、气滞血瘀。张琳经对慢性胃病患Hp检测（n=207），发现实证者Hp检出率达100%，虚实夹杂为84.6%，虚证为76.6%（P＜0.05）。Hp感染率从辩证分型上比较，依次为脾胃湿热型最高、中气虚滞型次之，再其次为瘀阴胃络型，肝胃不和型、胃阴不足型。舌象上，夏军权对十二指肠疾患者进行观察（n=408）发现，舌质红或暗，舌苔黄或腻者，内镜显示胃粘膜炎症重、Hp感染率高；舌质转为淡红，舌苔薄白时，系病势趋愈。②中医药治疗 有单用中药、复方中药和中药与西药合用治疗；法则有祛邪法，扶正祛邪法等。常用抑制Hp的中药有：大黄、黄连、黄芩、黄柏、黄芪、三七、乌梅、丹参、玄胡索、厚朴、槟榔、鸭胆子、蒲公英、甘草、桂枝、白芍、干姜、党参、连翘等。王氏自拟蒲芪甘草汤（蒲公45g，黄芪30g，甘草15g）加减治疗胃十二指肠疾患者（n=65例）结果治愈率为72.3%，有效率为23%，无效率为4.6%，总有效率为95.3%，3～7剂即可止痛，治愈剂数最多为30剂，最少为10剂，平均16剂。凌发连以西药硫糖铝合黄芪建中汤合良附丸为主方治疗消化性溃疡（n=12），结果，治疗4周后治愈率为67%，好转率为27%，无效为6%，总有效率为94%，优于单用西米替丁治疗。巴雅尔图以大柴胡汤加减治疗十二指肠球部溃疡34例患者，总有效率为94.1%，优于西米替丁治疗。柴可夫等用半夏泻心汤治疗Hp相关性胃炎（n=72），总有效率为93%，高于FZ治疗（68%，P＜0.05）。罗振松用四逆散加味治疗消化性溃疡（n=100）患者，总有效率达96%。郭希仁用自拟“连芨汤”（黄连8g，白芨30g，海螺蛸20g，三七5g，珍珠层粉15g（冲）、甘草5g）加减治疗消化性溃n=100）患者，总有效率为98.5%，优于单用雷尼替丁治疗。宋希仁等用大黄醇提片治疗Hp相关性胃炎（n=73）患者，Hp清除率为92.4%优于FZ治疗（75%，P＜0.05）。袁佩英以鸭胆子乳剂治疗Hp感染性胃病（n=91）患者，Hp阴转率为49.5%，优于西米替丁治疗（45%）。

幽门螺杆菌酶类对胃粘液屏障的破坏

幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素之一。有关Hp的致病机理，学者们从不同角度提出两种不同假说，一是胃泌素相关（gastrin-link）假说，即Hp感染—胃泌素释放增多—胃酶增高—胃十二指肠粘膜损伤；一种是漏屋（leking roof）假说，即Hp损伤胃十二指肠的粘液屏障和粘膜屏障，使粘膜易受H⁺等攻击因子的损伤。本文仅就Hp产生的酶类对粘液屏障的破坏作用，以及某些抗溃疡药物对这些酶的影响作一综述。

1 胃粘液屏障

胃粘液屏障系一层连续分布于胃粘膜表面不溶于水的凝胶样粘液。正常人胃窦部该层的厚度为50μm～450μm，中位数值180μm，由蛋白质（占70%）、碳水化合物（占14%）、脂质（占16%）等组成。其中粘蛋白占粘液层干重的30%-40%。粘蛋白含70%～80%的碳水化合物（糖链）、20%～30%的核心蛋白和0.3%～0.4%的共价结合的脂肪酸。核心蛋白的肽链有糖基化及非糖基化部位，非糖基化部位易受蛋白酶作用而使粘蛋白裂解。

胃粘液层的空间结构尚未完全阐明。已知粘蛋白是由4个Mr500的糖蛋白亚单位，籍二硫键与连接蛋白(linking protein)相连组成的分子量为2×10⁶的多聚体。多个的粘蛋白多聚体掺入脂质形成球形或椭圆形的微胶粒。微胶粒相互作用形成具有弹性、疏水性和抗蛋白水解性的粘液层。过去认为胃粘液层的结构主要是粘蛋白的结构，近十年来逐步认识到胃粘液层中的脂类，尤其是磷脂在胃粘液层中的作用类似于肺表面活性物质中的磷脂，其分子在粘液层中呈疏水端向外的线状排列，形成疏水层，阻H+逆弥散。Slomiany等也指出，脂质可增强胃粘液层拮抗H+的渗透，其中以磷脂作用最强。并认为磷脂是与核心蛋白非糖基化部位相结合的，而糖脂的中性脂则似结合于粘蛋白的外周部位，形成粘蛋白与脂质等相结合的动态粘液层。

2Hp酶类对胃粘液屏障的破坏作用

2.1 尿素酶

尿素酶是Hp产生的最重要的酶类之一，可分解尿素生成氨和二氧化碳，使局部pH升高，不但籍以维持生存所需的外部环境，也为产生的其他酶提供合适的氨环境。氨还有破坏胃粘膜屏障的作用。Triebling观察到慢性肾衰且Hp阳性病人的胃炎程度与胃液内氨浓度相关。Sidebotham认为氨可加速粘液细胞内储存的粘液向细胞外转运，这些不能与脂质结合成微胶粒的粘蛋白所组成的粘液层结构疏松，屏障功能弱。此外，实验表明，与粘液屏障作用密切相关的粘蛋白与脂质形成的微胶粒结构，不能被尿素酶或蛋白酶解体，但在pH9左右的碱性环境下则解体；尿素酶加2M尿素，或1M碳酸氨，或40mmol/L碳酸盐—碳酸氢盐缓冲液（pH8.7）均可使粘蛋白微胶粒解体，释出Mr6000000的粘蛋白多聚体。Hp产生的尿素酶分解尿素产生的氨，加上局部固有的碳酸氢盐，可在粘膜表面形成25～50mmol/L碳酸盐—碳酸氢盐缓冲液（pH9），足以使粘液层中微胶粒解体而降低其屏障作用。2.2 磷脂酶A2

Langton等报道，Hp感染者胃液中磷脂酶A2（PLA2）活性显著高于Hp阴性者，PLA2作用的最适pH为7.4，pH4.0时活性降低60%，pH2.0时活性全部丧失，扫描电镜发现，Hp感染者胃粘液层中磷脂结构破坏和减少。Hp感染胃炎病人胃粘膜表面疏水性降低，用铋剂和抗生素根除Hp后其疏水性恢复正常。以上事实表明，Hp产生PLA2，后者在适宜pH破坏粘液层中的磷脂，降低粘液层的疏水性。此外，亦有实验表明，PLA2可使粘液层中的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺转变为溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺，而10mmol/L溶血磷脂酰胆碱可使粘蛋白粘度下降74%，粘蛋白抗H+弥散能力下降12%，胃蛋白酶对粘蛋白的裂解效应增加75%。同时，部分溶血磷脂酰胆碱经乙酰转移酶作用可生成血小板激活因子，后者是致胃粘膜损伤的炎性介质，因此，Hp产生的PLA2对粘液屏障的破坏具有重要作用。

2.3 脂肪酶

Hp可产生脂肪酶，其最适pH为7.2，最适温度为37°C。将其与大鼠粘液中性脂肪共同孵育后，甘油一酯与甘油二酯增加2.8倍，而胆固醇酯含量不变。表明该酶亦参与胃粘液层脂质结构的变化。

2.4 蛋白酶

Sidebotham报道Hp滤液与白蛋白共同孵育后未见蛋白裂解，因此认为Hp不产生蛋白酶。但Sarosiek等将Hp过滤液与猪胃粘液制备的粘蛋白多聚体共同孵育12h和48h后，粘蛋白的粘度分别下降15%和31%，并且释出Mr500的粘蛋白亚单位。这种粘蛋白亚单位与Mr6000000的粘蛋白多聚体相比，各糖基比例未变，而蛋白质却减少了22%，表明Hp滤液中含有蛋白酶，并能分解蛋白质，使粘液层中粘蛋白多聚体解体

破坏粘液屏障结构。该酶作用的最适pH为7.0，pH3.0时活性降低60%，pH8时活性降低45%。

2.5 糖基硫酸酯酶（glycosulfatase）

Hp可产生糖基硫酸酯酶，该酶的利于Hp定植于上皮细胞表面。胃粘膜上皮细胞膜糖蛋白和糖脂中的唾液酸和含硫酸酯的糖基被视为Hp的受体，Hp能通过其血凝素与这类结构结合而粘附于细胞表面，胃粘液层中有大量含硫酸酯的糖蛋白（粘蛋白）和糖脂，可竞争性地干扰Hp与细胞膜的粘附，Hp的糖基硫酸酯酶（分子量30，在三硝基甲苯—X100及CaCl2存在时最适pH为5.7）可移除粘液层中糖脂和粘蛋白分子中N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖及葡萄糖C-6位置上的硫酸酯，但不能移除细胞膜糖脂中糖基（如半乳糖苷神经酰胺和乳糖苷神经酰胺）上的硫酸酯，因其硫酸酯 C-3位置上。因此，Hp可通过该酶移去粘液层中粘蛋白和糖脂结构中的硫酸酯，不但破坏了粘液层的有机结构，也失去了对其粘附细胞的干扰作用，从而得以定值于上皮细胞膜上。

3 抗溃疡药物对Hp酶类的影响

3.1 胶体次枸橼酸铋（SCB）

Goggin等报道，胃窦部粘膜表面的疏水性与Hp感染程度和组织学炎症程度呈负相关；与SCB的使用呈正相关。以生理盐水微滴与胃粘膜表面形成的接触角(contactangle)代表胃粘膜的疏水性，Hp阳性消化性溃疡病人用SBC治疗后胃粘膜疏水性显着增强，接触角56.8°±1.2°升至60.0°±1.9°(P＜0.05)；SBC与抗生素联合应用，可使接触角从56.1°±1.2°升至67.8°±1.7°(P＜0.01)，而用雷尼替丁治疗者的接触角与治疗前无差异。铋剂治疗消化性溃疡的作用是多方面的，但对Hp 酶类而言，它可抑制Hp的蛋白酶、PLA2和脂肪酶活性。在SBC深度为100mg/L时使蛋白酶裂解解粘蛋白的活力降低37%，在150mg/L浓度时使脂肪酶和PLA2活性分别下降21%和60%，而一般治疗SBC抑制蛋白酶水解蛋白质的作用是作用于酶底物，将SBC与蛋白酶孵育30min的加入粘液，粘蛋白的裂解度仅轻度下降，若先加粘液30min后再加入蛋白酶，则粘蛋白的裂解度显著降低。SBC对PLA2的作用则在于抑制酶本身，它竞争Ca2+与PLA2的结合点，在Ca2+浓度增加时SBC对PLA2抑制作用减弱。

