6 分子免疫学

Clayton等于1989年首次在大肠杆菌内构建了Hp的DNA基因库。他们筛选出一株能同特异性抗血清反应的阳性克隆(γcp2)。该克隆的表达产物系Mr66 000的多肽片断。免疫印迹分析多肽能同特异性Hp抗血清反应。将该DNA提取物经内切酶分析显着该DNA尚含有一个17 000的DNA除编码Mr66000的蛋白外,尚可编码Mr31 000的蛋白质抗原。免疫印迹显示在大肠杆菌中表达的这些抗原同在Hp菌体的抗原具有相同的Mr,并存于所有Hp菌株内。点杂交和间接免疫荧光染色证实由这些多肽产生的抗血清仅同Hp反应。表达这些抗原的DNA经用32p标记显示仅能同Hp菌株杂交。用亲和纯化的尿素酶多克隆抗体的免疫印迹显示这些克隆的抗原是尿素酶分子的一部分,但并无尿素酶活性。

用上述DNA探针和重组DNA表达Hp特异性抗原对探知无法培养的Hp,如唾液、粪便中细菌,探讨其致病机理和血清学诊断会有较大帮助。一旦筛选出的DNA克隆能够表达出特异性强、致免疫性高的抗原后,将会在临床应用中发挥更大的作用。