3.2 硫糖铝

硫糖铝对Hp的多种酶有抑制作用。在90mg/L浓度时使蛋白酶活性降低32.5%；200mg/L浓度时脂肪酶和PLA2活性分别降低35.5%及48%。120mg/L浓度时糖基硫酸酯酶活性降低78%。硫糖铝可降低十二脂肠球部溃疡病人的Hp密度并阻止其粘附于上皮细胞，可能与其对上述酶的抑制作用有关。

3.3Ebrotidine（新的H2受体阻断剂）

不但可抑制泌酸，还可增加胃粘膜血流量和前列腺素产生，从而兼有粘膜保护作用。它也可抑制Hp的蛋白酶、PLA2和脂肪酶活性，在ebrotidine的35mg/L浓度蛋白酶的作用降低57%，在60mg/L浓度时可使PLA2和脂肪酶活性分别降低96%和93%。Ebrotidine对蛋白酶作用的抑制是抑制酶本身，而非作用于酶底物，因将其与蛋白酶孵育60min后加入粘液，裂解蛋白的能力下降69%，而先与粘液作用后再加入蛋白酶，则蛋白的裂解仅下降20%。

3.4 其它

Sofalcone（槐定的类似物，粘膜保护剂）有抑制Hp脂肪酶活性的作用，200mg/L浓度时抑制作用最大，为43%，但对蛋白酶及PLA2影响甚微。由于中性脂在胃粘液层中的屏障作用低于磷脂、糖脂及粘蛋白，故Sofalcone在抑制酶抗溃疡药效中所起的作用有限capone（非抗泌酶的抗溃疡药）也可抑制Hp糖基硫酸酯酶，在100mg/L浓度时，可使该酶活性降低61%。

4 其他

Hp也可分泌过氧化氢酶及磷脂酶C，前者可清除Hp生存环境中的过氧化物，使Hp免受杀伤，但并不直接参与对粘液层结构的破坏，后者水解磷脂Sn—3位置上的磷酸集团，使其成为乙酰基甘油，这可能影响上皮细胞膜及粘液层结构的完整性，但目前尚无确切依据。

幽门螺杆菌感染致胃酸分泌增加的机理

自1983年Warren和Marshall从胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp），并认为Hp与慢性胃炎和消化性溃疡有密切关系以来，经典的“无酸无溃疡”受到“无Hp无溃疡“的严峻挑战。随着对Hp致病机理的深入研究，逐渐形成了以胃粘膜屏障受损为主的“屋漏学说”和以胃泌素释放增多，继而刺激胃酸分泌增加的“胃泌素相关学说”两种不同的观点；然而，近年来的研究结果表明，Hp感染可通过多种不同途径对胃酸分泌造成影响，作者就此内容作一综述。

1Hp感染对胃酸分泌的影响

有关Hp感染对胃酸分泌的影响已有大量报道，结果显示pH感染的十二指肠溃疡（duodenal ulcer,DU）患者胃内24hpH值显着低于Hp阳性的慢性胃炎患者和Hp阴性的健康者，而且，在溃疡治愈和Hp根治后的一段时期内，其胃内24h的酸度仍趋于升高。对胃酸分泌功能测定的结果表明，Hp阳性健康者的基础酸量（basic acid output,BAO）仅轻度增加，Hp根治1月后即可降至正常；而Hp阳性DU患者的BAO则显着增加，达Hp阴性健康者的约3倍，Hp根治1月后，其BAO仅降低约50%，1a后才恢复正常。外源性胃泌素（G-17）和五肽胃泌素刺激的最大酸量（maximum acid output,MAO）在Hp阳性和阴性的健康者之间无显著差异，但DU患者的却显著增加，且Hp根治1年后，其MAO也未显著减少。

Elomer等通过可促进胃窦胃泌素释放和胃酸分泌的胃泌素释放多肽（gastrin-reliasingpeptide,GRP）静脉注射后发现，Hp阳性健康者的胃酸分泌量较Hp阴性健康者的增加了近3倍，而DU患者则增加了6倍之多。Hp根治1月后，Hp阳性健康者对GRP的泌酸反应恢复正常，而DU患者则1年后才降至正常。

2Hp感染对胃泌素影响

许多研究结果表明，Hp感染可增加健康者和DU患者基础和餐后刺激的血浆胃泌素浓度，此高胃泌素血症是由于血浆中选择性地增加了具有生物活性的胃泌素-17[G-17]的含量所致。静脉注射GRP后，Hp阳性健康者与DU患者血浆胃泌素升高的浓度相似，都显着地高于Hp阴性健康者。Hp根治后1个月，Hp阳性健康者和DU患者基础的和餐后刺激的血浆胃泌素浓度以及对GRP的反应都是显着降低，与Hp阴性健康者无差异。

2.1 胃泌素释放增加的病理机制

虽然由Hp的尿素酶所产生的氨可通过升高胃粘液中的pH值而影响胃泌素的释放，但静脉注射或饲以尿素并不能增加血浆胃泌素的水平，提示氨并不是引起高胃泌素血症的主要因素。研究表明，Hp感染时胃窦粘膜中生长抑素的含量减少甚至缺乏，而Hp根治后的DU患者，胃窦粘膜中合成生长抑素的mRNA水平和D细胞的密度均较根治前显著增加等实验结果提示，Hp感染可通过减少胃窦粘膜中生长抑素的含量而引起胃泌素的过量分泌。Sumii等测试了Hp阳性健康者胃窦粘膜中胃泌素和生长抑素的含量，合成这些多肽的mRNA以及G细胞的D细胞的密度后发现，Hp感染时，胃窦粘膜中胃泌素的含量，mRNA的水平的G细胞的密度均无显著变化，但生长抑素的含量，mRNA的水平和D细胞的密度以及反映单个D细胞合成生长抑素状态的mRNA与D细胞密度的比值都显著下降，从而说明Hp感染不仅可减少D细胞的密度，而且，可通过对基因表达和转录的抑制减少D细胞合成生长抑素。因此，Hp感染所致的高胃泌素血症并不是由于G细胞本身合成和分泌胃泌素的功能旺盛，而是因为D细胞合成和分泌生长抑素减少致G细胞的旁分泌抑制作用减弱所致。

2.2 高胃泌素血症对胃酸分泌的影响

BAO的增加显然与基础血浆胃泌素的浓度升高有关，但尚不能完全解释DU患者BAO的显著增加，这是因为：①尽管血浆胃泌素的浓度相似，但Hp阳性DU患者的BAO却较Hp阴性健康者的显著增加。②Hp根治1月后，显然DU患者的血浆胃泌素浓度已降至正常，但BAO仍较高。③Hp根治1年后，DU患者的血浆胃泌素浓度并未进一步降低，但BAO却可恢复正常状态。同样，Hp阳性的DU患者对GRP刺激的高胃泌素血症也只能部分地解释其泌酸反应的增强：虽然GRP刺激的胃泌素释放反应与Hp阳性健康者相似，但其对GRP刺激的泌酸反应却只是DU患者的一半。Hp根治1月后由GRP刺激的胃泌素释放反应已经正常，但泌酸反应是正常组织的2倍；虽然刺激胃泌素的释放反应在Hp根治1年后并未进一步减弱，但对GRP刺激的泌酸反应却是恢复正常。胃泌素对胃肠道的粘膜和平滑肌具有广泛的生物作用，其中最重要的两种作用是刺激胃酸的分泌和调节泌酸区胃粘膜的生长，所以，慢性Hp感染所致高胃泌素血症对泌酸区胃粘膜较长时期的营养支持作用，可使其中的壁细胞总数大量增加，从而，即使Hp根治后血浆胃泌素浓度降至正常，但已增加的壁细胞还可维持一段较长时期的泌酸功能旺盛状态，尤其是对外源性胃泌素所刺激的MAO，需要较长的时间方可恢复正常。

3 组胺对胃酸分泌的影响

位于泌酸区胃粘膜中的肠嗜铬样细胞和肥大细胞等分泌的组胺是另一种强效的胃酸分泌刺激剂，Aceti等发现Hp感染可通过IgE介导的变态反应引起嗜碱细胞分泌组胺；Queiroz等检测了Hp阳性的儿童和成人泌酸区胃粘膜中组胺的含量，结果提示，Hp感染者胃粘膜中组胺的含量较Hp阴性者显着降低，而且，Hp根治后，其含量又可恢复正常Hp感染可导致胃粘膜中组胺贮存的异常，也即释放增多，继而刺激胃酸过量分泌。但Couriuon-Mallet等发现，在Hp阳性患者的胃底和胃窦粘膜中，除组胺的含量较Hp阴性者显着降低外，合成组氨的组氨酸脱羧酶（histidinedecarboxylase,HDC）的活力也显著下降，且Hp根治后，HDC的活力又可恢复正常。因此，Hp感染所致胃粘膜中组胺含量的降低并不是由于组胺的释放过多，而是因为合成减少所致。所以胃粘膜中组胺含量的变化并未参与增加胃酸分泌的病理机制；相反，在一定程度上导致了胃酸分泌功能的下降。

4 N[SB]a[/SB]-MeHA参与的相关机制

在人的胃粘膜中，组胺的主要代谢产物是无生物活性的N^c-甲基组胺，而其侧链甲基化所形成的次要代谢产物N²-甲基组胺（N^a-methyl histamine,n^a-MeHA）是一种能调节胃酸分泌和生长抑素及组胺合成的强效组胺H₃受体兴奋剂。正常情况下，胃粘膜中n^a-MeHA的含量非常低，通常难以检测。Couriuon-Mallet等测定了胃粘膜组织中和Hp培养的菌株的菌株中n^a-MeHA的含量和催化组胺生成n^a-MeHA的n^a-组胺甲基转移酶（Na-histamin^emetyhltran sferase,Na-HMT）的活力后发现，Hp阳性患者的胃窦粘膜中均有一定的na-MeHA含量和n^a-HMT活力；但Hp阴性者的n^a-MeHA含量和n^a-HMT活力却非常低，难以检出；对泌酸区胃粘膜组织的检测也得出类似结果。Hp根治后，胃粘膜中n^a-MeHA含量和n^a-HMT活力则显著下降，难以检测。而从Hp培养的菌株中则可检出高含量的n^a-MeHA和高活力的n^a-HMT，故认为Hp是胃粘膜中n^a-MeHA的主要来源。由于n^a-MeHA是较组胺更有效的泌酸刺激剂，所以，由Hp产生的n^a-MeHA参与了导致胃酸分泌增加的病理机制。

除此之外，n^a-MeHA还可通过组胺H₃受体抑制D细胞释放生长抑素和抑制胃底粘膜细胞中HDC的活力，继而减少组胺的合成。所以，Hp阳性患者胃粘膜中n^a-MeHA含量增加之结果表明，胃粘膜中生长抑素和组胺含量的减少均与此有关。

5．2 幽门螺杆菌与慢性胃炎及消化性溃疡的关系研究

胃粘膜幽门螺杆菌感染与慢性胃病的关系

自1983年Warren等首先从人类胃粘膜分离出弯曲菌样细菌(Campylobacter-like Organism,Hp或称幽门弯曲菌)(Campylobacterpylori,CP) ，1990上后改名幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)。以下简称（Hp）。不少作者进行了慢性胃炎或消化性溃疡与Hp关系的研究，我院从1986年11月至1987年4月对210例慢性胃病的胃粘膜进行弯曲菌样细菌培养分离，现报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

本组210例中，男157例，女53例，男女之比为3:1。年龄18岁～85岁，平均44岁。慢性胃炎136例，消化性溃疡66例，食管、胃癌8例，均由纤维胃镜和胃粘膜病理得到确诊。

1.2 方法

临床有上消化道症状进行纤维胃镜检查时，除了常规胃粘膜作病理论断外，另取胃窦中部小弯侧或/和胃体下部小弯侧粘膜各一块作Hp培养。活检取出的组织块用灭菌针挑至滴有运送液（2份生理盐水和1份50%右旋糖酐）的消毒平板上。1h内送检。病人于检查前3d停服抗生素和抗溃疡药物。用Olympus GIF-QW或K₂型纤维胃镜检查，胃镜用洗必太消毒，活检钳浸泡后冲洗干净。胃粘膜组织块用灭菌生理盐水冼净后研碎，划线接种于新配有二性霉素，TMP（5mg/L），万古霉素（3mg/L）的7%兔血脑心汤琼脂平板上，置微需氧环境下37°C培养3d～5d，进行形态、菌落观察和弯曲菌样细菌的生物学鉴定。

2 结果

慢性胃病210例的胃粘膜培养出Hp者90例，阳检率42.9%。其中胃窦粘膜阳性37例，胃体粘膜阳性22例，窦、体粘膜均阳性者31例。男性阳检率44.7%（73/157例），女性32.1例(25/53例)，两者差异无显著意义（P＞0.05）。慢性胃炎，消化性溃疡和食管、胃癌的Hp检出情况见表1。

表1 慢性胃病210例胃粘膜Hp阳性情况

各病种和各型胃炎间差异无显著性。慢性浅表性胃炎（66例）和慢性浅表—萎缩性胃炎（53例）的胃粘膜炎症活动性者41例，Hp阳性21例，阳检率51.2%，而非活动性者阳检率30.8%(24/78)例，两者差异有显著意义（P<0.05）。上述各种胃病伴有胃腺体萎缩者，其萎缩程度与Hp阳性与否无显著关系，胃粘膜不典型增生或/和肠腺化生之有无与Hp阳性亦无明显关系；消化性溃疡活动期或愈合，疤痕期的Hp阳检率亦无明显差异（表2）。

表2 胃粘膜病变情况与Hp阳性关系

^bP<0.05vs非活动性。

本组210例中取出胃体、胃窦粘膜各一块者148例，仅取胃窦粘膜者62例，共有粘膜358块。其中胃窦210块，阳性68块，阳检率32.4%；胃体148块，阳性53块，阳检率35.8%。两者差异无显著意义。

3 讨论

胃镜取胃粘膜培养Hp的阳检率为40%，58%。胃或球部溃疡为87%～88%。Kasper等在胃炎或消化性溃疡病人胃窦粘膜培养Hp的阳性率为39%。本组慢性胃病阳性率为42.87%，其中球部溃疡阳性率为56%。本组胃炎活动者Hp阳性率（51.2%）高于非活动者，提示胃炎活动与Hp有一定关系；而胃粘膜萎缩程度，不典型增生或肠化生与Hp阳性无明显关系。Warren等在Hp阳性病例中，有90%组织学证明为活动性胃炎，因而认为Hp存在与胃炎的严重程度有关。

关于胃内不同部位粘膜培养Hp阳性问题Rollason等对310份标本进行比较，窦部阳性率（54%）高于贲门部（9%）。本组胃窦与胃体的Hp阳性率无明显差异，可能是取材距离较近的缘故。但90例Hp阳性中，胃窦、胃体均阳性31例，胃体阳性22例，胃窦阳性37例，故取胃体、胃窦粘膜各一块进行培养，可提高Hp的阳性率。Hp在慢性胃炎，消化性溃疡等慢性胃病的高检出率，提示其发病也可能与Hp感染有关。

幽门螺杆菌阳性慢性胃炎的临床病理特征

近年来，国内外学者对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）与上胃肠疾病之间的关系进行了大量研究，确定了Hp是非自身免疫性（B型）慢性胃炎的重要病因。然而，对Hp相关性胃炎的临床和病理特征尚缺乏系统性研究。本研究旨在通过对Hp阳性和阴性两组慢性胃炎病人的多方面对比研究，以阐明Hp相关性慢性胃炎的临床和病理特点。

1 对象和方法

1.1 对象

全部病例均经胃镜及胃粘膜活组织检查证实为慢性胃炎。诊断标准符合1982年重庆会议制定的“慢性胃炎的胃镜诊断标准试行方案”。慢性浅表及萎缩性胃炎共173例，均系1990—04~1991—04间因消化不良症状持续4周以上而进行内镜检查的病人。其中有Hp定居（Hp阳性）者99例，男57例，女42例，平均年龄46岁；无Hp定居（Hp阴性）者74例，男51例，女23例，平均年龄45岁。

1.2 方法

①组织炎症的判断：活检标本用10%甲醛溶液固定。切片用苏木精的伊红染色。胃炎的组织学分级系根据单个核细胞（慢性胃炎）和多形核白细胞（活动性胃炎）的存在情况判断，分别分为0级、1级、2级和3级。②微生物学：组织切片检查Hp采用Warhtin-Starry银染色。分级细菌培养将胃粘膜活组织研碎，2h内接种在加有万古霉素、二性霉素和甲氧苄氨嘧啶的血琼脂培养基上，在37°C和微需氧条件下培养4d~7d。如7d后培养基上仍无细菌生长，则认为阴性。胃粘膜活组织尿素酶试验阴性认为无Hp定居。上述三项检查至少两项阳性，才认为有Hp定居。上述三项检查均为阴性，方判断为无Hp定居。③血清胃泌素测定：采用放射免疫双抗体法。药盒由中国科学院原子能研究所提供，合成人胃泌素以[125]I标记。反应物在4°C静置24h后离心20min（3000r/min）弃上清液沉淀物，以ng/L表示。④胃内酸度测定：应用五肽胃泌素法。分别测定基础胃酸排出量（BAO），最大胃酸排出量（MAO）和高峰胃酸排出量（PAO）。均以mmol/h表示。⑤十二指肠胃反流的诊断：采用牛奶Q9MYC—EHIDA试验。根据胃区有无放射性出现，确定为有或无十二指肠胃反流；并根据胃区影像，将十二指肠胃反流分为Ⅰ°、Ⅱ°和Ⅲ°。

统计学分析 两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较采用方差分析，样本率的比较采用X2检验。P<0.05被认为差异有显著性。

2 结果

表1 Hp+组与Hp－组的临床症状比较

各种消化不良症状的发生率在Hp阳性与Hp阴性两组病人之间差异均无显著性（表1）。血清基础胃泌素及胃内酸度测定检查结果见表2

表2 血清基础胃泌素及胃内酸度（x±s）

Hp阳性组的胆汁反流率为39.1%（18/46），Hp阴性组为48.5%(16/33)，两组差异无显著性（P<0.05）；Hp阳性组的Ⅱ°、Ⅲ°反流率为19.6%(9/46), Hp阴性组中度以上反流率倾向低于Hp阴性组,但其差异无统计学意义(P=0.09,0.1＞P＞0.05)。

两组组织病理学特点存在明显不同。Hp阳性组重度慢性炎和活动性炎明显增多，腺体萎缩和肠化生也明显多见（表3）。随着慢性炎症程度的加重Hp阳性率也逐渐增高，即轻度炎症Hp感染率为10.0%（4/40），中度为62.7%（47/75），重度为82.8%(48/58)；活动性炎的Hp阳性率达91.2%（62/68）。表4显示，随着Hp密度的增加，重度活动性炎明显增多(0.01＜P＜0.05）重度慢性炎也有增多趋势，但差异无显著性（0.1＞P＞0.05，表4）。

表3 Hp阳性组与Hp阴性组的组织病理学比较

^bP<0.01vsHp阳性。

表4 Hp密度与重度炎症的关系

3 讨论

Hp相关性慢性胃炎能否引起消化不良症状，人们一直存在着不同的看法，有的学者提出可以引起消化不良症状，但也有人对此表示怀疑。本研究结果显示，Hp相关性慢性胃炎的消化不良症状并无特异性，与Hp阴性胃炎完全相同。为了进一步弄清Hp与消化不良症状的关系，我们应用胶体次枸橼酸铋（CBS，得乐冲剂，丽珠制药厂生产）对49例Hp相关性慢性胃炎进行了治疗。结果显示，40例Hp得到清除，但其中5例消化不良症状无任何改善。而Hp未被清除的9例，症状均缓解。CBS的治疗效果也说明Hp与消化不良症状无明显关系。

本研究结果表明，Hp阳性慢性胃炎病人和阴性病人的血清基础胃泌素水平及BAO，MAO，PAO差异均无显著性。与以前的研究不同。这表明在十二指肠溃疡病时Hp可以引起胃酸过多，并可能引起血清基础胃泌素增高，而在慢性胃炎时则否。可能是Hp对不同疾病产生不同影响的结果。

已经证明，胆汁无论是在活体外和活体内对Hp均有杀菌效应。本研究结果显示，Hp阳性与阴性慢性胃炎的胆汁反流发生率无显著不同，但如将Ⅱ°、Ⅲ°反流率合并进行比较（Hp阳性病人为19.6%,Hp阴性病人为36.4%），虽差异无显著性，但P值=0.09，从而表明Hp阳性率较少，显示高浓度胆汁对Hp有一定杀菌作用的结果

本研究结果表明，Hp感染在Hp相关性胃炎，重度慢性炎症及活动性炎症较多见，而且炎性浸润，特别是多形核细胞的浸润程度与细菌数量有密切关系，即菌量愈多，多形核细胞浸润愈明显。这一研究结果与文献报道相一致。我们应用CBS治疗发现Hp被清除的40例中活动性炎症消除率达89.3%，而Hp未被清除的9例中活动性炎症消除率仅为为33.33%（P<0.01）；慢性炎症的减轻率分别为56.8%与55.6%（P>0.05）。进一步表明Hp感染与多形核细胞浸润的密切关系。此外，本研究结果还显示Hp相关性胃炎时胃粘膜组织的腺体萎缩及肠化生明显增多，与文献报道相似，提示Hp感染使胃粘膜组织的损伤加重。

胃酸和幽门螺杆菌在十二指肠溃疡形成中重要性

长期以来，一直认为酸在十二指肠溃疡形成中占重要位置。近年来，随着Marshall和Warren于1983年对幽门螺杆菌的成功分离，大量研究资料证明该菌与十二指肠溃疡病密切相关。本文旨在通过雷尼替丁和抗菌药物对幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病治疗效果的比较，进一步评估酸和该菌在溃疡形成中的重要性。

1 对象和方法

1.1 对象

经内镜检查确诊为活动性十二指肠溃疡病的门诊病人90例（溃疡直径＞0.3cm），全部合并幽门螺杆菌感染。其中男65例，女25例。年龄20岁～60岁，平均28岁。全部病例均无溃疡病并发症，亦无肝、肾、心、肺等内科疾病，女性病例无妊娠及哺乳。全部病例随机分为下列5个治疗组：①雷尼替丁，150mg清晨和睡前各1次；②庆大霉素，40mg，每日3次；③土霉素500mg，每日3次；④呋喃唑酮，100mg，每日3次；⑤黄连素，300mg，每日3次。均为口服用药。各组病例性别、年龄、病史长短、溃疡大小、疼痛程度及吸烟与否等无显著差异，各组用药均10d为1疗程，中间休息4d共3个疗程，疗程结束后3d内重复内镜及胃粘膜活组织检查，观察幽门螺杆菌清除、溃疡愈合、胃窦炎减轻和胃窦活动性炎症消失情况。

1.2 方法

组织学检查：活检标本用10%甲醛固定。切片用苏木精和伊红染色。胃炎的组织学分级系根据单核细胞（慢性胃炎）和多形核白细胞（活动性胃炎）的存在情况决定。①慢性胃炎：0级，无单核细胞浸润；Ⅰ级，偶见炎性细胞，灶状分布，单核细胞非普遍融合；Ⅱ级，炎性细胞介于Ⅰ级和Ⅲ级之间；Ⅲ级，大量单核细胞浸润，遍布全片，伴淋巴滤泡形成。经治疗后组织学改变自Ⅲ级或Ⅱ级到Ⅰ级，认为炎症减轻。②组织切片检查幽门螺杆菌：采用Wartnin-Starry银染色。分级标准：0级，未见细菌；Ⅰ级，偶见细菌，但非每一高倍视野均能见到；Ⅱ级，细菌数目介于Ⅰ级和Ⅲ级之间；Ⅲ级，所有视野均见大量细菌，通常融合，并覆盖整个粘膜面。③细菌培养：将胃粘膜活组织研碎，于2h内接种于加有万古霉素，二性霉素和甲氧苄氨嘧啶的血琼脂培养基上，在37°C和微需氧条件下培养4d～7d。如7d后培养基上仍无细菌生长，则认为阴性。④尿素酶试验：采用三强生物化工有限公司的尿素酶试剂盒进行检查，阴性者则认为无菌定居。上述3项微生物学检查均为阴性，方判断为幽门螺杆菌被清除。

统计学处理 成对数值用X²检验

2 结果

经短期雷尼替丁和抗菌药物治疗后，各组病人的溃疡均不同程度的愈合，但雷尼替丁组的溃疡愈合率显著高于各个抗菌药物组，而雷尼替丁组的幽门螺杆菌清除、胃窦炎减轻和胃窦活动性炎症消失却大大低于各个抗菌药物组（表1，表2）。

表1 十二指肠溃疡愈合和幽门螺杆菌清除情况

^aP<0.05,^bP<0.005,*与雷尼替丁比较。

表2 胃窦炎症活动性

^bP<0.01，与雷尼替丁比较。

3 讨论

长期以来，认识到酸和胃蛋白酶在十二指肠溃疡的发生上占有重要地位，溃疡的发生被认为是酸和胃蛋白酶消化消化的结果。胃酸和胃蛋白酶分泌增多时胃酸的消化作用增强，从而产生溃疡，其中胃酸分泌增多较胃蛋白酶分泌增多更为重要。这是因为：①胃蛋白酶仅作用于已被酸作用后失去活力的细胞；②胃蛋白酶在酸性胃液中总是存在（而在相反情况下并不如此）；③单独胃蛋白酶分泌增多而没有酸分泌增多并不能形成溃疡，而单独酸分泌增多没有胃蛋白酶分泌增多（如组织胺刺激）可发产生溃疡；④胃蛋白酶仅在酸性介质中才起作用；⑤胃液中酸浓度超过一定水平（约100mmol/L）时，胃蛋白酶活性不能进一步增加，但却能增加致溃疡的效能。我们的研究结果表明，应用组织胺H₂受体阻断药雷尼替丁短期治疗十二指肠溃疡病，溃疡愈合率高达97%。这就进一步证明酸作为一个病因因素的重要性。

近年大量研究资料提示，幽门螺杆菌与十二指肠溃疡病关系密切。一篇综合10篇研究结果的文献报道，十二指肠溃疡病时平均带菌率为86%。我们的研究结果是86.5%。上述数字均是十二指肠溃疡病时胃窦粘膜的带菌率。幽门螺杆菌也可在十二指肠内找到，但仅限于胃型上皮，包括十二指肠内的胃化生灶。我们的观察结果表明，十二指肠内的带菌率是80%。幽门螺杆菌感染与十二指肠溃疡病有如此密切的关系，提示该菌很可能与溃疡的发生有关。

我们的研究结果表明，抗菌药物对寻常的幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病有良好的治疗效果。经短期药物治疗后溃疡愈合（53%～67%），伴随的慢性胃窦炎减轻（67%～73%），胃窦活动性炎症消失（50%～71%）。抗菌药物不仅对寻常的幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病有效，而且已经证明对多种抗菌药物治疗无效的顽固性十二指肠溃疡病亦有良好的效果。我们还证明清除幽门螺杆菌后可以显著降低幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡病的复发率。以上研究结果均强烈提示该菌在十二指肠溃疡的发生上起一定作用。

然而，胃窦粘膜幽门螺杆菌的慢性感染引起十二指肠溃疡形成的机制尚不明确。Wyatt等提出十二指肠溃疡时异常增高的酸分泌可以导致十二指肠内部发生胃化生，幽门螺杆菌得以从胃窦粘膜移居到十二指肠，从而引起十二指肠炎，十二指肠炎单独或与其它因素一起导致十二指肠溃疡形成。Levi等报道幽门螺杆菌阳性病人较阴性病人基础酸排出量和五肽胃泌素刺激后的高峰酸排出量均增高（分别为7.3和5.5mmol/h,44.2和30.7mmol/h），且餐后胃泌素释放亦增加。高胃泌素血症还可直接刺激壁细胞引起胃酸分泌。持续性高胃泌素血症可引起壁细胞增生。壁细胞群的增加也会导致胃酸分泌过多。胃酸分泌过多可使十二指肠内部pH降低，从而发生溃疡。但是这两个学说正确与否有待进一步证实。

本研究显示雷尼替丁并无杀灭幽门螺杆菌的作用，但溃疡愈合率高于任何一组抗菌药物。在溃疡愈合与幽门螺杆菌的清除、胃窦炎的减轻及活动性炎症消失之间的关系通过计数资料相关关系检验，彼此之间无相关关系。雷尼替丁与抗菌药物比较，雷尼替丁组的溃疡愈合率明显高于各抗菌药物组，但幽门螺杆菌的清除率、胃窦炎的好转率及活动性炎症的消失率却明显低于各抗菌药物组，但幽门螺杆菌的清除率、胃窦炎的好转率及活动性炎症的消失率却明显低于各抗菌药物组。从而说明溃疡的愈合不受幽门螺杆菌的影响，且似乎也不一定伴有胃窦炎的减轻和胃窦活动性炎症的消失。本文结果充分表明在十二指肠溃疡的发生上，胃酸比幽门螺杆菌更为重要。

幽门螺杆菌与十二指肠溃疡关系的研究

十二指肠溃疡是一种极为常见的疾病，早已为临床所证实，但其病因学和发病机制至今尚未完全阐明。长期以来，胃酸是溃疡发生的必需条件，一直为我们所接受，“无酸就无溃疡”的理论，在溃疡的发病机理中一直占统治地位。自幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori,Hp）从人的胃粘膜中分离后，胃酸在十二指肠溃疡病发病机理的主导地位受到了挑战。消化性疾病专家提出了“无Hp便无溃疡”的论点。现就本组临床资料并结合文献，浅谈我们的看法。

“无Hp便无溃疡”的倡导者们的依据是：Hp感染在十二指肠溃疡病的检出率高达95%～100%，而且根除Hp后，可以防止溃疡复发。Hp在十二指肠溃疡的发病机理中，占有一定的地位，这是目前一般公认的，但其重要性到底达到了什么样程度？是需要研究和探讨的。

1 临床资料

1991～1995年，我科住院病人中，十二指肠溃疡病88例，Hp感染者82例（92.1%）,无Hp感染者,6例(7.9%),这与国内外报道的十二指肠溃疡病Hp感染率86.5%～100%相近，这样高的Hp检出率说明Hp确与十二指肠溃疡的发生有一定的关系，但是，我院自1991—7～1994—12底，因上腹部症状在我院行胃镜检查者，共4，589人，其中Hp感染者1，932(42.1%)人；在Hp感染中，仅有348（17.4%）例患十二指肠溃疡的，与贾博琦报道相近。这说明，Hp感染的大多数并不发生十二指肠溃疡，二者相互联系的特异性并不紧密，也就是说Hp的存在，并不是十二指肠溃疡发生的必需条件。国外的一篇报道指出，345例有Hp定居而无十二指肠溃疡病的消化不良的人，在3年的内镜和临床随访中，仅有2例发生十二指肠溃疡。我们对86例Hp定居者，在2年的同样随访中，也只有1例发生十二指肠溃疡。这也表明Hp定居者，发生十二指肠溃疡发病率低于一般人口的预期数值。

2 讨论

从治疗的多数报道中看，无论是H₂受体阻滞还是质子泵阻滞剂，十二指肠溃疡的4周愈合率由。70.8%～100%。然而，对Hp清除率的报道却大不一致，雷尼替丁和洛赛克对Hp清除率为3%～88.23%，甚至有些报道认为洛赛克对Hp根本无作用，即使有作用，但与对溃疡的4周愈合率相比，也有显著的差异，更不用说对Hp无效的病组。这表明Hp在溃疡的发生上，不是一个主要的危险因素，胃酸起着更主要的作用。而在目前，尚无Hp致成十二指肠溃疡病直接证据的情况下，过早地肯定Hp是该病的病源菌，甚至得出该病是传染性疾病的结论，值得商榷。十二指肠溃疡的复发是治疗中的重要问题，尽管复发涉及多种因素，但Hp的未根除，在溃疡的复发上，确有很重要的作用。任何单独的抑酸治疗后，溃疡的复发率1a可达85%根除Hp的抗菌药或是铋剂，溃疡的愈合率虽不及抑酸剂，但溃疡的复发率却大大减少。

综上所述，我们认为Hp在十二指肠溃疡的发生上，是一个危险因素，但不是十二指肠溃疡的病源菌，在溃疡的发生上，胃酸的作用比Hp更为重要；但在溃疡的复发上，Hp确实有很重要的作用。

幽门螺杆菌与胃十二指肠疾病的关系

自1983年Warren和Mashall首次从胃粘膜标本中分离培养出幽门弯曲菌（CampylobacterPylori），并提出它可能与慢性胃炎（CG）和溃疡病（PU）病密切相关后，引起了全球关注，也为CGG、GU的病因学研究开创了一条新途征。1990年9月国际微生物联合会鉴定为“幽门螺杆菌”（Helicobacter Pylori, Hp）。我国是慢性胃病多发国家，自1985年张振华首次报告从胃粘膜中检出此菌后，已有不少单位对此进行研究，我院自1988年5月以来开展了此项研究，对325例因上消化道症状行内镜检查者进行研究，旨在从临床分析探讨Hp与慢性胃炎、消化溃疡和胃癌的关系。

1 对象和方法

1.1 对象

具有上消化道症状的325例，男248例，女77例；年龄17岁～75岁，平均年龄43.9岁。根据内镜及组织学诊断，慢性浅表性胃炎（CSG）72例，慢性萎缩性胃炎（CAG）34例，胃溃疡（GU）54例，球部溃疡（DU）108例，胃癌（GC）13例，正常（N）14例。按胃粘膜中是否有中性粒细胞浸润将胃炎分活动性和非活动性胃炎。

1.2 方法

用OlymPus GIF XQ10内镜进行检查,CG,DU,N组取距幽门5cm内的胃窦粘膜，GU取溃疡边缘粘膜，GC取癌组织，各取4～5块，分别作细菌培养、直接涂片、组织切片、HE染色及改良Warthin-Starry染色，部分作扫描电镜观察。将活检标本接种于肉浸液加8%～10%羊血琼脂平板中，于改良厌氧灌（5%O2，7%CO2，80%N2，8%H2，湿度98%）内，37°C，培养3d～5d，见1mm～2mm大小的露滴样、光滑、灰白色、轻度溶血的菌落，菌落涂片镜检，生化鉴定（尿素酶、氧化酶、触酶、马尿酸分解试验等）。7d不见菌落者阴性。Hp阳性标准：培养阳性或尿素酶阳性加直接涂片、改良W-S染色阳性中任一项阳性者。活检标本用10%福乐马林固定、切片厚5μm，常规HE染色，作组织病理学诊断。改良W-S染色，在10×100倍光镜下寻找Hp。供扫描电镜（SEM）观察的标本先用生理盐水轻轻冲洗粘膜面，用2.5%戊二醛固定及1%锇酸固定后，经脱水，临界点干燥、喷金后，在日立S—570型电镜下观察。所有资料按四格表行X2检验，若例数小于40或理论值小于1，则采用确切概率法计算。

2 结果

2.1 各种胃病Hp的检出率

胃粘膜标本分别用4种方法检测，Hp的检出率分别为尿素酶试验69.9%，直接涂片52%，改良W-S75.1%，培养63.1%；以改良W-S法检出率最高，直接涂片法检出率最低；其中直接涂片法与其它三种方法比较，差异有非常显著性（P<0.05）；培养法与改良W-S比较，差异有显著性（表1，P＜0.05）。

Hp的总检出率为70.2%，CSG，CAG，GU，DU的Hp检出率高于N组，差异有非常显著性（P<0.01）；（均P<0.01）；DU检出率高于CAG，CSG，GU组（均P<0.01）；CSG，CAG，GU组间两两比较，Hp检出率无显著差异（表2，P<0.05）。

表1 胃十二指疾病Hp检出率

*表示均伴有慢性胃炎

表2 胃十二指肠疾患Hp检出率

2.2 组织病理学检查

改良W-S染色中Hp存在于胃粘膜表面上皮细胞粘液层间、胃小凹中，菌量多时可在浅层腺体的腔中见到。在浅黄色背景上呈棕色或棕褐色弯曲状、弧形菌。在慢性胃炎中，Hp的存在与炎症的活动性密切相关（表3，表4）。在CSG组57例活动性胃炎，Hp阳性55例；45例非活动性胃炎，17例Hp阳性；二者比较差异有非常显著性（P<0.05）；在CAG组，20例活动性胃炎，19例为Hp阳性，14例非活动性胃炎，5例Hp阳性，二者比较差异显著性（P<0.05）。

表3 慢性浅表胃炎活动性与Hp检出率

表4 慢性萎缩性胃炎活动性与Hp检出率

2.3 SEM观察

对4例慢性胃炎标本进行SEM观察，这4例用上述4种方法均检出Hp。电镜下见Hp呈弧形或“S”形，少数量椭圆形或肾形。约0.5μm×2.5μm大小，菌体光滑，中央部分电子密度低，两端钝圆，有1～5根单极鞭性鞭毛。Hp紧贴胃粘膜上皮细胞。

3 讨论

作者对几种常用方法Hp检出率进行比较，以改良W-S检出率最高，直接涂片法检出率最低，且直接涂片与其它3种方法比较差异显著。细菌培养是鉴定Hp阳性最可靠的方法，但培养需一定条件和技术，影响因素多，阳性率较低，一般单位难以开展。直接涂片可见革兰氏阴性弯曲菌，但受涂片技巧和镜检经验限制，阳性率较低。改良W-S染色是一种检出率高的经典方法，但其操作复杂，耗时耗资。尿素酶试验具有快速、简便、经济、敏感性、特异性较高等优点，易普及推广，但仍有一定假阴性和假阳性。本组Hp总检出率70.2%，以DU的阳性率最高80.7%，GCa和“正常”组检出率低，分别为23.1%、7.1%。GCa组和“正常”组与CSG，CAG，GU，DU组比较，Hp检出率差异有异常显著意义GCa组与正常组比较，差异无显著性；CGS，CAG，GU间两两比较差异无显著性；而DU高于任何一组（P<0.01）。

我们的结果表明，胃粘膜中Hp存在与慢性胃炎和消化性溃疡的发病有关，这与前人报告结果一致。组织病理学发现活动性胃炎中的Hp检出率显著高于非活动性胃炎，虽也有报告未见此种关联。Shousha等用透射电镜观察到，胃粘膜上皮间有中粒细胞浸润，且与Hp混合在一起，一些中性粒细胞可吞噬Hp，提示Hp可能引起炎症。我们用抗Hp药物De-Nol治疗71例慢性胃炎，Hp的清除率87.8%，且随Hp的清除，组织学检查胃炎明显减轻。血清学检查表明抗Hp抗体与慢性胃炎呈正相关。这些都提示Hp可能是慢性胃炎的病因。据报道用雷尼替丁治疗伴Hp感染的球部溃疡，4周后溃疡愈合，但Hp仍存在。用雷尼替丁联合抗生素或De-Nol治疗溃疡，难治性溃疡可治愈，溃疡复发率明显降低。这提示Hp即使对溃疡病无直接致病作用，亦可能与溃疡病顽固不愈及其复发密切相关，可能虽溃疡发生的重要危险因素。

在胃癌组织Hp检出率与正常组织比较差异无显著性，提示此菌与胃癌可能无直接关系，其他作者也有类似报告。Hp作为慢性胃炎和溃疡病的病因，其真正致病机理仍未完全阐明，只是间接证据证明Hp存在于大部分胃炎和溃疡病中，经抗Hp治疗随Hp清除，炎症改善，溃疡复发率降低。但还有部分胃炎、溃疡中并未检出Hp，其他抗溃疡药治疗后虽Hp仍存在，但溃疡可以愈合。因此，还需要进一步建立成功的动物模型来促进研究Hp在慢性胃炎和溃疡病中的确切作用。

幽门螺杆菌与胃疾病关系的研究进展

自从1983年澳大利亚学者Warran和Marshall首先自人胃内分离出幽门螺杆菌（Hp）以来，10余年间有关Hp的研究工作已经在全球范围内逐步普及和深入，并且已经取得了很多可喜的进展，很多概念不断被更新和修正。Hp不仅是人类慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌，而且与非溃疡性消化不良和胃癌的关系亦非常密切。

1Hp与慢性胃炎

Hp研究至今已有足够的证据表明Hp是慢性胃炎的病原菌。①慢性胃炎中的Hp检出率很高（50%～80%），而正常胃粘膜则很少检出Hp（0～6%）慢性活动性胃炎更高，可达90%以上。②胃粘膜上Hp密度与多形核白细胞的浸润呈正比。在无Hp的胃粘膜层看不到多形核白细胞浸润。Hp感染量与胃炎严重程度、活动性和胃上皮损伤及其程度呈明显正相关。③慢性胃炎尤其是慢性活动性胃炎患者血清中的Hp抗体明显升高，并可在其胃液中检出Hp免疫球蛋白。④抗Hp治疗后慢性胃炎患者的胃粘膜组织病理学改变可明显改善，而Hp感染复发者炎症也复发。⑤正常志愿者吞服Hp菌悬液后，可引起急性胃炎的典型症状和病理学变化。⑥制备Hp胃炎动物（乳猪、猴）模型获得成功。⑦在自身免疫性胃炎，淋巴细胞性胃炎和术后胆反流性胃炎，Hp的检出率很低，提示Hp并不是胃炎的继发感染。因此，Hp做为胃炎的一种病原菌已基本满足Koch定律的要求。

2Hp与消化性溃疡

大量的研究表明，Hp与消化与消化性溃疡（PU）高度相关。Hp的检出率在十二指肠溃疡（DU）患者中高达95%～100％，在胃溃疡（GU）患者中可达70%～90%；Hp根除后溃疡的年复发率可降至10%以下，显着低于Hp仍阴性的病人，基于上述事实，Hp在PU中无疑起重要病因作用。且与PU的复发及顽固不愈息息相关。Hp在PU发病中究竟起多大作用，尚有不同的看法，但目前比较一致的观点认为，当无别的促发因素，如服用非甾体类抗炎药（NSAID）或卓一艾综合征存在时，Hp感染是几乎所有DU和绝大多数GU发生的先决条件。

3Hp与胃癌的关系

越来越多的研究表明，Hp感染与胃癌的发生亦有较密切的联系。很多人对有关Hp感染患者胃癌易感性进行了研究，认为Hp感染后细胞DNA含量及S期细胞数明显增加，提高细胞的快速更新和DNA损伤的危险性增加。研究Hp感染与胃癌间的关系展示了广阔的前景。①大量的流调资料表明，胃癌高发区Hp感染率显着高于低发区。②前瞻性研究表明，Hp阳性者在随访的1a～4a间，患胃癌的危险性较Hp阴性者增加3倍以上。③在社会经济状况较低的人群中有着较高的Hp感染率，同时也发现胃癌危险性增加，两者似乎有相同的社会经济背景，有人认为，世界范围内胃癌发病率的下降，至少部分与社会经济条件改善，Hp感染率下降有关。④儿童时期居住过分拥挤与成年后胃癌危险性增加有关。据推测可能是在居住稠密的人群，Hp更易于传播，从而也增加了患癌的危险性。⑤Hp阳性患者胃粘膜肠上皮化生率显著高于Hp阴性患者，说明Hp可能对肠化生的形成有促进作用。⑥胃癌患者Hp感染率显著高于正常对照组及其它肿瘤患者。

也有人认为，慢性胃炎能缓慢发展为胃粘膜萎缩。且随年龄的增加而加重，发生胃癌的危险性显著增加。伴有明显萎缩性病变的慢性胃炎常见于Hp初发年龄较早的人群，其可能的解释为这些人有足够的时间发展为萎缩性病变。伴有重度萎缩的慢性的胃窦炎患者，发生胃癌的危险性将比普通人高出18倍。而伴有胃窦、胃体重度萎缩的全胃炎患者发生胃癌的危险性要比正常人高出几十倍。因此，有人提出至少在某些病例，胃癌被看出是Hp感染的一种晚期合并症。

尽管很多临床及流行病学调查资料表明Hp与胃癌的发生有关，但仍有很多矛盾和不能圆满解释的地方。如正常人群中有相当高的Hp阳性率，但患胃癌者毕竟是少数，而相当部分的胃癌并无Hp感染。非洲地区有着较高的Hp感染率。但胃癌发病率却相对较低。不论Hp与胃癌间是否有着明显的因果关系，Hp的发现，毕竟给胃癌病因学研究开辟了新的途径，为胃癌的一级预防增加了新的内容。在美国已开始了胃癌高发区的Hp干预性治疗，这项前瞻性研究定将给Hp与胃癌关系提供更有力的证据。国内也应尽快开始这方面的工作，尽快建立Hp诱发或促发胃癌的动物模型也势在必行。由于Hp既易诊断，又可治疗，研究Hp与胃癌的关系无疑将有着光明的前景。

幽门螺杆菌与老年胃十二指肠疾病的关系

为探讨本地区老年人Hp感染程度与胃十二指肠疾病的关系，我们对有上消化道不适症状的60岁以上的老年患者进行胃镜检查的同时，采用快速尿素酶试验测定患胃十二指肠疾病的老年人胃窦部Hp感染的情况，以便了解它们之间的关系。现报告如下。

1 对象和方法

1.1 对象

本组因有上消化道不适症状作内镜检查的60岁以上的老年患者193例，占同期检查人数的13.8%(193/1737)。男136例，女57例。男:女=2.5:1。60岁～69岁161例，70岁～79岁31例，80岁以上的1例。病程最短4d～5d，最长达40年，半数以上的病程在半年以内。临床表现为上腹不适、疼痛、腹胀、嗳气、返酸、呕血、黑便等。内镜所见，活动性胃炎21例，非活动性胃炎47例，萎缩性胃炎24例，胆汁返流性胃炎6例，残胃炎10例，胃溃疡40例，十二指肠球溃疡17例，胃癌23例，食道癌5例。

1.2 方法

全部病例均采用福建三强生化有限公司生产的HpUT药盒，严格按说明书操作，在常规胃镜下，从胃窦部大弯侧距幽门口2cm～3cm处钳取一块胃粘膜组织立即放入尿素酶试剂盒的溶液中，室温下观察5min，如溶液呈樱桃红色或桔红色者为阳性，有52例同时作Warthin-starry嗜银染色找Hp菌。

表1 胃十二指肠疾病193例Hp检测结果

2 结果

本组193例作了Hp定性检查,阳性者105例,阳性率53.9%(表1)。嗜银染色者阳性率49.3%。同期作Hp定性检查的60岁以下患者1196例，Hp阳性为681例，阳性率57.02%（表1）。

从检测结果可看出：活动性慢性胃炎组、胃溃疡、球部溃疡Hp阳性率显著高于其它组。而非活动性慢性胃炎组与胃癌Hp阳性率相近。胆汁返流性胃炎、残胃炎Hp感染率较低。

3 讨论

近几年来，Hp与胃部疾病的关系的研究已日益受到广泛重视。Hp已逐渐被认识作为一种独特的人类慢性胃部炎症的重要病源菌。

3.1 Hp与慢性胃炎的关系

本组资料显示，老年人各型慢性胃炎Hp的感染率不同，活动性慢性胃炎Hp的感染率为85.7%，非活动性慢性胃炎40.4%，两组比较具有显著性统计学差异（P<0.01），与文献报告相符。Hp感染程度与慢性胃炎的严重程度呈正相关，炎症愈重，Hp阳性率愈高。提示Hp的存在与慢性胃炎的活动性有密切关系。活动性程度一定程度上反映细菌感染程度。本组胆汁返流性胃炎，可能当碱性返流液与胃粘膜接触时，胆盐、溶血性卵磷脂在引起胃粘膜炎症的同时，也直接杀伤了Hp。胃粘膜屏障的破坏，损害了Hp表面这一保护层，破坏了以中性和微需氧的环境，使之难以生存，Hp暴露于胃腔表面，更易被胃酸或口服抗生素药物杀灭。

3.2 Hp与消化性溃疡的关系

本组胃溃疡与十二指肠球部溃疡的Hp阳性率分别为75%与88.2%。明显高于非活动性慢性胃炎和胃癌与文献报告相符，支持Hp感染与消化性溃疡密切相关的观点。我们另一组资料以铋剂合用H2受体阻滞剂治疗Hp阳性的消化性溃疡60例，观察发现溃疡愈合率96.0%，Hp消失率85%，胃粘膜炎症减轻56.8%，而对照组28例的溃疡愈合率82.0%，Hp消失率为71.4%，胃粘膜炎症好转率18.0%。顽固性溃疡经其它治疗无效者，杀灭此菌后可加速溃疡愈合。愈合后的溃疡凡Hp阳性者，约60%复发，而阴性者只有2.6%复发。所以学者提出所谓“无Hp即无溃疡”的学说。与人们所公认的“无酸即无消化性溃疡”的传统学说相抗。但为何感染Hp的患者仅有一部分人发生消化性溃疡，而部分消化性溃疡患者又无Hp感染，这提示Hp感染与消化性溃疡关系还需进一步研究。

3.3 Hp与胃癌的关系

流行病学资料认为，Hp感染与胃癌有关。长期Hp感染者患胃癌的危险性为Hp阴性者的3～6倍。在胃癌高发区Hp感染率也高。本组病例胃癌Hp感染率为47.8%，与非活动性慢性胃炎相近。提示Hp感染在胃癌的发生中起一定作用，很可能是胃癌发生的重要始发因素之一。

3.4 Hp与年龄的关系

文献提及Hp抗体的阳性率随年龄的上升而增加。本组病例同期检查的60岁以下患者感染率为57.2%，与60岁以上老年人相近，无明显统计学差异（P>0.05）。

幽门螺杆菌及血清胃泌素与十二指肠溃疡的关系

已经证实十二指肠溃疡患者的平均基础胃酸和最大酸分泌量以及餐后血清胃泌素水平明显高于正常人。近年还发现几乎所有的十二指肠溃疡患者的胃窦部寄生着幽门螺杆菌（Hp）。有力的流行病学证据表明Hp可引起十二指肠溃疡，但对引起溃疡的解释仍是推测性的。本文对Hp、胃泌素和十二指肠溃疡之间的关系进行研究，旨在探讨Hp相关性十二指肠溃疡的发病机理。

1 对象和方法

1.1 对象

本研究包括正常胃十二指肠粘膜（NGDM）、慢性活动性胃十二指肠炎（CAGDI）和活动性十二指肠溃疡（ADU）3组，均经内镜配合活组织检查证实，按Marshan和Nedenskov-Sprensen对胃、十二指肠炎的分类标准，将胃粘膜属0度和Ⅰ度者归为NGDM组，Ⅱ度和Ⅲ度归为CAGDI组，同时伴有十二指肠溃疡者归为ADU组。当内镜与病理学分类发生矛盾时以病理学分类为准。每组收集30例。年龄14岁～65岁，平均38.5岁。

1.2 方法

研究停用抗酸治疗72h以上，停用抗微生物药半月以上。内镜检查时各取两块窦部和球部活检标本。一块用于幽门螺杆菌尿素酶试验（HpUT），阳性者表示胃十二指肠粘膜有Hp寄生；另一块标本用于常规病理学检查。血清标本于内镜检查后即刻进蛋白餐（2枚熟鸡蛋）30min后从外周静脉血采集。胃泌素放免药盒由中国原子能研究所提供，血清胃泌素测定按说明书规定方法进行。对入选的30例ADU患者进行药物治疗（雷尼替丁，得乐冲剂和庆大霉素治疗4周后，再单用雷尼替丁2周），停药3d后用上述同样方法复查内镜、HpUT和血清胃泌素。对计数资料的3组比较采用X2检验；对计量资料的3组比较采用F检验，多组的两两比较采用q检验，两组之间比较采用t检验。

2 结果

Hp感染与胃型上皮化生见表1。从NGDM、CAGDI和ADU，在3组之间或两两比较空腹血清胃泌素水平均无区别，而餐后胃泌素水平均有统计学上的差异（表2）。在NGDM组从16例HpUT阳性。

表1 Hp感染与球部粘膜胃型

上皮化生（n=30，例，%）

bP<0.01。

表2 粘膜炎变程度和血清胃泌素水平（n=30,x±s(ng/L)

aP<0.05,bP<0.01,vsCAGD1

和14例阴性的血清胃泌素水平比较发现，空腹及餐后血清胃泌素水平均无统计学上的差异（表3）

经抗酸抗微生物治疗1月后复查，30例十二指肠溃疡27例愈合（90.0%）。其中23例（76.7%）HpUT转阴性，其升高的餐后血清胃泌素水平也降至正常，其余7例下降不显著（表4）

表3 HpUT与血清胃泌素水平（x±s(ng/L)）

表4ADU患者血清胃泌素水平（x±s(ng/L)））

aP<0.05,bP<0.01,vs治疗前。

3 讨论

对于胃窦部Hp感染是否为DU致病原愈来愈受到关注，Hp首先寄生于胃窦部，而溃疡却好发于十二指肠，二者究竟存在着何种内在联系一直是研究的焦点。本组资料表明，NGDM组内胃窦部粘膜可检出Hp，而十二指肠粘膜未能检出Hp，却有10%的检出胃型上皮化生，随着胃、十二指肠粘膜炎变程度加重，胃窦粘膜Hp的检出率（X2=33.1515，P<0.01）、十二指肠粘膜Hp和胃型上皮化生的检出率（X2=58.4046,P<0.01和X2=53.4582,P<0.01）均显升高，还发现3组胃型上皮化生的检出率均高于Hp的检出率（10%＞0，80%＞73.3%,96.7＞93.3%）。这些结果进一步验证了Hp可首先寄生于正常人的胃窦及幽门部粘膜，Hp的出现早于粘膜的炎性改变，也可作为活动性胃窦炎的重要标志。十二指肠粘膜的Hp感染迟于胃窦部，并出现于伴有胃型上皮化生的十二指肠粘膜上，胃型上皮的化生是胃酸作用的结果，也是对胃酸的一种保护性反应。

Hp通过何种途径或媒介因素发挥其致病原作用一直是医学研究的重要课题，血清胃泌素是由胃窦和十二指肠的G细胞分泌的，其中由胃窦G细胞分泌的小分子Gn是最有活力的胃泌素。在正常情况下胃酸升高到一定水平，胃窦D细胞被启动释放生长抑素，通过抑制胃泌素的分泌和降低壁细胞的敏感性，导致胃酸分泌减少，而使胃酸、胃泌素保持在正常水平，此为正常的负反馈机制。在AGDI和ADU患者，特别是后者，突了的特点是基础胃酸和最大酸分泌是升高的，通过正常的负反馈机制的调节、血清胃泌素水平应该降低。表2显示空腹血清胃泌素水平在AGDI和ADU组内并不降低。而餐后血清胃泌素水平明显高于NGDM组，表明这些患者通过胃酸调节胃泌素分泌的机制有缺陷，胃泌素在G细胞浆内的贮存量是增加的，与文献报告完全相符。

十二指肠溃疡患者既然存在胃酸抑制胃泌素释放的缺陷，进餐后又何以能增加胃泌素释放，其机理目前还不全部清楚。文献报道寄生在胃窦部的Hp具有高度活力的尿素酶能水解尿素产生氨并中和局部粘膜层的H+，可以改变胃窦粘膜的微环境，削弱胃泌素释放的正常的负反馈机制。另一方面局部产生的氨，通过脂质膜扩散，引起细胞损害，即胃窦粘膜炎性改变，进而导致胃窦部粘液、粘膜屏障受损，H+反弥散增加，胃窦局部粘膜层pH升高。另外随着胃窦粘膜炎症的加重，D细胞功能受损，分泌生长抑素减少，G细胞失去控制。以上三点均可导致胃泌素分泌增加，贮存在胞浆内，当受到进餐等刺激时可引起血清胃泌素水平的升高。粘膜屏障受损，也可能引起乙酰胆碱和组织胺释放增加，升高的胃泌素、组织胺和乙酰胆碱作用于壁细胞的相应受体，导致胃酸分泌增加。长期的高胃酸负荷和Hp通过胃液移居于胃型上皮化生的十二指肠粘膜是十二指肠溃疡形成的先决条件。

从本文资料发现在NGDM组内HpUM阳性和阴性之间的血清胃泌素水平，在空腹和餐后时均没有区别，这表明Hp寄生于胃窦部的初期阶段，正常的负反馈机制是完好的，当Hp感染引起明显的胃窦炎时，餐后的血清胃泌素水平才出现升高，这表明餐后胃泌素水平的增加是继发于Hp感染之后，由于正常的负反馈机制的被抑制，引起高胃酸和高胃泌素分泌。而随着Hp的消除，受抑制的负反馈机制又可恢复正常，可见这一负反馈机制的缺陷是从Hp感染后获得的，还可以借Hp的被根除而恢复。由此可推测，在十二指肠溃疡形成过程中，Hp充当始动因子，胃泌素充当媒介因素。从这一假说出发，治疗DU不仅应注意溃疡的愈合，也应注意Hp感染的根除，只有这些才能最后治愈溃疡。

十二指肠溃疡血浆胃泌素与幽门螺杆菌感染关系

我院1992-10～1993-06，检测了60例十二指肠溃疡（DU）和无胃十二指肠溃疡的Hp抗体和血浆胃泌素浓度，旨在探讨血浆胃泌素浓度与Hp感染关系和治疗有关问题，现报道如下。

1 对象和方法

本组资料计60例，其中男40例，女20例。年龄25岁～55岁，均无肝、肾疾患。血浆胃泌素浓度和Hp抗体测定发二组进行比较。甲组30例为对照组（无胃十二指肠溃疡）、乙组30例，为DU组（均经内镜证实）。血浆胃泌素浓度以RIA定量测定。Hp感染检测盒，由上海消化病研究所提供。根据其光密度（OD）值的大小来判断结果。检测前3d均停止服用抑酸剂和抗菌素、助剂等。

2 结果

对照组Hp阳性者为6例（20%）、DU组Hp阳性者为28例（93%）。对照和DU组，其胃泌素浓度，前者低值为19mg/L；高值为91mg/L。后者低值为27mg/L；高值为97mg/L。Hp抗体与胃泌素浓度见表1。

表1 Hp抗体与胃泌素浓度关系（n=30，x±s）

aP<0.05，vs对照组。

3 讨论

Hp感染与DU有高度相关性，几乎均为阳性。Hp定位在胃窦部粘膜与粘液之间生长、繁殖，粘液成为保护膜，它可引起特异性免疫，产生特异性抗体，Hp感染越重，炎症反应和粘膜损伤越重，血清中特异性抗体滴定度越高。其敏感性为94%，特异性为81%，阳性预计值为96%。本对照组为20%，DU组为93%，与文献报道大致相同。二组血浆胃泌素浓度，DU组高于对照组（P<0.05）。Hp感染引起血浆胃泌素浓度增高的机制为Hp可产生大量尿素酶，它分解胃液、食物、唾液、局部血液及组织中的尿素为二氧化碳和氨。氨中和胃内酸性环境使pH值升高，损伤了胃酸对胃窦G细胞的负反馈机制，致使血中的胃泌素增高；其次，由于Hp的代谢产物抑制壁细胞的功能，G细胞代偿性分泌增加。推测Hp感染引起胃泌素释放是通过改变胃泌素释放大幅度增加。Mccoll报道血浆胃泌素增高亦可见于Hp阴性者，且观察到，不论有无Hp感染，均可造成胃窦部碱化引起胃泌素增高。此提示高胃泌素血症不能以胃窦表面尿素酶活性所致pH值升高来解释。根据上述理论推测，Hp感染阳性者，其血浆胃泌素浓度分泌增高，一方面可刺激壁细胞分泌酸，另一方面又刺激壁细胞增生，导致酸分泌进一步增加，酸的分泌增多，可使DU内pH值降低，从而导致DU。因而认为泌酸增多不是DU的原因而是Hp感染的后果。这对治疗有指导意义。除了应用杀灭Hp药物和H2受体阻滞剂外，尚需加用胃泌素所致的泌酸增高和壁细胞增生的环节。综上所述，Hp感染与血浆胃泌素浓度有一定相关性，但其引起胃泌素增高的机制仍需进一步阐明。对根治Hp感染和抑酸剂的使用有待于建立更合理的治疗方案。

消化性溃疡胃液sIgA与幽门螺杆菌感染

1 对象和方法

1.1 对象

所有病例均经我院胃镜室检查及病理证实，其中胃溃疡（GU）31例，平均39岁；十二指肠球部溃疡（DU）35例，平均30岁。对照组30例，平均32.7岁，胃镜活检证实无明显异常者。

1.2 方法

内镜下用塑料管通过活检孔，抽取胃液5ml～10ml，胃液pH值6以下者用碳酸氢钠粉调至6-8，然后冰融，离心，以上清液备测。胃液sIgA测定采用放射免疫法，药盒由中国原子能科学研究院提供。胃窦粘膜幽门螺杆菌（Hp）的检测，采用快速尿素酶半定量法，药盒由福建三强公司提供。

2 结果

从表1看出GU，DU胃IgA均较正常降低，且有明显统计学意义。从表2看出活动期溃疡病组sIgA水平均较非活动组降低（P<0.01）。按消化性溃疡胃液sIgA水平为低、中、高sIgA三组，低sIgA组Hp（+++）者占66.7%,中sIgA组Hp(+++)者占46.7%,高sIgA组Hp (+++)者16.7%,sIgA水平越低,Hp感染组别越高(见表3)。

表1 消化性溃疡胃液sIgA变化（x±s,g/L）

bP<0.01,vs对照组。

表2 消化性溃疡活动与非活动组sIgA比较（g/L）

bP<0.01,vs活动组。

表3 消化性溃疡sIgA与Hp感染级别关系

P<0.05,X=215.23

3 讨论

消化性溃疡的病因学说较多，近年来，多数学者认为与Hp感染有密切关系，有此国外学者认为可能与免疫紊乱有关，我们曾对消化性溃疡全身及局部体液及细胞免疫进行了研究，也发现存在免疫功能紊乱。全身性免疫反应与局部免疫反应不同，粘膜的局部免疫功能如何，更能说明与溃疡病的关系。在局部粘膜的免疫功能中sIgA起着最为重要的作用。关于消化性溃疡胃液sIgA水平及其与Hp感染的关系，国内报告不多。我们的结果显示，胃十二指肠溃疡患者胃液sIgA水平较正常对照组降低，其中以十二指肠溃疡降低最为明显。在活动期胃十二指肠溃疡胃液sIgA水平低于非活动期。尽管目前认为Hp与消化性溃疡关系密切，但是，在消化性溃疡为何Hp感染率高，尚无满意解释。我们观察发现消化性溃疡患者sIgA水平越低，Hp感染程度越重。SIgA是肠道最重要的保护性抗体，它具有阻抑细菌粘附、中和毒素、溶菌作用。SIgA降低表明局部粘膜的抗感染能力低下，可能更易受细菌侵袭。这提示胃十二指肠溃疡，尤其是十二指肠溃疡sIgA较低，可能是Hp感染程度较重的重要原因之一。SIgA降低的原因有待进一步探讨。

幽门螺杆菌与上消化道疾病的关系

Warren于1983年首次从人胃粘膜活检标本中发现一种弯曲状细菌，后来命名为幽门螺杆菌（简称Hp）.1985rh Marhall提出此菌可能为慢性胃炎或消化性溃疡的致病菌。我院胃内镜室对此进行探讨。本资料共有240例，243人次，均为胃内镜检查患者，从Hp检出率来看，均支持Marhall等的观点。现将资料分析如下。

1 对象和方法

1.1 对象

243人中，男169例，女74例，年龄16～79岁，均为门诊和部分住院病人。并经内镜诊断为慢性胃炎，消化性溃疡及上消化道肿瘤患者。

1.2 方法

采用我国兰州军医学校研制之产品“幽门螺杆菌快速检出诊断盒”。取材于胃内镜检查患者之胃粘膜或组织。诊断为慢性浅表性胃炎、十二指肠炎者，则在胃窦部（距幽门5cm内）钳取一小块；诊断为胃或十二指肠溃疡病者，在溃疡周围或胃窦部钳出一小块；诊断为食管癌或胃癌者则在癌肿组织周围钳取一小块，然后掀开诊断盒背后的标签，将所取组织用无菌小摄夹取插入试剂中，封上原标签，在常温下观察颜色变化。标本周围出现红色或桔红色者为阳性，表示有Hp存在；24h无颜色变化者为阴性，表示无Hp存在。

2 结果

见表1

表1 上消化道疾病Hp检查结果

3 讨论

本材料中，慢性胃十二指肠炎之Hp检出率为45.4%，较国内报道低，与解放军医院朱均等报道为83.7%，北京协和医院陈寿坡报道为85.2%等相比较，结果不尽相同。但与第二次全国消化系病学术会议记录中所述慢性胃炎Hp检出率为38.2%～78.5%相类同。我们认为，本资料检出率偏低的原因可能与慢性胃炎类型有关。有人报道胃活组织检查标本可分为3种类型，无炎症型；慢性胃炎型；慢性活动性胃炎型。后者带菌率较高，且细菌数量多。本资料可能属前一类型，胃术后残胃炎（返流性）Hp检出率更低，为25%，与慢性胃炎的Hp检出率差异显著，笔者认为返流性胃炎可能与Hp感染无关，返流性胃炎其致病因素可能为粘膜的化学损伤，胆汁返流也能破坏粘膜层，不利Hp生存。总言之，Hp感染虽与慢性胃炎有关，但不是唯一的致病因素。

周吉民等报道，胃溃疡Hp检出率为88.2%，十二指肠溃疡Hp检出率为71.4%，唐承薇报道消化性溃疡Hp检出率为94%～100%，本资料为93.1%～96.1%，结果与上述报道相一致。目前，Hp的致病性已被人们所接受。而其致病原理则认为，Hp具有较强的尿素酶活性，感染时，可在粘膜上产氨增高，引起Na⁺梯度改变及Na⁺-K⁺-ATP酶活性下降，从而不但阻止H⁺由粘膜向胃腔内弥散，且使胃腔内H⁺及渗导致粘膜组织损害。在消化性溃疡中，多同时伴有胃炎或十二指肠炎，故认为Hp与慢性胃炎、十二指肠炎及消化性溃疡均有密切关系。Hp感染的发现使人们意识到重新估价对慢性胃炎和消化性溃疡的治疗。相继出现了一些能杀灭Hp菌的疗效高，抗复发性强的新药。

国内文献报道甚少，本资料Hp检出率为0。一般来说，胃恶性肿瘤大部分为巨大溃疡，而良性溃疡面积较小，两者之间有一定差别，当然，有时也不容易鉴别。而恶性与良性溃疡之Hp检出率却有显著差异，我们认为，消化道肿瘤与Hp感染无相关性，但因例数不多，有待今后进一步探讨。

陈斯麟 许秀兰

幽门螺杆菌与消化性溃疡及胃炎的关系

1983年Warren等报告出幽门螺杆菌（Hp）后，Hp成为医学界尤其从事消化系疾病专业医师感兴趣的课题，作者对361例病人胃粘膜进行Hp定性检验，旨在探讨Hp与消化性溃疡和慢性胃炎的关系及Hp感染途径问题。

1 对象和方法

1.1 对象

本组361例病人均为门诊及住院病人，男224例，女137例，年龄17岁～79岁；主要症状为上腹痛、恶心、呕吐、便血等。对照组胎儿13例均为产后10h以内，3月～6.5月新鲜胎儿；Hp快速检验药盒为兰州军医学校生产。

1.2 方法

通过胃镜分别取十二指肠球部、胃窦部小弯壁侧距幽门口3cm～5cm处粘膜，或充血、水肿、糜烂较明显部位粘膜，将新鲜粘膜组织植入Hp快速诊断盒内，在室温下观察24h，诊断药盒内指示剂变红色者为阳性；于胎儿产出后1h内解部取胃窦部（胃窦、胃体部分辨不清者取胃体远端之粘膜）粘膜植入Hp快速诊断药盒内，在室温下观察24h，观察标准同上。另外用TB注射器测量胎儿胃内粘液量及pH值。在操作过程中尽量避免不同部位材料相互污染。

2 结果

本组对361例病人胃肠粘膜进行Hp定性检验，胃窦部Hp阳性率58.1%，十二指肠球部Hp阳性率10.9%，两部位Hp分布有显著差异（P<0.01）。

3 讨论

综述北医三院、南方医院、第四军医大及沈阳等地报告材料，Hp对人体胃肠粘膜感染比较普遍，感染率63%～92%，说明我国人口胃肠粘膜Hp感染率比较高，与地区、饮食、水源等无明显关系，但感染源及感染方式至今尚不明确。本文对照组13例胎儿胃内粘液为硫酸粘蛋白、pH值6～7，能满足Hp微氧弱酸的生活环境，13例胎儿胃粘膜Hp定性检验阴性，证实胎儿胃粘膜无Hp存在。设想胎儿Hp感染源为母亲，感染方式为血液循环，说明Hp不能经血液循环透过胎盘感染胎儿。南方医院同时测32对母亲和新生儿的抗HpIgG水平，两者呈明显正相关，小于或等于6个月婴儿抗HpIgG阳性率21.7%，高于其它年龄组，他们推测新生儿及婴幼儿体内抗HpIgG通过胎盘自母亲，这一推测为本文设想从免疫学方面提供了实验根据。本文7例正常成年人胃窦部粘膜Hp定性检验阴性，Johnston等于11次正常胃窦部粘膜Hp检验中仅检出一次Hp，又于38次正常十二指肠粘膜Hp检验中未发现Hp，两者研究结果相一致证实Hp与人体胃肠粘膜不是正常寄生关系。通过对胎儿、新生儿、婴幼儿、正常成人免疫学及细菌学的研究，本文认为对人体胃肠粘膜与Hp不是正常寄生关系而是外源性感染，感染方式可能直接接触，Hp不能经血液循环透过胎盘。

1983年Warren等首次报告在慢性活动性胃炎中存在Hp，此后国内对Hp研究非常活跃，多数研究成果支持Hp与消化性溃疡、慢性胃炎有关的设想，推测Hp可能是上述疾病的病因或是一个重要因素。本文观察361例病人，Hp阳性组与Hp阴性组中慢性浅表性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部溃疡发病率无显著差异P>0.05，仅慢性萎缩性胃炎发病率两组有显著差异P<0.05。根据本文资料分析消化性溃疡、慢性胃炎病因是多元性的，Hp在上述疾病发病过程中可能仅是一个因素，而且不是决定性因素，这对临床具有指导意义。

Hp快速诊断药盒机制是Hp水解尿素产生氨，氨与指示剂发生反应是一种间接Hp定性检验方法。江民用直接涂片法、分离培养法、组织病理学三种方法进行Hp检验，其中直接涂片法、分离培养法Hp检验结果和1983年Marshall,1985年Zmnlprice对Hp的检验结果均与本文Hp定性检验结果一致或近似，说明Hp快速诊断药盒是一种较准确的Hp定性检验方法。

消化性溃疡与幽门螺杆菌感染的关系

消化性溃疡病是一种慢性疾病具有自然缓解和反复发作的特点。本世纪初期本病的发病机理曾认为与补液和饮食因素有关，而在1983年有人首先从胃及十二指肠疾病患者的胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（Hp）并发现该菌与消化性溃疡高度相关，大量的研究表明，Hp的检出率在十二指肠溃疡高达95%～100%，胃溃疡可达70%～90%。上述事实证明，Hp在消化性溃疡中的重要作用。

Hp多生长在胃粘膜深层，胃粘膜表面及胃窦部及胃小弯，也就创造了微需氧环境并免遭酸性胃液的伤害而能繁衍，据报道，该菌与自身免疫胃炎有密切关系，尤其与活动性慢性胃炎关系较大，该菌与消化溃疡有关，据国外文献报道慢性胃炎的检出率是55%～80%，胃溃疡检出率是54.5%～85.7%，十二指肠溃疡检出率是69.2%～100%。在我国慢性胃炎中活动性胃炎的Hp检出率显著高于非活动性者。

Hp引起慢性胃炎和溃疡病的机理，据报道此菌含有丰富的尿素酶，并有强大的分解尿素的作用，其尿素分解率（NH₄^-/mg蛋白）为36μmol/min±28μmol/min尿素分解后产生氨，一方面氨本身对细胞连接处有毒性作用，使组织损伤破坏了胃及十二指肠粘膜屏障使溃疡持续存在，另方面氨缓冲胃酸（碱化胃粘膜）损害粘膜的H⁺逆扩散使酸敏感性微生物向胃内转移，在十二指肠溃疡有活动性炎症时，该菌可殖居于胃已化生的上皮细胞处，胃化生和Hp的这种关系，可能是十二指肠溃疡的重要原因。另Hp与胃癌的关系，一些文献报道可知，胃癌患者的检出率为0%～25%，认为慢性胃炎为癌前期，因慢性胃炎与Hp关系密切故检出率高。

关于治疗方面，由于Hp的研究推动了临床对慢性胃炎及消化性溃疡治疗，目前主要是抗生素及枸椽酸铋的应用。